目的:通過檢測ox-LDL誘導(dǎo)/非誘導(dǎo)的人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞中miR-587和TLR4的表達(dá),在細(xì)胞中上調(diào)/下調(diào)miR-587的表達(dá),探討miR-587是如何通過調(diào)節(jié)TLR4的表達(dá)來影響人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞生長的。方法:real-time PCR檢測ox-LDL誘導(dǎo)/非誘導(dǎo)的人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞中miR-587和TLR4的表達(dá)情況。MTT實驗檢測miR-587對細(xì)胞增殖的影響。通過JC-1實驗分析miR-587對細(xì)胞凋亡的影響。通過MIRDB軟件分析預(yù)測miR-587與TLR4可能的結(jié)合位點后,通過熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測miR-587對TLR4的靶向調(diào)節(jié)作用,分析miR-587過表達(dá)后是否影響TLR4的活性。構(gòu)建miR-587過表達(dá)或低表達(dá)的人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞系,通過western blot實驗檢測miR-587過表達(dá)或低表達(dá)對TLR4和caspase8蛋白的調(diào)節(jié)的作用。在過表達(dá)mi R-587的人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)染TLR4,通過MTT檢測細(xì)胞生長、JC-1檢測細(xì)胞凋亡和western blot檢測TLR4和caspase8的表達(dá)情況。采用統(tǒng)計學(xué)的方法比較多組間的單因素統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)果:real... 

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1前言
2 材料與方法
    2.1 材料與試劑
    2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.3 HAECs的處理及轉(zhuǎn)染
        2.3.1 ox-LDL處理HAECs
        2.3.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    2.4 細(xì)胞活力測定
    2.5 細(xì)胞凋亡測定
    2.6 目的基因的檢測
    2.7 目的蛋白表達(dá)的檢測
    2.8 熒光素酶報告分析
    2.9 統(tǒng)計學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 miR-587和TLR4在ox-LDL處理的HAECs中的表達(dá)情況
    3.2 miR-587對人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞生長的調(diào)節(jié)作用
    3.3 miR-587對TLR4的調(diào)節(jié)作用
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡介



本文編號：3657460