目的探討微小RNA-142-5p（miR-142-5p）通過直接靶向包含轉(zhuǎn)錄激活因子ETS樣蛋白（ELK）1調(diào)控動脈粥樣硬化內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用機制。方法體外培養(yǎng)人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞（HAEC）,氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激HAEC,采用qRT-PCR檢測細(xì)胞中miR-142-5p及ELK1 mRNA的表達(dá)水平,Western印跡檢測細(xì)胞中ELK1及活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Cleaved Caspase）-3、B淋巴細(xì)胞瘤-2相關(guān)蛋白（Bax）、B淋巴細(xì)胞瘤（Bcl）-2蛋白表達(dá)水平,流式細(xì)胞術(shù)檢測HAECs凋亡率。雙熒光素酶報告基因鑒定miR-142-5p的靶基因。細(xì)胞轉(zhuǎn)染anti-miR-142-5p、anti-miR-con、pcDNA、pcDNA-ELK1,Western印跡與qRT-PCR檢測miR-142-5p對靶基因ELK1的調(diào)控作用。流式細(xì)胞術(shù)檢測miR-142-5p與ELK1表達(dá)變化對HAECs凋亡的作用。Western印跡檢測細(xì)胞中Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)。結(jié)果 ox-LDL刺激HAECs后miR-142-5p及Cleaved... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞與主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        1.2.2 ox-LDL處理及分組
        1.2.3 實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測miR-142-5p、ELK1 mRNA表達(dá)水平
        1.2.4 Western印跡法檢測ELK1及Wnt信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平
        1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡
        1.2.6 雙熒光素酶報告實驗
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 ox-LDL處理時間對HAECs凋亡、miR-142-5p和ELK1表達(dá)的影響
    2.2 anti-miR-142-5p抑制ox-LDL處理HAECs凋亡
    2.3 miR-142-5p靶向ELK1
    2.4 過表達(dá)ELK1抑制ox-LDL處理HAECs凋亡
    2.5 沉默ELK1逆轉(zhuǎn)anti-miR-142-5p對ox-LDL處理HAECs抑制凋亡作用
    2.6 ELK1和miR-142-5p表達(dá)對ox-LDL處理HAECs中Wnt信號通路的影響
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-124靶向調(diào)控STAT3調(diào)節(jié)動脈粥樣硬化中血管內(nèi)皮細(xì)胞的生物學(xué)特性[J]. 謝民,李社芳,邢海燕,謝翀.  中國老年學(xué)雜志. 2019(01)
[2]miR-98通過調(diào)控ox-LDL誘導(dǎo)血管內(nèi)皮損傷抑制動脈粥樣硬化形成的作用機制研究[J]. 劉繼紅,馮斌.  中國循證心血管醫(yī)學(xué)雜志. 2018(08)
[3]Wnt/β-catenin信號通路對動脈粥樣硬化的調(diào)節(jié)作用[J]. 王欣欣,劉琦,代麗媛,何淼,杜文娟.  心血管病學(xué)進展. 2017(06)
[4]miR-142-5p靶向調(diào)控TGF-β2促進人巨噬細(xì)胞凋亡[J]. 李玉東,楊清泉,張明磊,王星,劉慧,李聰聰.  中國動脈硬化雜志. 2017(05)
[5]血漿炎癥細(xì)胞因子與急性冠脈綜合征的相關(guān)性研究[J]. 任廣理,羅濤,侯伯軒,丁鵬,浦奎.  中國循證心血管醫(yī)學(xué)雜志. 2017(03)
[6]高同型半胱氨酸型動脈粥樣硬化大鼠主動脈Caspase3、Bax及Bcl-2的表達(dá)[J]. 田佳,張墨陽,周忠義,謝曉紅.  中國臨床研究. 2016(07)
[7]急性缺血性卒中患者血清Ox-LDL水平與疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性[J]. 翟曉斌,葛朝明,范禎禎,蔡宏斌,劉志艷,王浩玥.  中國循證心血管醫(yī)學(xué)雜志. 2016(04)
[8]急性冠脈綜合征患者循環(huán)miR-142-5p表達(dá)水平的臨床意義[J]. 徐測梁,林彬,王齊國,安娜.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2015(12)
[9]吲哚美辛對K562細(xì)胞株BCR/ABL-Wnt/β-catenin信號通路的影響[J]. 劉張玲,胡晶,黃崢蘭,李會,劉鑫,馮文莉.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015(07)



本文編號：3678584