目的:通過(guò)測(cè)定射血分?jǐn)?shù)降低的心力衰竭（heart failure with reduced ejection fraction,HFREF）大鼠腎臟水通道蛋白2（aquaporin-2,AQP2）表達(dá)及尿AQP2濃度,探討重組人腦利鈉肽（Recombinant human brain natriuretic peptide,rhBNP）與呋塞米序貫治療應(yīng)用于射血分?jǐn)?shù)降低心衰大鼠,觀察對(duì)利尿效果的影響以及形成機(jī)制,并為臨床何時(shí)應(yīng)用rhBNP改善射血分?jǐn)?shù)降低心衰液體潴留及利尿劑抵抗效果最佳提供理論依據(jù)。方法:采取結(jié)扎雄性Wistar大鼠左前降支,建成急性心肌梗死后CHF模型。手術(shù)4周后,存活大鼠接受動(dòng)物超聲檢測(cè),左室射血分?jǐn)?shù)（Ejection Fraction,EF）<55%,提示動(dòng)物模型建立成功。建模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組,2周rhBNP+2周呋塞米組,2周呋塞米+2周rhBNP組,rhBNP+呋塞米組,另設(shè)假手術(shù)組。干預(yù)4周采集血、尿標(biāo)本,記錄24h出入量（干預(yù)2周、4周）。檢測(cè)血漿血管緊張素II（Angiotensin II,AngII）、醛固酮（Aldosterone,AL... 

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 前言
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.2 試劑
    2.2 主要溶液及配置
        2.2.1 凍干重組人腦利鈉肽（rhBNP）配置成濃度為10ug/ml的溶液
        2.2.2 Western Blot溶液配制
    2.3 藥物
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
        2.4.2 模型制備
        2.4.3 給藥劑量、途徑及時(shí)間
    2.5 超聲心動(dòng)圖檢測(cè)
    2.6 標(biāo)本的收集與預(yù)處理
    2.7 HE染色
    2.8 免疫組化染色
        2.8.1 取材
        2.8.2 脫水、透明、浸蠟
        2.8.3 包埋
        2.8.4 切片
        2.8.5 烤片
        2.8.6 免疫組化染色
    2.9 ELISA方法
    2.10 Western Blot測(cè)定腎臟髓質(zhì)AQP2 蛋白表達(dá)
        2.10.1 蛋白抽提
        2.10.2 BCA法蛋白定量
        2.10.3 制備上樣蛋白
        2.10.4Western Blot實(shí)驗(yàn)
    2.11 Real-Time PCR測(cè)定腎臟髓質(zhì)AQP2mRNA表達(dá)
        2.11.1 引物的合成
        2.11.2 提取樣本總RNA
        2.11.3 電泳
        2.11.4 反轉(zhuǎn)錄
        2.11.5 RT-PCR
    2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 手術(shù)及干預(yù)期間大鼠的存活狀況
    3.2 大鼠血漿AngII、ALD、AVP濃度
    3.3 大鼠血漿NT-proBNP濃度
    3.4 大鼠尿液AQP2 排泄率(即AQP2 濃度/肌酐)
    3.5 大鼠24 小時(shí)出入量差值
    3.6 干預(yù)4周后大鼠超聲結(jié)果
    3.7 干預(yù)4 周后大鼠腎臟AQP2 蛋白表達(dá)
    3.8 干預(yù)4 周后大鼠腎臟AQP2 mRNA表達(dá)
    3.9 干預(yù)4 周后心衰大鼠腎內(nèi)髓質(zhì)AQP2的MOD值
    3.10 大鼠腎臟HE染色結(jié)果的分析
第4章 附圖
第5章 附表
第6章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3677065