目的:本研究通過(guò)建立小鼠1型糖尿病心肌病實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?觀察糖尿病心肌病小鼠心臟中miR-146以及其下游靶基因TRAF6、IRAK1和HIPK3在糖尿病心肌病小鼠中的表達(dá)。旨在分析miR-146與糖尿病心肌病發(fā)展的關(guān)系,為深入研究糖尿病心肌病的發(fā)病機(jī)制及臨床診斷治療提供新方向。方法:1、模型建立及分組:60只8周齡C57BL/6J雄性小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(Ctrol,n=30),糖尿病心肌病實(shí)驗(yàn)組(DCM,n=30)。實(shí)驗(yàn)組小鼠連續(xù)五天腹腔注射50mg/kg的鏈尿佐菌素(STZ)誘導(dǎo)構(gòu)建糖尿病心肌病動(dòng)物模型,高脂高糖飲食喂養(yǎng);正常對(duì)照組則是腹腔注射等量枸櫞酸緩沖液,普通維持飲食喂養(yǎng)。此后每周定時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組空腹血糖和體重情況持續(xù)至12周末實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)。12周末實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)時(shí)麻醉小鼠取心臟,稱(chēng)量心臟重量。2、通過(guò)HE染色觀察心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,通過(guò)Masson染色檢測(cè)心臟纖維化發(fā)展程度。3、利用Real-time RT-PCR技術(shù)檢測(cè)心肌組織miR-146a、miR-146b、β-MHC、ANP、IRAK1、TRAF6及HIPK3的mRNA表達(dá)。4、蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)(Western blo...

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英漢縮略詞對(duì)照表
前言
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 DCM組與Ctrol組代謝指標(biāo)檢測(cè)
    2.2 DCM組與Ctrol組小鼠心臟病理染色檢測(cè)
    2.3 小鼠心臟中miR-146表達(dá)
    2.4 小鼠心臟中TRAF6及IRAK1表達(dá)
    2.5 miR-146與HIPK3靶點(diǎn)預(yù)測(cè)
    2.6 HIPK3的mRNA表達(dá)
    2.7 野生型及突變型重組雙熒光素酶報(bào)告載體的構(gòu)建
    2.8 野生型和突變型重組報(bào)告載體的活性分析
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
致謝



本文編號(hào)：3816104