PCSK9通過(guò)降解ApoER2拮抗apoE/ApoER2的抗炎作用
發(fā)布時(shí)間:2022-07-14 09:50
動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)是一種慢性炎癥性疾病,血管壁的炎癥是其發(fā)展過(guò)程中的主要表現(xiàn)之一。內(nèi)皮細(xì)胞是貼襯于血管腔面的單層扁平上皮,其損傷及功能障礙不僅是AS的起始環(huán)節(jié),同時(shí)在擴(kuò)大血管炎癥反應(yīng)中也起了關(guān)鍵的作用。載脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)是血漿脂蛋白的結(jié)構(gòu)蛋白,在血漿富含甘油三酯脂蛋白代謝中起重要作用。除通過(guò)參與脂質(zhì)代謝影響AS發(fā)生、發(fā)展外,apoE的抗炎作用對(duì)于抑制AS發(fā)生發(fā)展也十分重要。載脂蛋白E受體2(apolipoprotein E receptor-2,ApoER2)是一個(gè)廣泛存在于細(xì)胞膜上的跨膜內(nèi)吞受體蛋白,其作為apoE的受體對(duì)apoE具有高度的親和性。有研究表明,apoE與內(nèi)皮細(xì)胞膜上的ApoER2結(jié)合刺激內(nèi)皮一氧化氮合酶產(chǎn)生及內(nèi)皮細(xì)胞遷移,同時(shí)也減弱單核細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞粘附。前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種新的蛋白水解酶,其通過(guò)調(diào)節(jié)肝細(xì)胞膜上的低密度脂蛋白受體(low density lipoprote...
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 炎癥在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中的作用
1.2 載脂蛋白E/載脂蛋白E受體2與AS的關(guān)系
1.2.1 載脂蛋白E在AS中的作用
1.2.2 載脂蛋白E受體2在AS中的作用
1.2.3 apoE/ApoER2通過(guò)抗炎作用的發(fā)揮抑制AS的發(fā)生發(fā)展
1.3 前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9與AS
1.3.1 前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素的結(jié)構(gòu)與功能
1.3.2 PCSK9與炎癥
1.4 PCSK9與apoE/ApoER2的抗炎作用間的關(guān)系
第二章 實(shí)驗(yàn)材料
2.1 細(xì)胞和主要試劑
2.2 主要儀器設(shè)備
第三章 實(shí)驗(yàn)方法
3.1 常用試劑配制
3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
3.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
3.2.2 細(xì)胞傳代
3.2.3 細(xì)胞凍存
3.3 蛋白質(zhì)印跡法-Western blot
3.3.1 貼壁細(xì)胞蛋白質(zhì)提取
3.3.2 BCA蛋白定量
3.3.3 SDS-PAGE凝膠配制
3.3.4 電泳
3.3.5 轉(zhuǎn)膜(濕轉(zhuǎn)法)
3.3.6 封閉、抗體孵育及ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)
3.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)-Elisa
3.5 統(tǒng)計(jì)分析
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.1 LPS對(duì)HUVECs中TLR4,PCSK9和炎癥因子表達(dá)的影響
4.2 apoE3對(duì)LPS所致的HUVECs中PCSK9, ApoER2, TNF-α 和IL-6表達(dá)的影響
4.3 人重組apoE蛋白對(duì)HUVECs中PCSK9,ApoER2的影響
4.4 人重組apoE蛋白對(duì)Hep G2細(xì)胞PCSK9,ApoER2的影響
4.5 PCSK9通過(guò)降解ApoER2拮抗apoE/ApoER2抗炎作用
第五章 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
References
攻讀學(xué)位期間的科研成果
課題資助
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老與心血管疾病的相關(guān)性[J]. 卿即娜,陳紅陽(yáng),尹琳潔,尹凱. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2019(02)
[2]載脂蛋白E基因多態(tài)性與中國(guó)人群散發(fā)型阿爾茨海默病相關(guān)性的Meta分析[J]. 任昌菊,張超,鄢金柱,左紅霞,翁鴻. 中國(guó)循證醫(yī)學(xué)雜志. 2014(07)
[3]載脂蛋白E基因多態(tài)性與血脂水平的關(guān)系[J]. 祝成亮,周新,劉芳,胡漢林. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2005(02)
[4]載脂蛋白E研究進(jìn)展[J]. 張雪梅,劉秉文. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2001(02)
本文編號(hào):3660900
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 炎癥在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中的作用
1.2 載脂蛋白E/載脂蛋白E受體2與AS的關(guān)系
1.2.1 載脂蛋白E在AS中的作用
1.2.2 載脂蛋白E受體2在AS中的作用
1.2.3 apoE/ApoER2通過(guò)抗炎作用的發(fā)揮抑制AS的發(fā)生發(fā)展
1.3 前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9與AS
1.3.1 前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素的結(jié)構(gòu)與功能
1.3.2 PCSK9與炎癥
1.4 PCSK9與apoE/ApoER2的抗炎作用間的關(guān)系
第二章 實(shí)驗(yàn)材料
2.1 細(xì)胞和主要試劑
2.2 主要儀器設(shè)備
第三章 實(shí)驗(yàn)方法
3.1 常用試劑配制
3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
3.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
3.2.2 細(xì)胞傳代
3.2.3 細(xì)胞凍存
3.3 蛋白質(zhì)印跡法-Western blot
3.3.1 貼壁細(xì)胞蛋白質(zhì)提取
3.3.2 BCA蛋白定量
3.3.3 SDS-PAGE凝膠配制
3.3.4 電泳
3.3.5 轉(zhuǎn)膜(濕轉(zhuǎn)法)
3.3.6 封閉、抗體孵育及ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)
3.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)-Elisa
3.5 統(tǒng)計(jì)分析
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.1 LPS對(duì)HUVECs中TLR4,PCSK9和炎癥因子表達(dá)的影響
4.2 apoE3對(duì)LPS所致的HUVECs中PCSK9, ApoER2, TNF-α 和IL-6表達(dá)的影響
4.3 人重組apoE蛋白對(duì)HUVECs中PCSK9,ApoER2的影響
4.4 人重組apoE蛋白對(duì)Hep G2細(xì)胞PCSK9,ApoER2的影響
4.5 PCSK9通過(guò)降解ApoER2拮抗apoE/ApoER2抗炎作用
第五章 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
References
攻讀學(xué)位期間的科研成果
課題資助
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老與心血管疾病的相關(guān)性[J]. 卿即娜,陳紅陽(yáng),尹琳潔,尹凱. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2019(02)
[2]載脂蛋白E基因多態(tài)性與中國(guó)人群散發(fā)型阿爾茨海默病相關(guān)性的Meta分析[J]. 任昌菊,張超,鄢金柱,左紅霞,翁鴻. 中國(guó)循證醫(yī)學(xué)雜志. 2014(07)
[3]載脂蛋白E基因多態(tài)性與血脂水平的關(guān)系[J]. 祝成亮,周新,劉芳,胡漢林. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2005(02)
[4]載脂蛋白E研究進(jìn)展[J]. 張雪梅,劉秉文. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2001(02)
本文編號(hào):3660900
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