缺鐵性貧血（iron deficiency anemia,IDA）是由于各種不同的原因導致體內儲存鐵缺乏,影響細胞血紅素的生成而導致的貧血。缺鐵性貧血是世界范圍內最常見的營養(yǎng)缺乏病之一,影響著約10億人口。 從缺鐵發(fā)展到缺鐵性貧血是一個緩慢的過程,一般經(jīng)歷鐵缺乏期（iron deplete, ID）、缺鐵性紅細胞生成期（iron deficiency erythropoiesis,IDE）和缺鐵性貧血期。發(fā)生缺鐵和缺鐵性貧血不僅會影響身體正常的機能,還可能導致胎兒和兒童的智力發(fā)育受到不可逆轉的影響。通常機體內儲存鐵的量與血清鐵蛋白的水平成正相關,機體內血清鐵蛋白的水平是評價機體儲存鐵缺乏和診斷缺鐵性貧血靈敏、特異的指標。血清鐵蛋白的檢測對盡早地發(fā)現(xiàn)缺鐵并預防缺鐵性貧血的發(fā)生具有重要意義。本研究制備了人鐵蛋白抗原和抗人鐵蛋白抗體,進而建立了適用于全自動管式化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)的人血清鐵蛋白化學發(fā)光免疫定量檢測試劑,試劑檢測性能與國際主流同類試劑相當。 本研究利用大腸桿菌表達系統(tǒng)表達了人鐵蛋白H、L亞基（FTH1,FTL）所表達的蛋白經(jīng)熱處理、凝膠過濾層析、陰離子交換層析等方法... 

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
Abbreviations
第一章 前言
    1. 缺鐵性貧血
        1.1 貧血概述
        1.2 缺鐵性貧血(IDA)
        1.3 缺鐵性貧血的實驗室診斷
        1.4 缺鐵性貧血的預防和治療
    2. 血清鐵蛋白
        2.1 鐵蛋白簡介
        2.2 鐵蛋白的結構和功能
        2.3 鐵蛋白的理化性質及自組裝
        2.4 人血清鐵蛋白
    3. 全自動管式化學發(fā)光免疫檢測系統(tǒng)
        3.1 化學發(fā)光免疫分析技術
        3.2 全自動管式化學發(fā)光免疫分析儀
    4. 重組鐵蛋白納米顆粒的應用
        4.1 磁性鐵蛋白納米顆粒與腫瘤診斷
        4.2 藥物載體與腫瘤治療
        4.3 生物大分子檢測
        4.4 疫苗開發(fā)
    5. 本研究的目的、思路和意義
第二章 材料與方法
    1. 材料
        1.1 主要儀器
        1.2 主要試劑與材料
        1.3 常用溶液及培養(yǎng)基的配制
    2. 方法
        2.1 分子生物學實驗方法
        2.2 蛋白誘導表達、純化及鑒定方法
        2.3 小鼠免疫
        2.4 雜交瘤的篩選
        2.5 單抗的制備和性質鑒定
        2.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗
        2.7 管式化學發(fā)光免疫分析試驗
            2.7.1 磁珠包被抗體
            2.7.2 吖啶酯標記抗體
            2.7.3 管式化學發(fā)光免疫分析試驗(雙抗體夾心法)
            2.7.4 管式化學發(fā)光免疫分析儀Caris 200操作流程
第三章 結果與分析
    1. 重組人鐵蛋白H、L亞基的表達與純化
        1.1 人鐵蛋白H、L亞基表達質粒的構建
        1.2 重組人鐵蛋白H、L亞基的表達與純化
        1.3 重組人鐵蛋白H、L亞基聚體性質分析
        1.4 小結
    2. 人鐵蛋白單克隆抗體的制備與鑒定
        2.1 人鐵蛋白納米顆粒免疫小鼠及血清評價
        2.2 鐵蛋白單克隆抗體的篩選
        2.3 鐵蛋白單克隆抗體的鑒定
        2.4 小結
    3. 人血清鐵蛋白定量檢測試劑的建立及初步評價
        3.1 人血清鐵蛋白定量檢測試劑的建立
        3.2 人血清鐵蛋白定量檢測試劑的初步評價
        3.3 人血清鐵蛋白定量檢測試劑配對單抗穩(wěn)定性評價
        3.4 小結
第四章 討論
    1. 重組人鐵蛋白H、L亞基的表達、純化、體外自組裝與應用
    2. 人血清鐵蛋白特異性單克隆抗體的篩選
    3. 化學發(fā)光免疫定量分析試劑的開發(fā)
小結與展望
    1. 小結
    2. 展望
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]細菌生產(chǎn)人鐵蛋白的新功能及應用[J]. 范克龍,周萌,閻錫蘊.  微生物學通報. 2014(03)
[2]化學發(fā)光免疫分析新進展[J]. 肖勤,林金明.  分析試驗室. 2011(01)



本文編號：3688352