本文關(guān)鍵詞：原發(fā)性高血壓病人血清miRNAs差異表達(dá)譜研究

  更多相關(guān)文章： 高血壓 miRNA差異表達(dá)譜 miR-132 miR-155 基因芯片

【摘要】：目的:通過miRNA芯片技術(shù)獲得原發(fā)性高血壓病人和健康人血清中差異表達(dá)的miRNAs譜,通過qRT-PCR技術(shù)驗(yàn)證芯片結(jié)果的可靠性,生物信息學(xué)分析關(guān)鍵miRNAs調(diào)控的靶基因及所涉及的信號通路,闡明miRNA在高血壓發(fā)生發(fā)展中的作用。方法:收集20例高血壓病人和10例健康人的血清標(biāo)本,Trizol試劑提取總RNA;采用miRNA基因芯片技術(shù)檢測高血壓病人和健康人血清中差異表達(dá)的miRNAs;運(yùn)用qRT-PCR技術(shù)驗(yàn)證芯片篩選出的差異表達(dá)的兩個(gè)miRNAs:miR-132和miR-155;通過生物信息學(xué)分方法分析miR-132和miR-155所調(diào)控的靶基因及涉及到的信號通路,分析miR-132和miR-155是如何調(diào)控信號通路影響高血壓的發(fā)生發(fā)展。結(jié)果:1.獲得高血壓病人血清的差異miRNAs表達(dá)譜。高血壓病人中,上調(diào)的miRNAs有33個(gè);而下調(diào)的miRNAs有12個(gè)。2.高血壓病人中,基因芯片檢測發(fā)現(xiàn),上調(diào)倍數(shù)最大的為miR-132,上調(diào)29.3389倍;下調(diào)倍數(shù)最大的為miR-155,下調(diào)-15.2452倍。3.20例高血壓病人中,miR-132的相對平均值為102.8±9.3,10例健康人中,miR-132的相對平均值為5.2±0.5,上調(diào)倍數(shù)為24.2313倍。20例高血壓病人中,miR-155的相對平均值為1.6±0.2,10例健康人中,miR-155的相對平均值為19.1±1.3,下調(diào)倍數(shù)為-12.2337倍,這兩個(gè)miRNA分子在基因芯片中的表達(dá)趨勢和q RT-PCR驗(yàn)證結(jié)果一致。4.miR-132調(diào)控的靶基因有261個(gè),miR-155調(diào)控的靶基因有440個(gè)。261個(gè)miR-132調(diào)控的靶基因涉及的信號通路主要包括:VEGF、MAPK、p53、TGF-β、Wnt等信號通路;440個(gè)miR-155調(diào)控的靶基因涉及的信號通路主要包括:MAPK、Jak-STAT、mTOR、ErbB、TGF-β、細(xì)胞骨架等信號通路。結(jié)論:1.獲得了高血壓病人與健康人血清的miRNAs差異表達(dá)譜,在高血壓血清中,上調(diào)的miRNAs有33個(gè),下調(diào)的miRNAs有12個(gè)。2.基因芯片檢測發(fā)現(xiàn),高血壓病人中,上調(diào)倍數(shù)最大的為miR-132;下調(diào)倍數(shù)最大的為miR-155。血清學(xué)樣本檢測發(fā)現(xiàn),miR-132和miR-155表達(dá)水平與基因芯片結(jié)果一致。說明基因芯片結(jié)果可靠。3.生物信息學(xué)分析結(jié)果表明,miR-132和miR-155調(diào)控的靶基因涉及到信號通路功能復(fù)雜,其中MAPK、VEGR、p53、Jak-STAT信號通路可能在高血壓發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。
【關(guān)鍵詞】：高血壓 miRNA差異表達(dá)譜 miR-132 miR-155 基因芯片
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R544.11
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• Abstract9-12
• 第一章 引言12-16
• 1.1 高血壓發(fā)病與研究現(xiàn)狀12
• 1.2 miRNA與高血壓12-13
• 1.3 miRNA芯片技術(shù)13-14
• 1.4 研究內(nèi)容14-16
• 第二章 材料與方法16-20
• 2.1 材料16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-20
• 第三章 結(jié)果20-28
• 3.1 細(xì)胞總RNA的抽提結(jié)果20
• 3.2 基因芯片圖20-21
• 3.3 基因芯片檢測到的差異表達(dá)miRNAs21-22
• 3.4 差異表達(dá)譜的聚類分析22-23
• 3.5 qRT-PCR檢測miR-132，，miR-155表達(dá)水平23-24
• 3.6 miR-132和miR-155生物信息學(xué)分析24-28
• 第四章 討論28-33
• 4.1 高血壓病研究現(xiàn)狀28
• 4.2 miRNA在高血壓中的研究進(jìn)展28-29
• 4.3 高血壓miRNAs差異芯片結(jié)果分析29-30
• 4.4 miR-132與高血壓30
• 4.5 miR-155與高血壓30-31
• 4.6 展望31-33
• 結(jié)論33-35
• 參考文獻(xiàn)35-43
• 文獻(xiàn)綜述 心血管疾病中microRNA研究進(jìn)展43-53
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 攻讀學(xué)位期間的科研成果53-55
• 致謝55

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本文編號：729022