目的:APJ是與血管緊張素受體有同源性的G蛋白偶聯(lián)受體,Apelin是其內(nèi)源性配體。研究發(fā)現(xiàn)Apelin/APJ系統(tǒng)參與心力衰竭、高血壓等心血管疾病。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)Apelin-13通過鐵自噬-SFXN1依賴性線粒體鐵超載途徑促心肌細(xì)胞肥大。線粒體自噬(Mitophagy)作為特異性清除損傷線粒體的選擇性自噬過程,同時(shí)參與誘導(dǎo)線粒體鐵代謝紊亂和ROS的產(chǎn)生。本課題擬研究Apelin-13對(duì)線粒體自噬以及的BNIP3依賴性線粒體自噬途徑對(duì)Apelin-13誘導(dǎo)的鐵源性ROS影響,并在前期研究基礎(chǔ)上探討SUMO1修飾Drp1促BNIP3依賴性線粒體鐵源性ROS途徑是否參與Apelin-13誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大,揭示Apelin-13/APJ系統(tǒng)誘導(dǎo)心肌肥厚的新分子機(jī)理,為進(jìn)一步闡明APJ受體能否成為抗心肌肥厚疾病的新靶標(biāo)提供理論依據(jù)。方法:1、Western Blot:檢測(cè)大鼠H9c2心肌細(xì)胞Beclin 1,LC3II/I,BNIP3,Drp1,SUMO1,BNP的表達(dá);2、RNA干擾:設(shè)計(jì)RNA干擾鏈分別干擾H9c2心肌細(xì)胞中SUMO1,Drp1,BNIP3的表達(dá);3、Mito-SO...

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 緒論
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    2.2 實(shí)驗(yàn)組織
    2.3 主要試劑
    2.4 主要儀器
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 H9c2 細(xì)胞培養(yǎng)
    3.2 Western blot(蛋白免疫印跡)
    3.3 線粒體ROS檢測(cè)(MitoSOX?)
    3.4 線粒體螯合鐵檢測(cè)(RPA熒光探針)
    3.5 SiRNA干擾
    3.6 免疫組化
    3.7 透射電鏡
    3.8 免疫熒光
    3.9 H9c2 大鼠心肌細(xì)胞肥大的檢測(cè)
    3.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 Apelin-13 誘導(dǎo)H9c2 心肌細(xì)胞BNIP3 依賴線粒體自噬的發(fā)生
    4.2 Apelin-13 促進(jìn)H9c2 線粒體分裂蛋白Drp1 的表達(dá)
    4.3 Mdivi-1抑制Apelin-13 誘導(dǎo)的H9c2 心肌細(xì)胞BNIP3 依賴線粒體自噬
    4.4 Drp1-siRNA明顯逆轉(zhuǎn)Apelin-13 誘導(dǎo)的H9c2 心肌細(xì)胞BNIP3 依賴線粒體自噬和線粒體鐵源性ROS的產(chǎn)生
    4.5 Apelin-13 促進(jìn)H9c2 心肌細(xì)胞類泛素化蛋白SUMO1 的表達(dá)及SUMO1與Drp1 的共定位
    4.6 SUMO1-siRNA顯著抑制Apelin-13 誘導(dǎo)的BNIP3 依賴線粒體自噬和線粒體鐵源性ROS的產(chǎn)生
    4.7 BNIP3-siRNA抑制Apelin-13 誘導(dǎo)的線粒體鐵超載以及線粒體鐵源性ROS的產(chǎn)生
    4.8 線粒體靶向抗氧化劑Mito-TEMPO抑制Apelin-13 誘導(dǎo)的SUMO1 化修飾Drp1和BNIP3 依賴線粒體自噬
    4.9 SUMO1 修飾Drp1 介導(dǎo)Apelin-13 促心肌細(xì)胞肥大
    4.10 BNIP3 依賴線粒體鐵超載介導(dǎo)Apelin-13 促心肌細(xì)胞肥大
    4.11 人尸檢心肌肥厚心臟標(biāo)本、雙腎雙夾腎血管性高血壓模型大鼠心臟組織以及外源性注射Apelin-13的C57BL/6J小鼠心臟標(biāo)本中BNP、SUMO1、Drp1、BNIP3 呈高表達(dá)
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)翻譯
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3757295