目的:本研究旨在探討年齡因素對(duì)缺血后適應(yīng)心肌保護(hù)作用的影響,研究老齡缺血后適應(yīng)心肌保護(hù)作用消失的分子機(jī)制;通過(guò)研究巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動(dòng)子與雞β-肌動(dòng)蛋白(CBA)啟動(dòng)子重組AAV9載體的組織表達(dá)特異性,篩選獲得較好的可用于心臟疾病基因治療的AAV9載體;并使用攜帶Ca MEK(Constitutively active MEK1,Ca MEK)基因的重組AAV9載體,靶向轉(zhuǎn)導(dǎo)老齡小鼠心臟,探討外源導(dǎo)入Ca MEK能否作為基因治療藥物,具有靶向激活ERK1/2通路,減少心肌梗死、抑制心肌細(xì)胞凋亡、防治老齡心肌缺血再灌注損傷的作用及機(jī)制。本研究包括:①應(yīng)用小鼠Langendorff離體心臟灌流系統(tǒng),對(duì)比研究缺血后適應(yīng)對(duì)年輕與老齡小鼠心肌保護(hù)作用的差異,闡明缺血后適應(yīng)心肌保護(hù)作用年齡異質(zhì)性的分子機(jī)制。②通過(guò)體內(nèi)外轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn),對(duì)比研究桿狀病毒載體系統(tǒng)包裝制備的CMV與CBA啟動(dòng)子的重組AAV9載體介導(dǎo)GFP基因在小鼠體內(nèi)的組織表達(dá)特異性、表達(dá)時(shí)間點(diǎn)、安全性,篩選更適宜用于心臟疾病基因治療的重組AAV9載體。③靶向轉(zhuǎn)導(dǎo)Ca MEK基因至老齡小鼠心肌,通過(guò)離體及在體心肌缺血再灌注模型,探討Ca ...

【文章頁(yè)數(shù)】：131 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 缺血后適應(yīng)對(duì)年輕及老齡小鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其分子機(jī)制
    1 研究?jī)?nèi)容與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組
        1.2 主要儀器設(shè)備和試劑
        1.3 主要方法
        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
第二部分CMV及CBA啟動(dòng)子重組AAV9載體對(duì)小鼠心肌組織特異性表達(dá)研究
    1 研究?jī)?nèi)容與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組
        1.2 主要器材和試劑配制方法
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
第三部分Ca MEK基因靶向轉(zhuǎn)導(dǎo)減輕老齡心肌離體及在體心肌缺血再灌注損傷
    1 研究?jī)?nèi)容與方法
        1.1 研究對(duì)象
        1.2 主要試劑及儀器
        1.3 病毒轉(zhuǎn)染
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述 缺血后適應(yīng)機(jī)制及并發(fā)癥研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
個(gè)人簡(jiǎn)歷
導(dǎo)師評(píng)閱表



本文編號(hào)：3934798