目的觀察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導(dǎo)的小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞株Raw264.7炎癥因子的表達(dá)變化及PPARγSer273磷酸化的調(diào)控作用,探討PPARγSer273磷酸化在動脈粥樣硬化(AS)中的作用。方法取Raw264.7細(xì)胞并分為ox-LDL組和對照組,ox-LDL組以50 mg/L ox-LDL誘導(dǎo),對照組不予處理,采用ELISA法檢測兩組細(xì)胞培養(yǎng)液中的TNF-α、IL-1β,Western blot法檢測細(xì)胞中過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)和PPARγSer273磷酸化蛋白,計算PPARγSer273磷酸化與PPARγ蛋白相對表達(dá)量的比值。取缺陷型Raw264.7細(xì)胞并分為4組,S273A+ox-LDL組細(xì)胞經(jīng)PPARγSer273突變型質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,并以50 mg/L ox-LDL誘導(dǎo);S273A組細(xì)胞經(jīng)PPARγSer273突變型質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,但不予50 mg/L ox-LDL誘導(dǎo);WT+ox-LDL組經(jīng)PPARγ野生型質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,并以50 mg/L ox-LDL誘導(dǎo);WT組經(jīng)PPARγ野生型質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,但不予50 mg/L ox-LDL誘導(dǎo);采用ELISA法檢...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞、主要試劑及儀器
    1.2 ox-LDL誘導(dǎo)后Raw264.7細(xì)胞炎癥因子和PPARγSer273磷酸化檢測
    1.3 PPARγSer273位點(diǎn)突變后Raw264.7細(xì)胞炎癥因子分泌量、mRNA檢測
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 ox-LDL誘導(dǎo)后Raw264.7細(xì)胞TNF-α、IL-1β分泌量、PPARγSer273磷酸化水平比較
    2.2 PPARγSer273位點(diǎn)突變后Raw264.7細(xì)胞TNF-α、IL-1β分泌量、mRNA表達(dá)水平比較
3 討論



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