目的:探討miR-125b-5p靶向STAT3對血管內(nèi)皮細胞凋亡影響。方法:過氧化氫誘導血管內(nèi)皮細胞凋亡,qPCR法測定miR-125b-5p表達。血管內(nèi)皮細胞中轉(zhuǎn)染miR-125b-5p mimics,MTT法測定細胞活力,流式細胞術檢測細胞凋亡,Western blot檢測細胞PCNA和C-caspase-3蛋白水平。靶基因預測軟件預測STAT3與miR-125b-5p的靶向關系,熒光素酶報告系統(tǒng)鑒定靶向關系。血管內(nèi)皮細胞共轉(zhuǎn)染STAT3過表達載體及miR-125b-5p mimics,檢測細胞活力、凋亡及PCNA、C-caspase-3蛋白表達。結(jié)果:過氧化氫處理后的血管內(nèi)皮細胞中miR-125b-5p水平下降,細胞活力降低,細胞凋亡率升高,細胞PCNA蛋白表達降低,C-caspase-3蛋白表達提高。轉(zhuǎn)染miR-125b-5p mimics可提高過氧化氫條件下血管內(nèi)皮細胞活力,減少細胞凋亡,提高細胞PCNA蛋白水平,降低細胞C-caspase-3蛋白水平。miR-125b-5p靶向調(diào)控STAT3表達。STAT3過表達載體可逆轉(zhuǎn)miR-125b-5p mimics對過氧化氫誘導的... 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 qPCR測定過氧化氫處理后血管內(nèi)皮細胞miR-125b-5p水平
        1.2.2 細胞轉(zhuǎn)染和上調(diào)效果檢測
        1.2.3 MTT檢測細胞活力
        1.2.4 流式細胞術檢測細胞凋亡
        1.2.5 Western blot檢測細胞PCNA和C-caspase-3蛋白表達
        1.2.6 miR-125b-5p靶基因預測和鑒定
        1.2.7 STAT3過表達載體對上調(diào)miR-125b-5p的血管內(nèi)皮細胞活力和凋亡的影響
    1.3 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 過氧化氫誘導血管內(nèi)皮細胞miR-125b-5p表達下調(diào)
    2.2 miR-125b-5p mimics提高過氧化氫條件下血管內(nèi)皮細胞miR-125b-5p表達
    2.3 上調(diào)miR-125b-5p對過氧化氫條件下血管內(nèi)皮細胞活力和凋亡的影響
    2.4 miR-125b-5p靶向調(diào)控STAT3
    2.5 上調(diào)miR-125b-5p可降低過氧化氫條件下血管內(nèi)皮細胞STAT3蛋白表達水平
    2.6 STAT3過表達載體和miR-125b-5p mimics共轉(zhuǎn)染對過氧化氫條件下血管內(nèi)皮細胞活力、凋亡和p-STAT3、STAT3、PCNA、C-caspase-3蛋白表達的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]miR-124靶向調(diào)控STAT3調(diào)節(jié)動脈粥樣硬化中血管內(nèi)皮細胞的生物學特性[J]. 謝民,李社芳,邢海燕,謝翀.  中國老年學雜志. 2019(01)
[2]miR-128調(diào)控AK2蛋白的表達通過STAT3信號通路對宮頸癌細胞生物學行為的影響[J]. 楊林青,孫穎川.  中國免疫學雜志. 2017(12)
[3]MicroRNA在心血管疾病中的研究進展[J]. 王聰聰,張妍,徐忠偉.  武警后勤學院學報(醫(yī)學版). 2017(10)
[4]冠狀動脈粥樣硬化性心臟病患者血漿的miR-125b-5p水平與病變程度相關性初探[J]. 叢輝,儲海丹,景蓉蓉,鞠少卿,朱冰影,申嫻娟,王旭東,吳珊.  中華檢驗醫(yī)學雜志. 2017 (05)
[5]硫酸鋅對血管內(nèi)皮細胞氧化應激保護作用的研究[J]. 劉佳,李肖楠,孫思銘,王越暉.  中國免疫學雜志. 2017(02)
[6]過氧化氫處理的臍靜脈血管內(nèi)皮細胞miR-125b-5p水平降低但Smad4表達增加[J]. 魏明,甘露,楊曉梅,姜向陽,劉佳紅,陳麗宏.  細胞與分子免疫學雜志. 2016(08)
[7]酪氨酸激酶抑制劑AG490抗過氧化氫對血管內(nèi)皮細胞的保護作用及其機制[J]. 梁振興,楊陽,金振曉,易定華,段維勛,陳文生.  中華實驗外科雜志. 2014 (04)



本文編號：3651134