本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子SP1調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化在主動(dòng)脈夾層發(fā)生中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的:通過對(duì)人體主動(dòng)脈夾層病理組織、SD大鼠主動(dòng)脈夾層動(dòng)物模型組織及體外培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)研究,了解轉(zhuǎn)錄因子SP1與主動(dòng)脈夾層組織中血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)表型轉(zhuǎn)化的相關(guān)性,探索其在主動(dòng)脈夾層發(fā)生的中的作用。研究方法:本研究主要包括三部分內(nèi)容:第一部分:收集人主動(dòng)脈夾層病理組織(10例)及正常主動(dòng)脈組織(4例),通過Western-Blot、RT-PCR檢測(cè)上述組織中的轉(zhuǎn)錄因子SP1及收縮型血管平滑肌細(xì)胞的表型標(biāo)志物SM22α的表達(dá)水平,并進(jìn)行相關(guān)性分析。第二部分:建立SD大鼠主動(dòng)脈夾層動(dòng)物模型,該部分實(shí)驗(yàn)采用20只3周齡雄性SD大鼠,隨機(jī)分為兩組,第一組為正常對(duì)照組(10只),飲用水為一般礦物質(zhì)水;第二組為實(shí)驗(yàn)組(10只),飲用水為0.25%β-氨基丙腈(BAPN)水溶液。每2-3天測(cè)量一次大鼠的體重并記錄大鼠的一般狀況。中途死亡的大鼠,及時(shí)進(jìn)行解剖留取主動(dòng)脈全程;至實(shí)驗(yàn)第4周末仍存活的大鼠,予斷頸處死后解剖留取主動(dòng)脈全程。對(duì)主動(dòng)脈標(biāo)本行HE、VB染色及透射電鏡觀察,從病理及形態(tài)學(xué)鑒定主動(dòng)脈夾層發(fā)生情況。Western-Blot及RT-PCR,檢測(cè)SP1及SM22α表達(dá)情況,并進(jìn)行相關(guān)性分析;免疫組織化學(xué)染色,定位SP1在主動(dòng)脈夾層組織中的主要表達(dá)位置。第三部分:體外培養(yǎng)正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,構(gòu)建SP1過表達(dá)腺病毒,轉(zhuǎn)染VSMC過表達(dá)其中的SP1,Western-Blot及RT-PCR檢測(cè)SM22α的表達(dá)情況,從而在細(xì)胞水平驗(yàn)證SP1與VSMC表型轉(zhuǎn)化的相關(guān)性。研究結(jié)果:第一部分實(shí)驗(yàn)中,夾層組織中的SP1表達(dá)量較對(duì)照組有所增加,而SM22α較對(duì)照組顯著降低,相關(guān)性分析提示SP1與SM22α呈負(fù)相關(guān)。第二部分實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)標(biāo)本的HE、VB染色以及透射電鏡觀察確認(rèn),SD大鼠主動(dòng)脈夾層模型構(gòu)建成功,主動(dòng)脈夾層發(fā)生率100%,主動(dòng)脈夾層破裂比例100%;正常對(duì)照組的大鼠生長(zhǎng)良好,無主動(dòng)脈夾層發(fā)生,無死亡。值得注意的是,實(shí)驗(yàn)組大鼠發(fā)生的主動(dòng)脈夾層均在胸主動(dòng)脈段,提示該建模方式簡(jiǎn)單高效,滿足實(shí)驗(yàn)所需。標(biāo)本的Western-Blot及RT-PCR結(jié)果與人體標(biāo)本結(jié)果相一致,統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)顯示SP1與SM22α呈負(fù)相關(guān)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:SP1主要分布于主動(dòng)脈壁的血管平滑肌細(xì)胞,且主要定位在細(xì)胞核位置,SP1在實(shí)驗(yàn)組中的表達(dá)較正常對(duì)照組增加,臨近主動(dòng)脈夾層破口處SP1染色尤為明顯。第三部分實(shí)驗(yàn)中:所構(gòu)建的SP1過表達(dá)腺病毒能夠高效轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的VSMC并成功過表達(dá)其內(nèi)的SP1。且在過表達(dá)SP1之后,VSMC中收縮型表型標(biāo)志物SM22α有所減少,提示VSMC收縮型減少,發(fā)生了表型轉(zhuǎn)化。結(jié)論:人體主動(dòng)脈夾層組織、動(dòng)物主動(dòng)脈夾層模型組織中的研究,證實(shí)在夾層組織中SP1表達(dá)上調(diào),VSMC發(fā)生了表型轉(zhuǎn)化,兩者具有相關(guān)性;體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過表達(dá)SP1能夠引發(fā)VSMC表型轉(zhuǎn)化。提示轉(zhuǎn)錄因子SP1可能通過促進(jìn)VSMC表型轉(zhuǎn)化,參與到主動(dòng)脈夾層的發(fā)生過程。
【關(guān)鍵詞】：主動(dòng)脈夾層 動(dòng)物模型 SP1 血管平滑肌細(xì)胞 表型轉(zhuǎn)化
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R543.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-13
• 參考文獻(xiàn)11-13
• 第一部分 人主動(dòng)脈壁組織中SP1與VSMC表型轉(zhuǎn)化相關(guān)性分析13-25
• 一、材料和方法13-20
• 二、結(jié)果20-22
• 三、討論22-23
• 參考文獻(xiàn)23-25
• 第二部分 SD大鼠主動(dòng)脈夾層模型組織中SP1與VSMC表型轉(zhuǎn)化的關(guān)系25-50
• 一、材料和方法25-38
• 二、結(jié)果38-46
• 三、討論46-48
• 參考文獻(xiàn)48-50
• 第三部分 過表達(dá)SP1后VSMC表型轉(zhuǎn)化情況50-68
• 一、材料和方法50-62
• 二、結(jié)果62-65
• 三、討論65-66
• 參考文獻(xiàn)66-68
• 綜述 自噬在血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化中作用的研究進(jìn)展68-78
• 參考文獻(xiàn)73-78
• 致謝78

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子SP1調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化在主動(dòng)脈夾層發(fā)生中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：447793