目的探討miR-322對高原肺動脈高壓發(fā)生發(fā)展的影響及作用機(jī)制。方法 SPF級雄性SD大鼠40只,隨機(jī)數(shù)字表法分為4組(n=10),即常氧組、低氧組、空白病毒+低氧組(空載體組),miR-322抑制+低氧組(miR-322沉默組),剔除實(shí)驗(yàn)過程中死亡大鼠后常氧組10只,低氧組、空載體組、miR-322沉默組各9只。測定肺動脈氧分壓[p(O₂)]和平均肺動脈壓(mPAP);HE染色觀察肺組織變化;免疫熒光觀察組織α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達(dá)變化;實(shí)時熒光定量PCR檢測大鼠肺組織中miR-322和apelin mRNA基因表達(dá);Western blot法檢測大鼠肺組織中apelin蛋白的表達(dá)。結(jié)果低氧組和空載體組肺動脈p(O₂)、mPAP和肺組織各項(xiàng)指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與常氧組比較,低氧組mPAP、α-SMA、apelin mRNA和蛋白以及miR-322 mRNA相對表達(dá)量均升高,p(O₂)下降(P<0.05);肺組織破壞嚴(yán)重,大量炎癥細(xì)胞浸潤。與低氧組比較,miR-322沉默組mPAP和miR-322 ...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1實(shí)驗(yàn)動物與試劑
    1.2方法
        1.2.1HAPH動物模型建立
        1.2.2大鼠處理與取材
        1.2.3HE染色觀察肺組織形態(tài)
        1.2.4免疫熒光染色觀察α-SMA表達(dá)
        1.2.5實(shí)時熒光定量PCR(qPCR）法檢測肺組織miR-322以及apelin m RNA表達(dá)
        1.2.6Western blot法檢測肺組織apelin蛋白表達(dá)
    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠p(O2）與mPAP比較
    2.2 各組肺組織形態(tài)學(xué)變化
    2.3 大鼠肺組織α-SMA表達(dá)
    2.4 各組肺組織miR-322和apelin蛋白及mRNA的表達(dá)水平比較
3 討論



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