目的:測序并建立急性心肌梗死患者外周血TCR CDR3的免疫組庫,分析急性心肌梗死患者TCR CDR3免疫組庫的特點,比較急性心肌梗死患者組與健康對照組免疫組庫的多樣性差異。方法:(1)根據(jù)納入的標(biāo)準(zhǔn)、排除的標(biāo)準(zhǔn)分為急性心肌梗死患者組與健康對照組,并收集性別、年齡、白細胞計數(shù)(WBC)、中性粒細胞比例(NEUT%)、淋巴細胞比例(LY%)、單核細胞比例(MONO%)、高敏肌鈣蛋白I(hs-Tn I)、病變血管支數(shù)等臨床數(shù)據(jù),進行初步統(tǒng)計分析。(2)利用人血淋巴細胞分離液、RNA提取試劑盒及第一鏈c DNA合成試劑盒獲得各組外周血總淋巴細胞的cDNA溶液。(3)應(yīng)用針對T淋巴細胞基因靶點特異性的內(nèi)、外兩套引物在2*Taq Plus Master Mix II作用下進行巢式PCR擴增得到各自對應(yīng)的擴增產(chǎn)物,后進行凝膠電泳成像,經(jīng)剪切得到目的片段。(4)利用高通量測序技術(shù)(HTS)測序分別得到V基因、J基因、VJ基因?qū)?即CDR3序列)及CDR3區(qū)氨基酸(AA)序列的分布,建立TCR CDR3免疫組庫。(5)對比急性心肌梗死患者組與健康對照組,探討急性心肌梗死患者TCR CDR3免疫組庫的多...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
實驗材料
    1 實驗用血來源
    2 主要實驗試劑
    3 主要實驗儀器
    4 基因測序建庫
實驗方法
    1 研究對象分組
    2 淋巴細胞提取
    3 總RNA提取
    4 逆轉(zhuǎn)錄cDNA的合成
    5 巢式PCR擴增
    6 電泳成像檢測
    7 高通量測序建庫
    8 數(shù)據(jù)分析
實驗結(jié)果
    1 臨床數(shù)據(jù)分析
    2 TCRCDR3免疫組庫分析
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號：3815944