本文關鍵詞：重組SAK-HV對小鼠主動脈內皮細胞的作用及機制研究

  更多相關文章： SAK-HV 小鼠主動脈內皮細胞 炎癥 凝血酶 膽固醇吸收

【摘要】：目的：細胞水平研究SAK-HV對小鼠主動脈內皮細胞作用機制；SAK-HV口服給藥對高脂大鼠的療效評價及機制研究。方法：1、不同濃度SAK-HV處理MAEC24hrs,檢測細胞增殖、周期及凋亡情況。不同時間不同濃度的SAK-HV處理MAEC;凝血酶模擬體內炎性環(huán)境,同時分別加入SAK-HV及水蛭素12肽共同處理；相同摩爾濃度的SAK-HV、SAK、RGD及水蛭素12肽分別處理MAEC,檢測炎癥相關通路活化情況及炎性因子表達。細胞免疫熒光技術檢測SAK-HV, SAK是否進入細胞。結合分子馬達技術和質譜分析技術篩選細胞中能與SAK-HV發(fā)生交互作用的蛋白。2、高脂喂養(yǎng)Wistar大鼠建立高脂血癥模型,按體重隨機分為：模型組、溶劑對照(碳酸氫鈉)組、給藥(SAK-HV)組及陽性對照(阿托伐他汀)組�？诜o藥6周后,檢測各組血TG, TC水平；油紅染色檢測肝臟脂肪沉積；檢測小腸NPC1L1及肝臟ABCG5/G8 mRNA及蛋白水平表達情況；檢測主動脈中ROS含量、血清中SOD活性及MDA含量。結果：1、不同濃度SAK-HV處理MAEC 24hrs,對其增殖、周期及凋亡均無顯著影響。SAK-HV處理6hrs,可濃度依賴地上調MAEC炎性因子表達,變化趨勢與P65磷酸化水平變化趨勢一致。SAK-HV短時間處理(40min)可濃度依賴地顯著抑制凝血酶誘發(fā)的P65、P38活化,但抑制效果弱于水蛭素12肽。而長時間處理(6hrs)則濃度依賴地增強炎性因子IL-6、 MCP-1、ICAM-1及VCAM-1表達。相同摩爾濃度的SAK-HV、SAK、RGD三肽及水蛭素12肽分別刺激MAEC細胞,結果顯示,只有SAK-HV引起P65磷酸化及炎性因子水平升高。細胞免疫熒光檢測顯示SAK-HV可進入細胞質,但無法進入細胞核。結合分子馬達技術和質譜分析篩選出MAEC細胞中SAK-HV的潛在相互作用蛋白HSP70,二者間的相互作用和功能尚待進一步驗證。2、SAK-HV組較他汀組有更強的降血脂效果,并更有效地改善肝臟脂肪沉積。SAK-HV組小腸NPC1L1表達顯著低于模型組,肝臟ABCG5/G8表達顯著高于模型組。同時SAK-HV組較他汀組有更好的抗氧化應激效應,包括主動脈ROS含量降低,血SOD活性升高,及血MDA含量降低。結論：1、SAK-HV對MAEC兼具抗炎、促炎兩相性。其水蛭素12肽誘發(fā)的抗炎作用在凝血酶誘導的炎癥環(huán)境下短時間處理(40min)占主導地位；隨刺激時間增加,其促炎作用逐漸顯現(xiàn)。SAK-HV可能形成新功能域通過NF-κB通路發(fā)揮促炎作用。2、SAK-HV口服給藥能抑制大鼠小腸組織中NPC1L1的表達,減少小腸對膽固醇的吸收：同時促進肝臟ABCG5/ABCG8的表達,增強膽固醇的外排作用,從而降低膽固醇水平。SAK-HV口服給藥還能減少肝臟脂質沉積,降低機體氧化應激水平。
【關鍵詞】：SAK-HV 小鼠主動脈內皮細胞 炎癥 凝血酶 膽固醇吸收
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R54;R743
【目錄】：

• 個人簡歷3-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-15
• 第一部分 細胞水平研究SAK-HV對小鼠主動脈內皮細胞作用機制15-42
• 1 材料與方法15-30
• 2 實驗結果30-39
• 3 討論39-42
• 第二部分 SAK-HV口服給藥對高脂大鼠的療效評價及機制研究42-54
• 1 材料與方法42-45
• 2 實驗結果45-51
• 3 討論51-54
• 結論54-55
• 參考文獻55-61
• 附錄161-63
• 附錄263-67
• 附錄367-68
• 綜述 凝血酶及其受體在血管炎癥中的作用68-81
• 參考文獻75-81
• 致謝81-83
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文83-84
• 附件84-90

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳瑛;藺莉;金華;;絕經早期和絕經晚期小鼠主動脈病理改變及雌激素受體表達的對比研究[J];中國全科醫(yī)學;2010年30期

2 嚴宗毅;;主動脈零應力狀態(tài)與種屬的關系:豬與鼠[J];國外醫(yī)學.生物醫(yī)學工程分冊;1992年02期

3 張莉;吳賽珠;張帆;洪雷;賴文巖;;生理劑量的雄激素對去勢小鼠主動脈線粒體DNA缺失突變的影響[J];南方醫(yī)科大學學報;2011年01期

4 唐志剛;;大白鼠主動脈脂代謝中的衰老作用[J];國外醫(yī)學(老年醫(yī)學分冊);1986年03期

5 張莉;吳賽珠;阮云軍;張帆;洪雷;劉公理;王琦;;雄激素缺乏對雄性小鼠主動脈增齡性變化的影響[J];熱帶醫(yī)學雜志;2011年02期

6 歷志;魏旭峰;顧春虎;康曉軍;王春梅;韓驊;易定華;;正常小鼠主動脈瓣膜的組織形態(tài)學研究[J];心臟雜志;2010年05期

7 趙書民,朱琳,李利軍;小鼠主動脈發(fā)生的觀察[J];解剖學報;1997年01期

8 周信;張小榮;張秋燕;崔翰明;;生半夏及其炮制品對小鼠主動脈內皮細胞炎性因子分泌的影響[J];中國實驗方劑學雜志;2013年10期

9 T.Izumi;速凍、深蝕刻復制顯示鼠主動脈內皮細胞小泡的胞漿表面膜的紋狀結構[J];廣東解剖學通報;1989年02期

10 倪偉;劉濤;王浩宇;劉小艷;劉麗華;陳桂秀;白亦光;李健;;小鼠主動脈平滑肌細胞Robo4膜蛋白的提取[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2013年22期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 仲英潔;張子為;徐郁;花曉敏;胡云;;阿托伐他汀對ApoE~(-/-)小鼠主動脈粥樣硬化和血管鈣化的影響及機制研究[A];中華醫(yī)學會糖尿病學分會第十六次全國學術會議論文集[C];2012年

2 楊婭;王艷紅;李治安;謝謹捷;秦彥文;;正常小鼠主動脈的超聲生物顯微鏡顯像分析[A];中華醫(yī)學會第十次全國超聲醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2009年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 齊巖梅;神經生長因子對小鼠主動脈環(huán)血管新生及人臍靜脈內皮細胞凋亡的影響[D];大連醫(yī)科大學;2008年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 張炎;慢性炎癥刺激對小鼠主動脈內皮脂肪酶表達影響的研究[D];山東大學;2016年

2 黃志廣;重組SAK-HV對小鼠主動脈內皮細胞的作用及機制研究[D];廣西醫(yī)科大學;2016年

3 張莉;去勢對小鼠主動脈衰老的影響及生理劑量睪酮的干預研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

4 劉永玲;外源性微直流電場對小鼠主動脈環(huán)血管新生的影響[D];云南師范大學;2014年

5 牛榮榮;外源性磷酸肌酸對動脈粥樣硬化斑塊形成和穩(wěn)定性的作用的研究[D];山東大學;2015年

，

本文編號：581249