發(fā)布時間：2024-01-25 15:31

　　目的:探討p22phox是否可以通過調(diào)節(jié)KLF4的表達(dá)促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換。方法:1、Ang-Ⅱ培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞,采用western blot檢測相關(guān)蛋白(SM22α、α-SMA、PCNA及KLF4)的表達(dá)。2、研究p22phox基因沉默對Ang-Ⅱ誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化、H₂O₂生成、AKT及ERK1/2磷酸化的影響。予以Ang-Ⅱ培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞24h,結(jié)合小RNA干擾技術(shù)沉默p22phox基因,通過RT-PCR檢測p22phox mRNA水平及Western blot檢測相關(guān)蛋白的表達(dá),BrdU實驗檢測血管平滑肌細(xì)胞增殖和劃痕實驗檢測血管平滑肌細(xì)胞遷移。3、研究H₂O₂通過ERK1/2和PI3K/AKT途徑對KLF4表達(dá)的影響。分別預(yù)先加入U0126(ERK的特異性抑制劑)和LY294002((PI3K的特異性抑制劑)培養(yǎng)VSMC30分鐘后,再加入含終濃度為100μm/L H₂O₂的培養(yǎng)基,培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞24小時,采用Western...

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

圖1：p22phox表達(dá)對Ang-Ⅱ誘導(dǎo)的VSMC注：A-D：Ang-II以時間和濃度依賴方式

圖2：p22phox在Ang-II誘導(dǎo)的VSMC表型轉(zhuǎn)換中的作用

圖3：p22phox在Ang-II誘導(dǎo)的VSMCs增殖和遷移中的作用

圖4.p22phox介導(dǎo)的H2O2通過ERK1/2和PI3K/AKT途徑上調(diào)KLF4的表達(dá)并促進(jìn)VSMC表型轉(zhuǎn)化

本文編號：3885076