可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑經(jīng)微小RNA-1調(diào)節(jié)PI3K通路機(jī)制的研究
發(fā)布時(shí)間:2023-05-26 20:29
目的: 1.研究可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑(soluble epoxide hydrolase inhibitor sEHi) t-AUCB(trans-4-(4-(3-adamantan-1-yl-ureido)-cyclohexyloxy)-bensoic acid)干預(yù)對(duì)原代乳小鼠心肌細(xì)胞心肌缺血模型中內(nèi)向整流型鉀電流(IK1)幅度的影響。 2.探討t-AUCB調(diào)控微小RNA-1(microRNA-1miR-1)機(jī)制,明確miR-1參與P13K通路的調(diào)控。 方法: 體外部分: 選取出生1天的昆明小鼠乳鼠,培養(yǎng)原代心肌細(xì)胞,分5組進(jìn)行不同的干預(yù):(1)空白對(duì)照組(Ctl);(2) micrONTM mmu-miR-1a-3p agomir (agomiR-1)轉(zhuǎn)染組(agomiR-1);(3) agomiR-1轉(zhuǎn)染+t-AUCB干預(yù)組(agomiR-1+t-AUCB);(4) micrONTM mmu-miR-1a-3p agomir negative control組(Neg Ctl);(5) agomiR-1轉(zhuǎn)染+DMSO干預(yù)組(agomiR-1+DMSO)。最后以全細(xì)胞模式記...
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
主要中英文縮略語(yǔ)詞表
前言
第一部分 體外部分
第一章 材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2 儀器設(shè)備與試劑
3 可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑(tAUCB)保存液的配制
4 原代乳小鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)
5 實(shí)驗(yàn)分組
6 膜片鉗全細(xì)胞記錄具體步驟
7 統(tǒng)計(jì)與分析
第二章 結(jié)果
1 原代乳小鼠心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)
2 AgomiR-1轉(zhuǎn)染后模擬心肌缺血情況下,t-AUCB對(duì)原代乳小鼠心肌細(xì)胞IK1電流密度大小的影響
第三章 討論
第四章 結(jié)論
第二部分 體內(nèi)部分
第一章 材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2 儀器設(shè)備與試劑
3 可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑(t-AUCB)原液的配制
4 T-AUCB對(duì)心梗后小鼠缺血區(qū)心肌組織中p-AKT、p-GSK3β的影響
5 小鼠心肌梗死模型的建立
6 尾靜脈注射mmu-miR-1a-3p agomir轉(zhuǎn)染小鼠及實(shí)驗(yàn)分組
7 PI3K抑制劑wortmannin干預(yù)實(shí)驗(yàn)分組
8 標(biāo)本取材
9 免疫印跡法(Western Blot)檢測(cè)
10 實(shí)時(shí)熒光定量多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real time PCR)
11 統(tǒng)計(jì)與分析
第二章 結(jié)果
1 不同濃度(0.2 、1、5mg/L)t-AUCB對(duì)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-AKT表達(dá)的影響
2 不同濃度t-AUCB(0.2、1、5mg/L)對(duì)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-GSK3β表達(dá)的影響
3 AgomiR-1轉(zhuǎn)染后t-AUCB對(duì)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-AKT表達(dá)的影響
4 agomiR-1轉(zhuǎn)染后t-AUCB對(duì)小鼠心梗后缺血區(qū)心臟組織p-GSK3β表達(dá)的影響
5 PI3K抑制劑wortmannin對(duì)t-AUCB干預(yù)后小鼠心梗后缺血區(qū)心肌KCNJ2 mRNA表達(dá)的影響
6 PI3K抑制劑wortmannin對(duì)t-AUCB干預(yù)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌GJA1mRNA表達(dá)的影響
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3823236
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
主要中英文縮略語(yǔ)詞表
前言
第一部分 體外部分
第一章 材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2 儀器設(shè)備與試劑
3 可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑(tAUCB)保存液的配制
4 原代乳小鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)
5 實(shí)驗(yàn)分組
6 膜片鉗全細(xì)胞記錄具體步驟
7 統(tǒng)計(jì)與分析
第二章 結(jié)果
1 原代乳小鼠心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)
2 AgomiR-1轉(zhuǎn)染后模擬心肌缺血情況下,t-AUCB對(duì)原代乳小鼠心肌細(xì)胞IK1電流密度大小的影響
第三章 討論
第四章 結(jié)論
第二部分 體內(nèi)部分
第一章 材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2 儀器設(shè)備與試劑
3 可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑(t-AUCB)原液的配制
4 T-AUCB對(duì)心梗后小鼠缺血區(qū)心肌組織中p-AKT、p-GSK3β的影響
5 小鼠心肌梗死模型的建立
6 尾靜脈注射mmu-miR-1a-3p agomir轉(zhuǎn)染小鼠及實(shí)驗(yàn)分組
7 PI3K抑制劑wortmannin干預(yù)實(shí)驗(yàn)分組
8 標(biāo)本取材
9 免疫印跡法(Western Blot)檢測(cè)
10 實(shí)時(shí)熒光定量多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real time PCR)
11 統(tǒng)計(jì)與分析
第二章 結(jié)果
1 不同濃度(0.2 、1、5mg/L)t-AUCB對(duì)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-AKT表達(dá)的影響
2 不同濃度t-AUCB(0.2、1、5mg/L)對(duì)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-GSK3β表達(dá)的影響
3 AgomiR-1轉(zhuǎn)染后t-AUCB對(duì)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-AKT表達(dá)的影響
4 agomiR-1轉(zhuǎn)染后t-AUCB對(duì)小鼠心梗后缺血區(qū)心臟組織p-GSK3β表達(dá)的影響
5 PI3K抑制劑wortmannin對(duì)t-AUCB干預(yù)后小鼠心梗后缺血區(qū)心肌KCNJ2 mRNA表達(dá)的影響
6 PI3K抑制劑wortmannin對(duì)t-AUCB干預(yù)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌GJA1mRNA表達(dá)的影響
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3823236
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