[背景與目的]:動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis,As)是一種慢性炎癥病變,血管壁免疫/炎癥激活被認(rèn)為是As發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素之一。作為免疫/炎癥系統(tǒng)的主要效應(yīng)細(xì)胞,巨噬細(xì)胞聚集在血管壁,吞噬脂質(zhì)并產(chǎn)生多種炎癥因子,從而參與As發(fā)生發(fā)展的整個(gè)過(guò)程。因此,深入研究As形成過(guò)程中巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)的調(diào)控機(jī)制對(duì)于As性心腦血管疾病的防治具有重要意義。巨噬細(xì)胞具有異質(zhì)性和可塑性,在不同誘導(dǎo)因素刺激下,可形成不同功能的亞群(即巨噬細(xì)胞極化),主要分為兩大類:經(jīng)典活化型巨噬細(xì)胞(M1型)和替代活化型巨噬細(xì)胞(M2型)。M1型巨噬細(xì)胞主要由脂多糖(LPS)和干擾素-γ(IFN-γ)誘導(dǎo),分泌腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)等炎癥因子,發(fā)揮促炎效應(yīng);M2型巨噬細(xì)胞主要由IL-4誘導(dǎo),高表達(dá)精氨酸酶1(arginase,Arg1)、IL-10等,發(fā)揮抗炎和組織修復(fù)效應(yīng)。在不同發(fā)展階段的As斑塊中存在著不同類型的巨噬細(xì)胞,M1型巨噬細(xì)胞主要存在于斑塊的進(jìn)展期和不穩(wěn)定性斑塊,促進(jìn)斑塊的形成與破裂;M2型主要存在于穩(wěn)定性斑塊,可以緩解斑塊形成的炎癥環(huán)境。載脂蛋白A-I結(jié)合蛋...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖4.1巨噬細(xì)胞內(nèi)AIBP定位情況

.1AIBP在線粒體中的定位首先，我們分離小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞并培養(yǎng)THP-1巨噬細(xì)胞，通過(guò)蛋白免疫印跡顯示AIBP在細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)中均表達(dá)，但主要表達(dá)在線粒體中（如4.1A）。隨后進(jìn)行蛋白酶K保護(hù)實(shí)驗(yàn)和堿裂解實(shí)驗(yàn)，以驗(yàn)證AIBP蛋白在線體中的位置。當(dāng)用蛋白....

圖4.2全長(zhǎng)AIBP病毒載體和AIBP線粒體定位序列突變（AIBP-ΔMLS）病毒載體轉(zhuǎn)染AIBP-/-巨噬細(xì)胞,蛋白質(zhì)印記驗(yàn)證AIBP的表達(dá)

質(zhì)免疫印跡結(jié)果顯示病毒轉(zhuǎn)染的巨噬細(xì)胞內(nèi)AIBP的表達(dá)明顯高于病毒空載體轉(zhuǎn)染組，而AIBP全長(zhǎng)序列轉(zhuǎn)染組線粒體內(nèi)AIBP水平相對(duì)AIBP-ΔMLS轉(zhuǎn)染組顯著增加（如圖4.2）。圖4.2全長(zhǎng)AIBP病毒載體和AIBP線粒體定位序列突變（AIBP-ΔMLS）病毒載體轉(zhuǎn)染AI....

圖4.3線粒體AIBP對(duì)巨噬細(xì)胞促炎因子與抗炎因子表達(dá)的影響

我們通過(guò)qPCR檢測(cè)AIBP或突變AIBP過(guò)表達(dá)后，IL-1β，IL-6，TNF-α，IL-18,IL-12，IL-4及IL-10等細(xì)胞因子的表達(dá)。結(jié)果顯示線粒體AIBP缺失后，巨噬細(xì)胞促炎表達(dá)增加，抗炎因子表達(dá)減少（如圖4.3）。說(shuō)明線粒體AIBP可能影響巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)。圖....

圖4.4線粒體AIBP缺失對(duì)巨噬細(xì)胞M1/M2極化的影響

果顯示線粒體AIBP缺失后，M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）與環(huán)氧化酶（COX2）表達(dá)增加，M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物甘露糖受體（Mrc1）及精氨酸酶（Arg1）表達(dá)減少（如圖4.4）。說(shuō)明線粒體AIBP可能通過(guò)調(diào)控巨噬細(xì)胞極化影響炎癥反應(yīng)。圖4.4線粒體AIB....

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