巨噬細(xì)胞泡沫化、內(nèi)皮損傷和高甘油三酯血癥是動脈粥樣硬化發(fā)生與發(fā)展中的重要過程。巨噬細(xì)胞ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體Al(ABCA1)介導(dǎo)膽固醇外流、促進(jìn)HDL形成,從而刺激膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)、抑制泡沫細(xì)胞形成與動脈粥樣硬化發(fā)展。此外,抑制巨噬細(xì)胞對胞外膽固醇的攝取也能降低其泡沫化水平,從而抑制動脈粥樣硬化的發(fā)展。白細(xì)胞介素5(IL-5)刺激B-1細(xì)胞表達(dá)、分泌具有結(jié)合氧化態(tài)LDL (ox-LDL)能力的T15/EO6IgM抗體,從而阻止巨噬細(xì)胞泡沫化、抑制動脈粥樣硬化發(fā)展。反之,巨噬細(xì)胞IL-5表達(dá)缺失加速動脈粥樣硬化的發(fā)展。內(nèi)皮細(xì)胞損傷是動脈粥樣硬化的起始因素,miR-126通過抑制RGS16來激活CXCL12/CXCR4信號通路、促進(jìn)內(nèi)皮修復(fù)、降低VCAM-1表達(dá),從而對動脈起保護(hù)作用。配體激活的轉(zhuǎn)錄因子肝X受體(LXR)刺激ABCA1的表達(dá),但同時(shí)刺激脂肪酸合成、引起嚴(yán)重脂肪肝和高甘油三酯血癥等。我們前期成果表明促分裂原活化蛋白激酶激酶1和2(MEK1/2)抑制劑協(xié)同LXR配體誘導(dǎo)ABCA1表達(dá)與膽固醇流出。同時(shí),文獻(xiàn)表明ERK1敲除小鼠肥胖癥得到改善,脂肪組織炎癥水平下降,基礎(chǔ)代謝...

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號說明
第一章 引言
    第一節(jié) 動脈粥樣硬化發(fā)展現(xiàn)狀
        1.1.1 動脈粥樣硬化國內(nèi)外發(fā)病形勢及形成機(jī)制
        1.1.2 治療動脈粥樣硬化藥物發(fā)展現(xiàn)狀
    第二節(jié) 動脈粥樣硬化與炎癥反應(yīng)
        1.2.1 血管內(nèi)皮下巨噬細(xì)胞參與的炎癥反應(yīng)
        1.2.2 T細(xì)胞、B細(xì)胞參與的炎癥反應(yīng)與血栓形成
        1.2.3 脂代謝在動脈粥樣硬化過程中的作用及其相關(guān)的炎癥反應(yīng)
    第三節(jié) LXR與ERK1/2信號通路與動脈粥樣硬化
        1.3.1 LXR信號通路概述
        1.3.2 LXR信號通路與動脈粥樣硬化
        1.3.3 ERK1/2信號通路概述
        1.3.4 MEK1/2抑制劑與動脈粥樣硬化和脂質(zhì)代謝的關(guān)系
    第四節(jié) microRNA與動脈粥樣硬化
        1.4.1 mircoRNA在心血管疾病中的作用
        1.4.2 miR-126與動脈粥樣硬化
    第五節(jié) 甘油三酯代謝與高甘油三酯血癥
        1.5.1 甘油三酯的合成
        1.5.2 甘油三酯的水解與自由脂肪酸β-氧化
        1.5.3 高甘油三酯血癥
    第六節(jié) 選題依據(jù)
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料、試劑及主要儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動物的飼養(yǎng)
        2.2.2 組織獲取
        2.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)及處理
        2.2.4 油紅O染色
        2.2.5 主動脈剝離
        2.2.6 石蠟切片
        2.2.7 冰凍切片
        2.2.8 免疫組化染色
        2.2.9 免疫熒光
        2.2.10 細(xì)胞及組織蛋白提取與Western blot
        2.2.11 細(xì)胞及組織RNA提取與real time RT-PCR
        2.2.12 miR-126表達(dá)水平檢測
        2.2.13 流式細(xì)胞分選技術(shù)分離脾臟和淋巴結(jié)T細(xì)胞
        2.2.14 酶聯(lián)免疫吸附測定(Elisa)
        2.2.15 凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)
        2.2.16 雙熒光報(bào)告基因系統(tǒng)
        2.2.17 基因克隆與細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.18 膽固醇體內(nèi)反向轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)
        2.2.19 血脂成分分析
        2.2.20 肝臟甘油三酯含量的測定
        2.2.21 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    第一節(jié) MEK1/2抑制劑防止LXR配體引起的脂肪肝、高甘油三酯血脂和肝損傷等副作用
        3.1.1 MEK1/2抑制劑下調(diào)LXR配體引起的肝損傷
        3.1.2 MEK1/2抑制劑消除高脂食物與LXR配體所誘導(dǎo)的高甘油三酯血癥
        3.1.3 MEK1/2抑制劑消除高脂食物與LXR配體所誘導(dǎo)的脂肪肝
    第二節(jié) 組合藥物預(yù)防動脈粥樣硬化的發(fā)生并避免副作用的產(chǎn)生
        3.2.1 MEK1/2抑制劑協(xié)同LXR配體抑制主動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生
        3.2.2 組合藥物消除高脂食物與LXR配體引起的Apoe^-/-小鼠肝損傷、脂肪肝和高甘油三脂血癥等副作用
    第三節(jié) 組合藥物治療動脈粥樣硬化、促進(jìn)斑塊消退
        3.3.1 組合藥物治療動脈粥樣硬化斑塊
        3.3.2 組合藥物避免治療組小鼠脂肪肝副作用的產(chǎn)生
    第四節(jié) 組合藥物預(yù)防動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展、刺激成熟斑塊消退的分子機(jī)制研究
        3.4.1 組合藥物降低血清總膽固醇水平
        3.4.2 甘油三酯水平升高促進(jìn)動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展
        3.4.3 組合藥物協(xié)同抑制泡沫細(xì)胞生成
        3.4.4 組合藥物協(xié)同刺激巨噬細(xì)胞ABCA1的表達(dá)
        3.4.5 組合藥物協(xié)同刺激小鼠體內(nèi)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)
        3.4.6 LXR配體促進(jìn)體內(nèi)IL-5表達(dá)分泌和特異性抗ox-LDL抗體-IgM的產(chǎn)生
        3.4.7 MEK1/2抑制劑刺激肝臟PSCK9和LDLR的表達(dá)
        3.4.8 組合藥物通過miR-126調(diào)控內(nèi)皮功能,抑制單核細(xì)胞粘附,促進(jìn)內(nèi)皮修復(fù)
    第五節(jié) MEK1/2抑制劑消除LXR配體副作用的分子機(jī)理研究
        3.5.1 MEK1/2抑制劑不影響LXR配體誘導(dǎo)的自由脂肪酸合成
        3.5.2 MEK1/2抑制劑和LXR配體組合藥物抑制肝臟甘油三酯合成
        3.5.3 組合藥物促進(jìn)肝臟甘油三酯水解
        3.5.4 組合藥物促進(jìn)肝臟自由脂肪酸β-氧化
第四章 討論
    第一節(jié) 動脈粥樣硬化防治藥物現(xiàn)狀
    第二節(jié) 組合藥物防治動脈粥樣硬化的分子機(jī)制
        4.2.1 組合藥物降低小鼠血清低密度脂蛋白膽固醇水平
        4.2.2 LXR配體刺激巨噬細(xì)胞IL-5表達(dá)
        4.2.3 組合藥物刺激膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)
        4.2.4 組合藥物消除LXR配體引發(fā)的高甘油三酯血癥對動脈粥樣硬化的促進(jìn)作用
        4.2.5 組合藥物刺激microRNA-126表達(dá)
    第三節(jié) MEK1/2抑制劑避免LXR配體引起的脂肪肝和高甘油三酯血癥副作用的分子機(jī)制
        4.3.1 MEK1/2抑制劑不影響LXR配體誘導(dǎo)的自由脂肪酸合成
        4.3.2 ERK1/2信號通路在脂質(zhì)代謝平衡中的作用
    第四節(jié) 組合藥物在疾病治療中的應(yīng)用與展望
第五章 結(jié)論
    第一節(jié) 課題結(jié)果概述
    第二節(jié) 論文創(chuàng)新
    第三節(jié) 進(jìn)一步需要做的工作
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷及攻讀期成果



本文編號：3747386