發(fā)布時(shí)間：2023-06-08 22:49

　　目的:骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndromes,MDS)是血液系統(tǒng)惡性克隆性疾病,抗腫瘤免疫異常被認(rèn)為在MDS發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用,但其具體機(jī)制尚未明確。本研究通過檢測并對(duì)比MDS患者與正常對(duì)照骨髓中髓源性抑制細(xì)胞(MDSC)的數(shù)量和功能,分析與臨床指標(biāo)的相關(guān)性及對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞(CD8⁺T細(xì)胞)功能的影響,并分選MDSC與CD8⁺T細(xì)胞共培養(yǎng),檢測共培養(yǎng)體系中阻斷MDSC的重要功能通路(STAT3通路)前后CD8⁺T細(xì)胞的功能的變化,進(jìn)一步闡明MDSC介導(dǎo)的免疫抑制在MDS中的作用及其機(jī)制。材料和方法:納入的研究對(duì)象為天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院血液科2015年10月至2017年12月收治的36例MDS患者及19例健康志愿者,并收集MDS患者的臨床數(shù)據(jù)。第一部分:應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測MDS患者和健康對(duì)照者骨髓(BM)中以LIN^-HLA-DR^-CD33⁺為標(biāo)記的MDSC細(xì)胞比例,并與MDS患者臨床指標(biāo)做相關(guān)性分析。第二部分:流式細(xì)胞術(shù)檢測...

【文章頁數(shù)】：132 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號(hào)說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、MDS患者骨髓MDSC數(shù)量分析
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.4 主要溶液的配制
        1.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        1.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 MDS患者M(jìn)DSC比例及其與疾病危險(xiǎn)度的關(guān)系
        1.2.2 MDSC比例與臨床血液學(xué)指標(biāo)之間的相關(guān)性分析
            1.2.2.1 MDSC比例與骨髓原始細(xì)胞比例之間的相關(guān)分析
            1.2.2.2 MDSC比例與染色體核型之間的相關(guān)性分析
            1.2.2.3 MDSC比例與血細(xì)胞減少程度之間的相關(guān)性分析
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、MDS患者骨髓MDSC功能分子的檢測
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 主要溶液的配制
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 MDS患者骨髓MDSC胞內(nèi)STAT3活化
        2.2.2 MDS患者M(jìn)DSC表面CCR2和PD-L1的表達(dá)
        2.2.3 MDS患者骨髓上清CCL2的濃度
        2.2.4 MDS患者血漿和骨髓上清IL-6的濃度
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、MDS患者骨髓CD8+T細(xì)胞功能分子的檢測
    3.1 對(duì)象和方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.4 主要溶液的配制
        3.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 MDS患者CD8+T細(xì)胞PD-1的表達(dá)
        3.2.2 MDS患者CD8+T細(xì)胞CD3ζ的表達(dá)
        3.2.3 MDS患者CD8+T細(xì)胞Perforin和GranzymeB的表達(dá)
        3.2.4 MDS患者骨髓上清IFN-γ的濃度
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
四、體外MDS患者M(jìn)DSC對(duì)CD8⁺T細(xì)胞的作用及STAT3通路探討
    4.1 對(duì)象和方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.4 主要溶液的配制
        4.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 MDSC及CD8+T細(xì)胞分選純度
        4.2.2 STAT3阻斷劑阻斷前后MDSC表達(dá)STAT3和ARG1的比較
        4.2.3 STAT3阻斷劑阻斷前后MDSC內(nèi)ARG1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量的比
        4.2.4 MDS患者M(jìn)DSC與CD8⁺T細(xì)胞體外培養(yǎng)及加入阻斷STAT3前后CD8+T細(xì)胞CD3ζ,Perforin和GranzymeB的表達(dá)
        4.2.5 體外MDSC對(duì)CD8+T細(xì)胞分泌 IFN-γ的影響及阻斷STAT3通路前后比較
        4.2.6 MDS患者M(jìn)DSC與CD8+T細(xì)胞體外培養(yǎng)及阻斷STAT3通路前后CD8+T細(xì)胞凋亡率的檢測
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



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