缺鐵性貧血（iron deficiency anemia,IDA）是由于各種不同的原因?qū)е麦w內(nèi)儲存鐵缺乏,影響細(xì)胞血紅素的生成而導(dǎo)致的貧血。缺鐵性貧血是世界范圍內(nèi)最常見的營養(yǎng)缺乏病之一,影響著約10億人口。 從缺鐵發(fā)展到缺鐵性貧血是一個(gè)緩慢的過程,一般經(jīng)歷鐵缺乏期（iron deplete, ID）、缺鐵性紅細(xì)胞生成期（iron deficiency erythropoiesis,IDE）和缺鐵性貧血期。發(fā)生缺鐵和缺鐵性貧血不僅會影響身體正常的機(jī)能,還可能導(dǎo)致胎兒和兒童的智力發(fā)育受到不可逆轉(zhuǎn)的影響。通常機(jī)體內(nèi)儲存鐵的量與血清鐵蛋白的水平成正相關(guān),機(jī)體內(nèi)血清鐵蛋白的水平是評價(jià)機(jī)體儲存鐵缺乏和診斷缺鐵性貧血靈敏、特異的指標(biāo)。血清鐵蛋白的檢測對盡早地發(fā)現(xiàn)缺鐵并預(yù)防缺鐵性貧血的發(fā)生具有重要意義。本研究制備了人鐵蛋白抗原和抗人鐵蛋白抗體,進(jìn)而建立了適用于全自動(dòng)管式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)的人血清鐵蛋白化學(xué)發(fā)光免疫定量檢測試劑,試劑檢測性能與國際主流同類試劑相當(dāng)。 本研究利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)了人鐵蛋白H、L亞基（FTH1,FTL）所表達(dá)的蛋白經(jīng)熱處理、凝膠過濾層析、陰離子交換層析等方法... 

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
Abbreviations
第一章 前言
    1. 缺鐵性貧血
        1.1 貧血概述
        1.2 缺鐵性貧血(IDA)
        1.3 缺鐵性貧血的實(shí)驗(yàn)室診斷
        1.4 缺鐵性貧血的預(yù)防和治療
    2. 血清鐵蛋白
        2.1 鐵蛋白簡介
        2.2 鐵蛋白的結(jié)構(gòu)和功能
        2.3 鐵蛋白的理化性質(zhì)及自組裝
        2.4 人血清鐵蛋白
    3. 全自動(dòng)管式化學(xué)發(fā)光免疫檢測系統(tǒng)
        3.1 化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)
        3.2 全自動(dòng)管式化學(xué)發(fā)光免疫分析儀
    4. 重組鐵蛋白納米顆粒的應(yīng)用
        4.1 磁性鐵蛋白納米顆粒與腫瘤診斷
        4.2 藥物載體與腫瘤治療
        4.3 生物大分子檢測
        4.4 疫苗開發(fā)
    5. 本研究的目的、思路和意義
第二章 材料與方法
    1. 材料
        1.1 主要儀器
        1.2 主要試劑與材料
        1.3 常用溶液及培養(yǎng)基的配制
    2. 方法
        2.1 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法
        2.2 蛋白誘導(dǎo)表達(dá)、純化及鑒定方法
        2.3 小鼠免疫
        2.4 雜交瘤的篩選
        2.5 單抗的制備和性質(zhì)鑒定
        2.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
        2.7 管式化學(xué)發(fā)光免疫分析試驗(yàn)
            2.7.1 磁珠包被抗體
            2.7.2 吖啶酯標(biāo)記抗體
            2.7.3 管式化學(xué)發(fā)光免疫分析試驗(yàn)(雙抗體夾心法)
            2.7.4 管式化學(xué)發(fā)光免疫分析儀Caris 200操作流程
第三章 結(jié)果與分析
    1. 重組人鐵蛋白H、L亞基的表達(dá)與純化
        1.1 人鐵蛋白H、L亞基表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建
        1.2 重組人鐵蛋白H、L亞基的表達(dá)與純化
        1.3 重組人鐵蛋白H、L亞基聚體性質(zhì)分析
        1.4 小結(jié)
    2. 人鐵蛋白單克隆抗體的制備與鑒定
        2.1 人鐵蛋白納米顆粒免疫小鼠及血清評價(jià)
        2.2 鐵蛋白單克隆抗體的篩選
        2.3 鐵蛋白單克隆抗體的鑒定
        2.4 小結(jié)
    3. 人血清鐵蛋白定量檢測試劑的建立及初步評價(jià)
        3.1 人血清鐵蛋白定量檢測試劑的建立
        3.2 人血清鐵蛋白定量檢測試劑的初步評價(jià)
        3.3 人血清鐵蛋白定量檢測試劑配對單抗穩(wěn)定性評價(jià)
        3.4 小結(jié)
第四章 討論
    1. 重組人鐵蛋白H、L亞基的表達(dá)、純化、體外自組裝與應(yīng)用
    2. 人血清鐵蛋白特異性單克隆抗體的篩選
    3. 化學(xué)發(fā)光免疫定量分析試劑的開發(fā)
小結(jié)與展望
    1. 小結(jié)
    2. 展望
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)菌生產(chǎn)人鐵蛋白的新功能及應(yīng)用[J]. 范克龍,周萌,閻錫蘊(yùn).  微生物學(xué)通報(bào). 2014(03)
[2]化學(xué)發(fā)光免疫分析新進(jìn)展[J]. 肖勤,林金明.  分析試驗(yàn)室. 2011(01)



本文編號：3688352