背景： 心肌細(xì)胞凋亡是心血管疾病心室重塑的基本病理基礎(chǔ),炎癥在其中可能起重要作用,但機制仍未闡明。IL-17A是一種新的炎性細(xì)胞因子,目前有關(guān)其在心血管疾病中的作用尚存在分歧。Stat3是IL-17A下游的轉(zhuǎn)錄因子,并在調(diào)控細(xì)胞凋亡方面起重要作用；iNOS作為IL-17A調(diào)控表達(dá)的下游蛋白,對細(xì)胞凋亡的作用存在爭議。我們推測,IL-17A可能通過Stat3/iNOS參與心肌細(xì)胞凋亡。 方法： 應(yīng)用體外培養(yǎng)的新生小鼠心肌細(xì)胞,觀察IL-17A刺激后心肌細(xì)胞凋亡指標(biāo)變化：應(yīng)用TUNEL染色檢測心肌細(xì)胞凋亡情況,Western blot檢測cleaved caspase3等凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)；應(yīng)用免疫熒光染色、RT-PCR、Western blot測定Stat3、iNOS等相關(guān)因子的表達(dá)。同時,應(yīng)用Stat3shRNA腺病毒干擾技術(shù),降低心肌細(xì)胞Stat3表達(dá),進一步闡明Stat3在IL-17A介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡中的作用。 結(jié)果： 培養(yǎng)的新生小鼠心肌細(xì)胞表達(dá)IL-17F及其受體--IL-17RA、RC,但不表達(dá)IL-17A; IL-17A對iNOS表達(dá)具有顯著時效及量效關(guān)系,100ng/ml...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
Abstract
目錄
1 引言
2 材料和方法
    2.1 材料
    2.2 試劑配置
    2.3 實驗方法
3. 實驗結(jié)果
    3.1 新生小鼠原代心肌細(xì)胞的鑒定
    3.2 新生小鼠原代心肌細(xì)胞IL-17及其受體的表達(dá)
    3.3 IL-17A刺激對小鼠心肌細(xì)胞iNOS表達(dá)的時效和量效關(guān)系
    3.4 IL-17A刺激對小鼠心肌細(xì)胞Stat3磷酸化水平的影響
    3.5 IL-17A刺激對小鼠心肌細(xì)胞凋亡水平的影響
    3.6 Stat3 shRNA腺病毒感染效率檢測
    3.7 Stat3抑制后IL-17A對心肌細(xì)胞iNOS及IL-17F的影響
    3.8 Stat3抑制后IL-17A對小鼠心肌細(xì)胞凋亡水平的影響
4. 討論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
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