目的:心肌梗死（MI）是一種致命性疾病,每年導(dǎo)致全球數(shù)以百萬計(jì)的死亡。心肌梗死邊緣區(qū)（BZ）對(duì)于心肌梗死病人的預(yù)后至關(guān)重要。長鏈非編碼RNA（lnc RNA）以往被認(rèn)為是轉(zhuǎn)錄的“噪音”,且沒有生物學(xué)功能。近年來,發(fā)現(xiàn)lnc RNA在心血管疾病中扮演重要角色。然而,lnc RNA在心肌梗死邊緣區(qū)的表達(dá)和潛在功能并不清楚。我們的研究的目的是對(duì)Wistar大鼠心肌梗死的心肌梗死邊緣區(qū)lnc RNA和m RNA的表達(dá)譜分析,識(shí)別出lnc RNA和m RNA在心肌梗死邊緣區(qū)的差異表達(dá)。根據(jù)差異表達(dá)m RNA的生物信息學(xué)分析和共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析,預(yù)測出部分lnc RNA的潛在功能。通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,NR₀27324作為競爭性內(nèi)源RNA（ce RNA）結(jié)合mi R-103-3p,進(jìn)而調(diào)節(jié)下游ATG5表達(dá),在心肌細(xì)胞低糖缺氧損傷中傳遞凋亡信號(hào)。研究方法:我們通過結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支的方法,構(gòu)建大鼠心肌梗死的動(dòng)物模型,對(duì)照組采用假手術(shù),即冠狀動(dòng)脈前降支僅穿線不結(jié)扎。術(shù)后6小時(shí)取材,利用伊文思藍(lán)染料（EB）和氯化三苯基四氮唑（TTC）雙重染色法精確定位心梗邊緣區(qū)。每組取3個(gè)生物學(xué)重復(fù),通過芯片... 

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
論文一、大鼠心肌梗死邊緣區(qū)長鏈非編碼RNA和mRNA的表達(dá)譜分析
    1前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑和儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.3 心肌梗死模型
        2.4 心肌梗死邊緣區(qū)的確定
        2.5 RNA提取和RNA質(zhì)量控制
        2.6 lncRNA和mRNA表達(dá)的芯片分析
        2.7 基因本體論分析(GO分析)和通路(Pathway)分析
        2.8 構(gòu)建lncRNAmRNA共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)
        2.9 qRT-PCR驗(yàn)證試驗(yàn)
        2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 心肌梗死邊緣區(qū)的lnc RNA和 m RNA的表達(dá)譜
        3.2 GO分析和pathway分析
        3.3 lnc RNA和 m RNA共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
        3.4 q RT-PCR驗(yàn)證10 個(gè)高度差異表達(dá)的lnc RNA
    4 討論
論文二、NR_027324 作為ce RNA與miR-103-3p結(jié)合,調(diào)節(jié)下游靶點(diǎn)ATG5 在心肌細(xì)胞中傳遞凋亡信號(hào)1
    前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 細(xì)胞
            2.1.3 主要儀器
        2.2 NR_027324靶點(diǎn)預(yù)測
        2.3 293T細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
        2.4 H9C2心肌細(xì)胞培養(yǎng)、缺血模型和轉(zhuǎn)染
        2.5 雙熒光素酶報(bào)告基因(Luciferase)檢測
        2.6 Real-time PCR檢測
        2.7 Westernblot檢測蛋白表達(dá)
        2.8 免疫熒光檢測
        2.9 LDH檢測
        2.10 MTT檢測
        2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 NR_027324、mi R-103-3p、ATG5在低糖缺氧H9C2細(xì)胞中的變化
        3.2 NR_027324作為Ce RNA與 mi R-103-3p結(jié)合,調(diào)節(jié)miR-103-3p表達(dá)
        3.3 過表達(dá)NR_027324對(duì)低糖缺氧H9C2細(xì)胞活力的影響
        3.4 沉默NR_027324對(duì)低糖缺氧H9C2細(xì)胞活力的的影響
        3.5 沉默NR_027324抑制低糖缺氧H9C2細(xì)胞的凋亡和自噬
        3.6 N R_027324通過miR-103-3p調(diào)節(jié)ATG5表達(dá)
    4 討論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡介



本文編號(hào)：3677870