cGMP/Akt/GSK-3β信號途徑對快速心房起搏家兔ANP分泌的調(diào)節(jié)作用
發(fā)布時間:2022-07-02 13:41
目的:本文探討快速起搏對房家兔心房cGMP介導(dǎo)的PI3K/Akt/GSK-3β信號通路的變化及其對ANP分泌的影響,為進一步闡明房顫中心房肌細胞的結(jié)構(gòu)和分泌功能的改變提供實驗依據(jù)。方法:(1)快速心房起搏家兔在體模型:分為對照組和模型組。經(jīng)右頸外靜脈插管,3.7V電壓刺激兔右心房,制備快速起搏心房家兔房顫模型,刺激時長8h,連接肢體導(dǎo)聯(lián)后通過利用RM6240多通道生理信號采集系統(tǒng)記錄導(dǎo)聯(lián)心電圖和心房相對不應(yīng)期。利用光鏡和透射電鏡觀察記錄快速起搏8h后心肌組織形態(tài)學(xué)改變、心肌線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)以及縫隙連接等超微結(jié)構(gòu)的改變;采用Western Bolt法對快速起搏8h的心房組織中Akt和GSK-3β活性進行檢測;抽取心尖血液,利用ELISA法檢測cGMP濃度改變;利用放射免疫方法檢測血清ANP濃度改變。(2)制備離體心房模型,進行灌流實驗,分低頻率刺激組,高頻率刺激組,高頻率加抑制劑組。低頻刺激組給予1.5Hz刺激,穩(wěn)定40分鐘后,收集灌流液每兩分鐘一次。前24分鐘收集灌流液作為對照,之后灌流液加入CNP,收集灌流24分鐘。高頻刺激組給予4Hz刺激,穩(wěn)定40分鐘后,收集灌流液兩分鐘一次。前24...
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語表
第一章 前言
第二章 實驗材料
2.1. 實驗動物
2.2. 實驗試劑
2.3. 實驗儀器
第三章 實驗方法
3.1 動物模型制備
3.2 H&E染色
3.3 透射電鏡觀察
3.4 ELISA法檢測cGMP
3.5 Western Bloting法檢測心肌組織蛋白表達
3.6 血清和灌流液中ANP的測定
3.7 統(tǒng)計學(xué)分析
第四章 實驗結(jié)果
4.1 快速起搏心房家兔模型制備
4.2 快速起搏對家兔心房肌組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響
4.3 快速起搏對家兔心房超微結(jié)構(gòu)變化的影響
4.4 快速起搏對家兔心房ANP分泌及cGMP/Akt/GSK-3β的影響
4.5 快速刺激對離體灌流心房ANP分泌的影響和對心房動力學(xué)的改變
4.6 快速刺激對離體灌流心房灌流液中cGMP的影響
第五章 討論
第六章 結(jié)論
致謝
參考文獻
本文編號:3654464
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語表
第一章 前言
第二章 實驗材料
2.1. 實驗動物
2.2. 實驗試劑
2.3. 實驗儀器
第三章 實驗方法
3.1 動物模型制備
3.2 H&E染色
3.3 透射電鏡觀察
3.4 ELISA法檢測cGMP
3.5 Western Bloting法檢測心肌組織蛋白表達
3.6 血清和灌流液中ANP的測定
3.7 統(tǒng)計學(xué)分析
第四章 實驗結(jié)果
4.1 快速起搏心房家兔模型制備
4.2 快速起搏對家兔心房肌組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響
4.3 快速起搏對家兔心房超微結(jié)構(gòu)變化的影響
4.4 快速起搏對家兔心房ANP分泌及cGMP/Akt/GSK-3β的影響
4.5 快速刺激對離體灌流心房ANP分泌的影響和對心房動力學(xué)的改變
4.6 快速刺激對離體灌流心房灌流液中cGMP的影響
第五章 討論
第六章 結(jié)論
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本文編號:3654464
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