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下丘腦條件培養(yǎng)基對(duì)巨噬細(xì)胞內(nèi)吞ox-LDL的影響

發(fā)布時(shí)間:2024-05-11 22:44
  背景與目的 泡沫細(xì)胞的形成是動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)發(fā)病的早期病變,巨噬細(xì)胞吞噬氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein, ox-LDL)在此過(guò)程中起關(guān)鍵作用。如何控制泡沫的形成是AS的重要環(huán)節(jié)。已有研究表明下丘腦對(duì)AS的形成有重要調(diào)控作用,但其機(jī)制尚未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)制作下丘腦條件培養(yǎng)基(Conditioned media of hypothalamus)作用于體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞,探討其對(duì)巨噬細(xì)胞內(nèi)吞ox-LDL的影響及其機(jī)制。 材料與方法 1、下丘腦細(xì)胞條件培養(yǎng)基的制備 在無(wú)菌條件下快速取下丘腦組織,制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后以1×105/ml濃度,分別移入6孔培養(yǎng)板中。置37℃,5%C02培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),待細(xì)胞成活、貼壁、生長(zhǎng)旺盛時(shí),棄上清液;用無(wú)血清的DMEM lml/孔沖洗,棄去沖洗液,加入無(wú)血清DMEM2ml/孔,置37℃,5%C02培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)24小時(shí),收集其細(xì)胞培養(yǎng)基,離心去除細(xì)胞碎片,制備成下丘腦細(xì)胞條件培養(yǎng)基,置-70℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?2、巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)分組 取昆明小鼠腹腔注射植物...

【文章頁(yè)數(shù)】:44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1. 動(dòng)物和主要試劑
    2. 主要儀器及耗材
    3、主要試劑的配制
    4. 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1 下丘腦細(xì)胞條件培養(yǎng)基的制備
        4.2 巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)分組
        4.3 免疫熒光化學(xué)
        4.4 蛋白免疫印跡(Western-blot)分析
        4.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1. 下丘腦條件培養(yǎng)液對(duì)巨噬細(xì)胞內(nèi)吞ox-LDL的影響
    2. 下丘腦條件培養(yǎng)液對(duì)CD36、SR-A受體表達(dá)的影響
    3. 蛋白免疫印跡檢測(cè)CD36、SR-A表達(dá)的變化
    4. 下丘腦條件培養(yǎng)液抑制巨噬細(xì)胞內(nèi)吞ox-LDL的信號(hào)通路
討論
    1、SR-A、CD36受體與動(dòng)脈粥樣硬化的形成
    2、神經(jīng)因素與AS關(guān)系
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述 OX-LDL受體與動(dòng)脈粥樣硬化
攻讀學(xué)位期間本人出版或公開(kāi)發(fā)表的論著、論文
參考文獻(xiàn)
英文縮略詞索引
致謝
附圖



本文編號(hào):3970477

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