發(fā)布時(shí)間：2017-08-17 04:18

  本文關(guān)鍵詞：姜黃素介導(dǎo)THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞極化及其機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 姜黃素 TLR4 MAPK NF-κB 巨噬細(xì)胞極化 動(dòng)脈粥樣硬化

【摘要】：目的本研究旨在探討姜黃素對(duì)THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞極化及炎癥反應(yīng)的影響,并且進(jìn)一步探討其可能的分子機(jī)制。方法用佛波酯(Phorbol myristate acetate,PMA)誘導(dǎo)人THP-1單核細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞,并用1μg/ml脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)+20 ng/ml人干擾素γ(interferon-γ,INF-γ)使細(xì)胞進(jìn)一步極化為M1型巨噬細(xì)胞。用氚標(biāo)胸腺嘧啶核苷([3H]thymidine,3H-Td R)滲入法檢測(cè)不同濃度姜黃素對(duì)巨噬細(xì)胞增殖的影響。分別用熒光定量Real-time PCR和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)各分組中炎癥因子TNFα、IL-6及IL-12的轉(zhuǎn)錄和分泌情況。流式細(xì)胞術(shù)和Western blot方法檢測(cè)各組巨噬細(xì)胞的極性情況及Toll樣受體4(Toll like receptor4,TLR4)-絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)信號(hào)通路的表達(dá)和磷酸化水平。另外,TLR4小干擾RNA和MAPK抑制劑用于研究TLR4-MAPK/NF-κB信號(hào)通路在介導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化中的作用,以探討姜黃素在調(diào)控巨噬細(xì)胞極化的分子機(jī)制。結(jié)果姜黃素在0~30μmol/L的濃度范圍內(nèi),對(duì)THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞增殖無(wú)明顯抑制作用,且其本身不影響巨噬細(xì)胞極性。姜黃素能明顯抑制M1型巨噬細(xì)胞的極性及TNFα、IL-6和IL-12的表達(dá),且呈濃度依賴性(P0.05)。與對(duì)照組相比,姜黃素能明顯抑制TLR4的表達(dá)及下游MAPK(p38,ERK1/2及JNK1/2)和NF-κB(IκBα及p65)通路的磷酸化(P0.05)。同時(shí),與空白對(duì)照組相比,TLR4小干擾RNA和MAPK抑制劑(SP600125,SCH772984及Skepinone-L)可分別減少姜黃素對(duì)M1型巨噬細(xì)胞極性的抑制作用(P0.05)。結(jié)論姜黃素可通過(guò)抑制TLR4-MAPK/NF-κB通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控巨噬細(xì)胞的極化,從而達(dá)到抑制炎癥反應(yīng)的作用。
【關(guān)鍵詞】：姜黃素 TLR4 MAPK NF-κB 巨噬細(xì)胞極化 動(dòng)脈粥樣硬化
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R543.5
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表6-8
• 摘要8-9
• Abstract9-11
• 引言11-15
• 1 姜黃素對(duì)不同亞型巨噬細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的抑制作用15-32
• 1.1 前言15-16
• 1.2 材料和試劑16-18
• 1.3 方法18-23
• 1.4 結(jié)果23-29
• 1.5 討論29-31
• 1.6 小結(jié)31-32
• 2 姜黃素對(duì)巨噬細(xì)胞極性的介導(dǎo)作用及其機(jī)制的研究32-60
• 2.1 前言32-33
• 2.2 材料和試劑33-35
• 2.3 方法35-38
• 2.4 結(jié)果38-55
• 2.5 討論55-59
• 2.6 小結(jié)59-60
• 3 結(jié)論60-61
• 參考文獻(xiàn)61-65
• 附錄1 巨噬細(xì)胞極化與動(dòng)脈粥樣硬化65-72
• 附錄2 姜黃素在心血管疾病中的應(yīng)用——從臨床到基礎(chǔ)72-78
• 致謝78-79
• 攻讀碩士期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文79

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