IL-22對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠心肌成纖維細(xì)胞膠原Ⅰ表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:觀察IL-22對(duì)體外培養(yǎng)BALB/c小鼠的心肌成纖維細(xì)胞膠原Ⅰ的基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)以及其蛋白表達(dá)變化的影響,旨在探索IL-22對(duì)小鼠心肌成纖維細(xì)胞膠原I表達(dá)的影響。方法:從1周齡BALB/c小鼠心臟中分離培養(yǎng)心肌成纖維細(xì)胞并純化,培養(yǎng)心肌成纖維細(xì)胞并利用第2-4代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。依據(jù)形態(tài)學(xué)以及免疫熒光對(duì)心肌成纖維細(xì)胞內(nèi)波形蛋白標(biāo)記進(jìn)行細(xì)胞鑒定。心肌成纖維細(xì)胞應(yīng)用不同濃度IL-22刺激48h后,提取細(xì)胞的mRNA并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后使用熒光定量PCR檢測(cè)心肌成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原前α鏈(COL1A1)mRNA的表達(dá)變化;使用免疫熒光標(biāo)記心肌成纖維細(xì)胞中Ⅰ型膠原蛋白并于熒光顯微鏡下拍照,然后使用軟件對(duì)圖像進(jìn)行分析,以測(cè)量光密度值來(lái)檢測(cè)Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果:1、用1ng/mL IL-22刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞COL1A1 mRNA的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P0.05);用100ng/mL IL-22刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞COL1A1 mRNA的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P0.05);用100ng/mLIL-22以及100pM S3I-201共刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞COL1A1 mRNA的表達(dá)明顯低于單用100ng/mL IL-22刺激組(P0.01)。2、用1ng/mL IL-22刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)明顯低于對(duì)照心肌成纖維細(xì)胞(P0.05):用100ng/mLIL-22刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P0.05);用100ng/mLIL-22以及100μM S3I-201共刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)明顯低于單用100ng/mLIL-22刺激組(P0.05)。結(jié)論:IL-22不同的刺激濃度對(duì)體外培養(yǎng)的心肌成纖維細(xì)胞膠原Ⅰ表達(dá)調(diào)節(jié)有差別,低濃度IL-22(1ng/mL)刺激下調(diào)其膠原Ⅰ的基因轉(zhuǎn)錄以及其蛋白表達(dá),高濃度IL-22(100ng/mL)刺激上調(diào)其膠原Ⅰ的基因轉(zhuǎn)錄以及其蛋白表達(dá);高濃度IL-22刺激上調(diào)其膠原Ⅰ的基因轉(zhuǎn)錄以及其蛋白表達(dá)可能是通過(guò)STAT3信號(hào)通路所實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】:白介素22 心肌成纖維細(xì)胞 膠原
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R54
【目錄】:
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-5
- 摘要5-7
- 英文摘要7-10
- 前言10-12
- 材料以及試劑12-22
- 結(jié)果22-25
- 討論25-33
- 結(jié)論33-34
- 參考文獻(xiàn)34-38
- 綜述一38-55
- 參考文獻(xiàn)46-55
- 綜述二55-79
- 參考文獻(xiàn)64-79
- 附錄79-80
- 致謝80-81
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文81
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,本文編號(hào):628068
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