發(fā)布時(shí)間：2022-10-29 22:26

　　背景動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中不穩(wěn)定性斑塊與臨床癥狀的發(fā)生密切相關(guān)。目前,纖維帽厚度和脂質(zhì)核心的大小是區(qū)別斑塊穩(wěn)定與否的重要參考因素,隨著影像學(xué)和病理學(xué)研究的深入,動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊中的新生血管（Angiogenesis,AG）和血管平滑肌細(xì)胞（Vascular Smooth Muscle Cells,VSMC）日益受到重視。兩者在斑塊內(nèi)的分布、密度和形態(tài)是否與臨床癥狀的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系值得進(jìn)一步探討和研究。內(nèi)皮祖細(xì)胞（Endothelial Progenitor Cells,EPCs）是一種重要的前體細(xì)胞,其數(shù)量和功能的變化與心腦血管疾病有關(guān),探討內(nèi)皮祖細(xì)胞在血管新生和血管平滑肌中的相互作用具有重要意義。目的觀察新生血管和血管平滑肌細(xì)胞在不同臨床癥狀頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的作用,使用內(nèi)皮祖細(xì)胞在體外模擬血管新生和血管平滑肌細(xì)胞的發(fā)生,探討三者在臨床癥狀發(fā)生與發(fā)展中的作用和機(jī)制。方法臨床收集52名頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄患者的頸動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫手術(shù)（Carotid Endarterectomy,CEA）標(biāo)本,術(shù)前根據(jù)患者的臨床癥狀分為無癥狀組和癥狀組2組。無癥狀組:有頸動(dòng)脈狹窄但沒有局灶性缺血性臨床... 

【文章頁數(shù)】：134 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
第一部分 人內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCS)在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊新生血管發(fā)生中的作用和機(jī)制研究
    摘要1
    ABSTRACT 1
    前言
    研究對象和實(shí)驗(yàn)材料
        1. 研究對象
        2. 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1 主要實(shí)驗(yàn)用儀器
            2.2 主要實(shí)驗(yàn)制劑
            2.3 主要實(shí)驗(yàn)溶液的配制
    主要實(shí)驗(yàn)方法
        1. 研究方法
            1.1 手術(shù)方法
            1.2 患者頸動(dòng)脈手術(shù)斑塊標(biāo)本的制備
            1.3 患者頸動(dòng)脈手術(shù)斑塊標(biāo)本的染色
            1.4 頸動(dòng)脈粥樣硬化切片的病理學(xué)觀測指標(biāo)
        2. 細(xì)胞體外實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 來自人胚胎主動(dòng)脈內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
            2.2 內(nèi)皮祖細(xì)胞向動(dòng)靜脈分化
            2.3 內(nèi)皮祖細(xì)胞向血管平滑肌分化
        3. 鑒定來自人胚胎主動(dòng)脈的內(nèi)皮祖細(xì)胞
            3.1 細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)
            3.2 細(xì)胞蛋白的提取與電泳
            3.3 RT-PCR檢測EPCs特異性標(biāo)記物的mRNA表達(dá)水平
            3.4 成管實(shí)驗(yàn)
            3.5 EPCs攝取乙�；兔芏戎鞍讓�(shí)驗(yàn)
        4. 鑒定已分化后的動(dòng)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
            4.1 細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)
            4.2 細(xì)胞蛋白的提取與蛋白電泳
            4.3 RT-PCR檢測分化后的動(dòng)靜脈細(xì)胞的特異性標(biāo)記物的mRNA表達(dá)水平
            4.4 已分化的血管細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)
            4.5 已分化細(xì)胞攝取乙�；兔芏戎鞍讓�(shí)驗(yàn)
        5. 鑒定已分化后的血管平滑肌細(xì)胞
            5.1 細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)
            5.2 細(xì)胞蛋白的提取與蛋白電泳
            5.3 RT-PCR檢測分化后的血管平滑肌細(xì)胞的特異性標(biāo)記物的mRNA表達(dá)水平
        6. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    研究結(jié)果
        1. 患者臨床資料比較
        2. 頸動(dòng)脈斑塊的病理形態(tài)在不同組間的比較
            2.1 頸動(dòng)脈斑塊的大體病理形態(tài)在不同組間的比較
            2.2 頸動(dòng)脈斑塊的鏡下病理形態(tài)在不同組間的比較
        3. 頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中新生血管病理特點(diǎn)研究
            3.1 新生血管管腔橫截面積的比較
            3.2 新生血管密度的比較
            3.3 新生血管在頸動(dòng)脈斑塊中不同部位的密度分布
            3.4 頸動(dòng)脈斑塊中的新生血管形態(tài)
            3.5 頸動(dòng)脈斑塊中的不同新生血管的形態(tài)
            3.6 不同類型的新生血管在不同組間的比較
            3.7 不同類型的新生血管在不同病理性質(zhì)中的比較
            3.8 不同病理性質(zhì)斑塊中鏡下分期的新生血管比較
        4. 頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中血管平滑肌病理特點(diǎn)研究
            4.1 VSMCs的MIA值在不同組中的比較
            4.2 VSMCs的MIA值在不同斑塊組中的比較
            4.3 VSMCs的單位面積中的MIA值(密度)在斑塊中不同部位的分布情況
            4.4 VSMCs的密度與纖維帽厚薄的相關(guān)性研究
        5. 人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的內(nèi)皮祖細(xì)胞
            5.1 人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的內(nèi)皮祖細(xì)胞分布
            5.2 人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的新生血管和內(nèi)皮祖細(xì)胞的關(guān)系
            5.3 人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞的關(guān)系
        6. 鑒定人胚胎主動(dòng)脈來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞
            6.1 普通光學(xué)體視顯微鏡
            6.2 免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測內(nèi)皮祖細(xì)胞
            6.3 real-time PCR檢測內(nèi)皮祖細(xì)胞特異性標(biāo)記物
            6.4 Western blot檢測內(nèi)皮祖細(xì)胞特異性標(biāo)記物
            6.5 內(nèi)皮祖細(xì)胞的成管實(shí)驗(yàn)
            6.6 內(nèi)皮祖細(xì)胞攝取乙�；兔芏戎鞍�
        7. 鑒定內(nèi)皮祖細(xì)胞分化來源的動(dòng)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
            7.1 普通光學(xué)體視顯微鏡
            7.2 免疫熒光實(shí)驗(yàn)鑒定內(nèi)皮祖細(xì)胞分化的動(dòng)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
            7.3 real-time PCR檢測內(nèi)皮祖細(xì)胞所分化的動(dòng)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記物
            7.4 Western blot檢測EPCs所分化的動(dòng)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記物
            7.5 內(nèi)皮祖細(xì)胞所分化的動(dòng)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)
            7.6 內(nèi)皮祖細(xì)胞所分化形成的動(dòng)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞攝取乙�；兔芏戎鞍�
        8. 鑒定內(nèi)皮祖細(xì)胞分化來源的血管平滑肌細(xì)胞
            8.1 免疫熒光實(shí)驗(yàn)鑒定內(nèi)皮祖細(xì)胞所分化的血管平滑肌細(xì)胞
            8.2 rea-time PCR檢測內(nèi)皮祖細(xì)胞所分化的血管平滑肌細(xì)胞特異性標(biāo)記物
            8.3 Western blot檢測內(nèi)皮祖細(xì)胞所分化的血管平滑肌細(xì)胞特異性標(biāo)記物
    討論
        1. 人頸動(dòng)脈粥樣硬性斑塊的病理特征
        2. 人頸動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊中新生血管的特性
        3. 人頸動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊中不同新生血管類型的特性
        4. 內(nèi)皮祖細(xì)胞在人動(dòng)脈粥樣硬化中新生血管發(fā)生及其機(jī)制
        5. 血管平滑肌細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用
        6. 內(nèi)皮祖細(xì)胞在人動(dòng)脈粥樣硬化中血管平滑肌發(fā)生中的作用及其機(jī)制
        7. 不足與展望
    小結(jié)
        1. 人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的病理學(xué)研究
        2. 人頸動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊中新生血管特性的研究
        3. 血管平滑肌在人頸動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊中的研究
        4. 內(nèi)皮祖細(xì)胞在人動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中新生血管和血管平滑肌的發(fā)生及機(jī)制研究
第二部分 頸動(dòng)脈形態(tài)對頸動(dòng)脈粥樣硬化的影響
    中文摘要2
    ABSTRACT 2
    前言
    對象和方法
        1. 研究對象
        2. 研究方法
            2.1 手術(shù)方法
            2.2 患者頸動(dòng)脈角度的測量
            2.3 患者頸動(dòng)脈分叉角高度的測量
            2.4 血液黏度的檢測和頸動(dòng)脈血流剪切力的計(jì)算
            2.5 頸動(dòng)脈手術(shù)標(biāo)本的處理
            2.6 患者頸動(dòng)脈手術(shù)斑塊標(biāo)本的染色
            2.7 頸動(dòng)脈粥樣硬化切片的病理學(xué)研究
        3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    研究結(jié)果
        1. 患者臨床資料統(tǒng)計(jì)
        2. 頸動(dòng)脈分叉角和頸內(nèi)動(dòng)脈角的測量
        3. 頸動(dòng)脈角度和高度的關(guān)系
        4. 頸動(dòng)脈角度和血流剪切力的相關(guān)性分析
        5. 斑塊纖維帽的厚度和細(xì)胞外基質(zhì)
        6. 頸動(dòng)脈形態(tài)和斑塊病理學(xué)的相關(guān)性研究
            6.1 預(yù)動(dòng)脈分叉角部位的斑塊病理學(xué)研究
            6.2 頸內(nèi)動(dòng)脈角、血液剪切力和斑塊病理學(xué)研究
        7. YAP在頸動(dòng)脈斑塊中的表達(dá)以及與頸動(dòng)脈形態(tài)的研究
    討論
        1. 動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素
        2. 血管的解剖形態(tài)在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生中的作用
        3. 頸動(dòng)脈高度在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生中的作用
        4. 頸動(dòng)脈分叉角所產(chǎn)生的血流動(dòng)力學(xué)變化與分子生物學(xué)的關(guān)系
        5. 細(xì)胞外基質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系
        6. YAP與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系
        7. 不足與展望
    小結(jié)
        1. 頸動(dòng)脈分叉角與頸內(nèi)動(dòng)脈角
        2. 頸動(dòng)脈分叉角與自身高度
        3. 頸動(dòng)脈角度和血流剪切力
        4. 纖維帽厚度和細(xì)胞外基質(zhì)
        5. 角度和細(xì)胞外基質(zhì)
        6. YAP與角度
參考文獻(xiàn)
英文縮略詞表
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人胚胎主動(dòng)脈血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J]. 莊乾淑,張文健,葉麗亞,劉虹麟,曹妍婷,成蘭云,丁浩,婁晉寧,劉鵬,李建中.  中國醫(yī)藥生物技術(shù). 2012(02)



本文編號：3698530