目的最新研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子EB(TFEB)在調(diào)節(jié)自噬減少細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì),抑制動脈粥樣硬化上起著重要作用。文中旨在探索阿托伐他汀(ATV)通過激活TFEB對泡沫細(xì)胞自噬及膽固醇含量的影響。方法體外培養(yǎng)人單核細(xì)胞株THP-1,使用佛波酯誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞,加入氧化低密度脂蛋白(oxLDL),誘導(dǎo)48 h建立泡沫細(xì)胞模型。實驗分為空白組、oxLDL組、oxLDL+氯喹組、oxLDL+ATV組、oxLDL+氯喹+ATV組。各組細(xì)胞均加入藥物處理48 h,采用CCK8法檢測ATV及氯喹對細(xì)胞的毒性;油紅0染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴的含量;采用氧化酶法檢測細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇(FC)、總膽固醇(TC)等含量;膽固醇外流熒光分析法分析測定細(xì)胞膽固醇外流率;Western blot檢測LC3II/I、P62、TFEB、LAMP 1蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果 oxLDL+氯喹組細(xì)胞內(nèi)脂滴較oxLDL組、oxLDL+氯喹+ATV組明顯增加(P<0.05),而oxLDL+ATV組較oxLDL組明顯降低(P<0.05)。oxLDL+ATV組、空白組細(xì)胞內(nèi)FC、TC、CE、CE/TC含量較oxLDL組明顯降低(P<0...

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【文章目錄】：
0 引 言
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞、藥物與試劑
        1.1.2 儀器
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.2.2 巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞模型建立
        1.2.3 CCK8法細(xì)胞毒性檢測
        1.2.4 油紅O染色判斷細(xì)胞內(nèi)脂滴含量
        1.2.5 氧化酶法檢查細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇(FC)、總膽固醇(TC)含量
        1.2.6 膽固醇外流率測定
        1.2.7 Western blot法檢測LC3II/I、P62、LAMP 1、TFEB的蛋白含量
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 巨噬源性泡沫細(xì)胞模型鑒定
    2.2 確定ATV及氯喹對細(xì)胞的合適處理劑量
    2.3 細(xì)胞油紅O染色結(jié)果
    2.4 各組細(xì)胞內(nèi)FC、TC、CE/TC含量及細(xì)胞膽固醇外流率比較
    2.5 泡沫細(xì)胞LC3II/I、P62、LAMP 1、TFEB蛋白的表達(dá)
3 討 論



本文編號：3763029