目的： 探討正常大鼠和心肌肥厚模型大鼠心肌組織中miR-208的表達(dá)規(guī)律,明確miR-208在肥厚心肌過(guò)程中發(fā)揮的作用,并對(duì)其可能的調(diào)控機(jī)制進(jìn)行初步探究,為研究miRNA在心肌肥厚的病理生理過(guò)程中的功能作用提供新的論據(jù),為心血管疾病防治提供新思路新方向。 方法： (1)20只雄性SD大鼠,體重200g左右,簡(jiǎn)單隨機(jī)法分成對(duì)照組10只和實(shí)驗(yàn)組10只。實(shí)驗(yàn)組大鼠采用腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)進(jìn)行心肌肥厚造模,分離腹主動(dòng)脈和腎動(dòng)脈后,在腎動(dòng)脈上方約lcm處,將直徑為0.7mm的注射針頭與腹主動(dòng)脈一起結(jié)扎,然后迅速抽出針頭。對(duì)照組大鼠僅行開腹手術(shù),不縮窄腹主動(dòng)脈。7周后分別對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠進(jìn)超聲心動(dòng)圖檢查,確定實(shí)驗(yàn)組造模成功后,處死大鼠,取出心臟,留取左心室,計(jì)算心重指數(shù)(HW/BW)、左心室重量指數(shù)(LVW/BW)。 (2)將正常和肥厚的左心室組織用Trizol法提取心肌組織RNA,然后通過(guò)熒光定量PCR檢測(cè)miR-208在正常和肥厚的心肌組織中的各自表達(dá)量并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 (3)用生物信息學(xué)的方法預(yù)測(cè)miR-208的靶基因。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)正常和肥厚心肌組織中miR-208的靶基因m...

【文章頁(yè)數(shù)】：35 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
引言
第一章 文獻(xiàn)研究
    1.1 心肌肥厚研究進(jìn)展
    1.2 MIRNAs與心肌肥厚
        1.2.1 miRNAs的生成與作用機(jī)制
        1.2.2 和心肌肥厚相關(guān)的miRNA研究現(xiàn)狀
        1.2.3 miRNA應(yīng)用于心肌肥厚臨床診療的前景
第二章 實(shí)驗(yàn)研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 材料
    2.3 動(dòng)物模型建立方法
    2.4 超聲心動(dòng)圖檢查
    2.5 心肌組織的取材、保存
    2.6 心肌組織TOTAL RNA的提取
    2.7 RNA凝膠電泳
    2.8 RT-PCR檢測(cè)
        2.8.1 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(20ul)
        2.8.2 引物設(shè)計(jì)合成
        2.8.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(20ul)
    2.9 統(tǒng)計(jì)分析
第三章 結(jié)果
    3.1 大鼠心肌肥厚模型
        3.1.1 超聲心動(dòng)圖結(jié)果
        3.1.2 大鼠解剖結(jié)果
    3.2 總RNA的提取
    3.3 熒光定量PCR測(cè)定MIR-208的表達(dá)結(jié)果
        3.3.1 miR-208及內(nèi)參U6的溶解曲線圖
        3.3.2 兩組心肌組織中miR-208的相對(duì)表達(dá)量
    3.4 MIR-208調(diào)節(jié)的靶基因預(yù)測(cè)
        3.4.1 p21及內(nèi)參beta-actin的溶解曲線圖
        3.4.2 兩組心肌組織中p21的熒光定量PCR結(jié)果
第四章 分析討論
    4.1 大鼠心肌肥厚模型的建立
    4.2 MIR-208變化與心肌肥厚
    4.3 MIR-208的可能靶基因和其功能
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3930894