目的： 1.研究可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑(soluble epoxide hydrolase inhibitor sEHi) t-AUCB(trans-4-(4-(3-adamantan-1-yl-ureido)-cyclohexyloxy)-bensoic acid)干預(yù)對原代乳小鼠心肌細胞心肌缺血模型中內(nèi)向整流型鉀電流(IK1)幅度的影響。 2.探討t-AUCB調(diào)控微小RNA-1(microRNA-1miR-1)機制,明確miR-1參與P13K通路的調(diào)控。 方法： 體外部分： 選取出生1天的昆明小鼠乳鼠,培養(yǎng)原代心肌細胞,分5組進行不同的干預(yù)：(1)空白對照組(Ctl);(2) micrONTM mmu-miR-1a-3p agomir (agomiR-1)轉(zhuǎn)染組(agomiR-1);(3) agomiR-1轉(zhuǎn)染+t-AUCB干預(yù)組(agomiR-1+t-AUCB);(4) micrONTM mmu-miR-1a-3p agomir negative control組(Neg Ctl);(5) agomiR-1轉(zhuǎn)染+DMSO干預(yù)組(agomiR-1+DMSO)。最后以全細胞模式記...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
主要中英文縮略語詞表
前言
第一部分 體外部分
    第一章 材料與方法
        1 實驗動物
        2 儀器設(shè)備與試劑
        3 可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑(tAUCB)保存液的配制
        4 原代乳小鼠心肌細胞培養(yǎng)
        5 實驗分組
        6 膜片鉗全細胞記錄具體步驟
        7 統(tǒng)計與分析
    第二章 結(jié)果
        1 原代乳小鼠心肌細胞形態(tài)學(xué)
        2 AgomiR-1轉(zhuǎn)染后模擬心肌缺血情況下,t-AUCB對原代乳小鼠心肌細胞IK₁電流密度大小的影響
    第三章 討論
    第四章 結(jié)論
第二部分 體內(nèi)部分
    第一章 材料與方法
        1 實驗動物
        2 儀器設(shè)備與試劑
        3 可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑(t-AUCB)原液的配制
        4 T-AUCB對心梗后小鼠缺血區(qū)心肌組織中p-AKT、p-GSK3β的影響
        5 小鼠心肌梗死模型的建立
        6 尾靜脈注射mmu-miR-1a-3p agomir轉(zhuǎn)染小鼠及實驗分組
        7 PI3K抑制劑wortmannin干預(yù)實驗分組
        8 標(biāo)本取材
        9 免疫印跡法(Western Blot)檢測
        10 實時熒光定量多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real time PCR)
        11 統(tǒng)計與分析
    第二章 結(jié)果
        1 不同濃度(0.2 、1、5mg/L)t-AUCB對小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-AKT表達的影響
        2 不同濃度t-AUCB(0.2、1、5mg/L)對小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-GSK3β表達的影響
        3 AgomiR-1轉(zhuǎn)染后t-AUCB對小鼠心梗后缺血區(qū)心肌組織p-AKT表達的影響
        4 agomiR-1轉(zhuǎn)染后t-AUCB對小鼠心梗后缺血區(qū)心臟組織p-GSK3β表達的影響
        5 PI3K抑制劑wortmannin對t-AUCB干預(yù)后小鼠心梗后缺血區(qū)心肌KCNJ2 mRNA表達的影響
        6 PI3K抑制劑wortmannin對t-AUCB干預(yù)小鼠心梗后缺血區(qū)心肌GJA1mRNA表達的影響
    第三章 討論
    第四章 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號：3823236