目的:研究鐵過載（IO）對中高危骨髓增生異常綜合征（MDS）患者骨髓間充質干細胞（BM-MSC）數(shù)量、功能的影響及其損傷的相關機制,并揭示鐵過載在促進MDS轉白中的作用;研究砷劑聯(lián)合地西他濱協(xié)同抗MDS細胞增殖、誘導細胞凋亡的作用,揭示兩藥協(xié)同誘導MDS細胞凋亡相關機制,為兩藥協(xié)同治療MDS患者提供依據(jù)。內容:選取中高危MDS患者40例（IO MDS組18例:鐵蛋白≥1000ng/ml;NIO MDS組22例:鐵蛋白<1000ng/ml）,鐵過載MDS/AML患者10例及健康對照19名。體外培養(yǎng)誘導BM-MSC,檢測IO對中高危MDS患者BM-MSC數(shù)量及功能的影響,同時檢測IO對BM-MSC內活性氧自由基（ROS）水平、凋亡率及其相關信號通路的影響,檢測抗氧化或去鐵處理對IO MDS組BM-MSC的影響。進一步探究鐵過載促進MDS轉白的相關機制。選取MDS細胞株體外培養(yǎng),檢測砷劑聯(lián)合地西他濱對MDS細胞增殖及凋亡的影響,探究內質網(wǎng)應激相關信號通路在兩藥協(xié)同抗MDS細胞中的作用。方法:第一部分鐵過載損傷中高危MDS患者BM-MSC及促進轉白的機制研究。抽取無菌骨髓分離骨髓單個核細... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市211工程院校

【文章頁數(shù)】：131 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究背景、現(xiàn)狀
    研究目的、方法
一、鐵過載對中高危MDS患者BM-MSC數(shù)量與功能的影響
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實驗對象
        1.1.2 實驗試劑
        1.1.3 實驗儀器及器材
        1.1.4 實驗方法
        1.1.5 統(tǒng)計學方法
    1.2 結果
        1.2.1 BM-MSC數(shù)量及形態(tài)
        1.2.2 BM-MSC鐵染色
        1.2.3 繪制BM-MSC增殖曲線
        1.2.4 BM-MSC成骨分化功能
        1.2.5 BM-MSC內 VEGFA及 CXCL12 基因相對表達量
        1.2.6 BM-MSC內 TGF-β1 基因表達水平及培養(yǎng)上清TGF-β1 濃度
    1.3 討論
    1.4 結論
二、鐵過載損傷中高危MDS患者BM-MSC的機制
    2.1 對象和方法
        2.1.1 實驗對象
        2.1.2 主要實驗試劑
        2.1.3 主要實驗材料、儀器
        2.1.4 實驗方法
        2.1.5 統(tǒng)計學方法
    2.2 結果
        2.2.1 BM-MSC內 ROS表達水平
        2.2.2 BM-MSC凋亡率
        2.2.3 BM-MSC內 caspase3及β-catenin基因相對表達量
        2.2.4 BM-MSC內增殖、凋亡及Wnt/β-catenin信號通路蛋白表達水平
        2.2.5 抗氧化及去鐵處理對IO MDS BM-MSC內 ROS水平的影響
        2.2.6 抗氧化及去鐵處理對IO MDS BM-MSC凋亡率的影響
        2.2.7 抗氧化及去鐵處理對IO MDS BM-MSC內 caspase3及β-catenin基因相對表達量的影響
        2.2.8 抗氧化及去鐵處理對IO MDS BM-MSC內增殖、凋亡及Wnt/β-catenin相關蛋白表達水平的影響
        2.2.9 抗氧化及去鐵處理對IO MDS BM-MSC內 VEGFA、CXCL12及TGF-β1基因相對表達量的影響
    2.3 討論
    2.4 結論
三、鐵過載促進MDS轉白的相關機制
    3.1 對象和方法
        3.1.1 實驗對象
        3.1.2 實驗試劑
        3.1.3 主要實驗儀器
        3.1.4 實驗步驟
        3.1.5 統(tǒng)計學方法
    3.2 實驗結果
        3.2.1 鐵過載對中高危MDS患者基因突變的影響
        3.2.2 IO MDS/AML組與IO MDS組 BM-MSC形態(tài)與數(shù)量比較
        3.2.3 IO MDS/AML組與IO MDS組 BM-MSC內 ROS表達水平比較
        3.2.4 IO MDS/AML組與IO MDS組 BM-MSC凋亡率比較
        3.2.5 IO MDS/AML組與IO MDS組 BM-MSC內 VEGFA、CXCL12、caspase3及β-catenin基因相對表達量比較
        3.2.6 IO MDS/AML組與IO MDS組 BM-MSC內增殖、凋亡及Wnt相關蛋白表達水平比較
    3.3 討論
    3.4 結論
四、砷劑聯(lián)合地西他濱協(xié)同抗MDS細胞增殖、誘導細胞凋亡
    4.1 對象和方法
        4.1.1 實驗對象
        4.1.2 主要實驗試劑
        4.1.3 主要實驗材料、儀器
        4.1.4 實驗方法
        4.1.5 統(tǒng)計學方法
    4.2 結果
        4.2.1 砷劑聯(lián)合地西他濱協(xié)同抗MUTZ-1 細胞增殖
        4.2.2 砷劑聯(lián)合地西他濱協(xié)同抗SKM-1 細胞增殖
        4.2.3 砷劑聯(lián)合地西他濱誘導MUTZ-1 細胞凋亡
        4.2.4 砷劑聯(lián)合地西他濱誘導SKM-1 細胞凋亡
    4.3 討論
    4.4 結論
五、砷劑聯(lián)合地西他濱協(xié)同抗MDS細胞的機制
    5.1 對象和方法
        5.1.1 實驗對象
        5.1.2 主要實驗試劑
        5.1.3 主要實驗材料、儀器
        5.1.4 實驗方法
        5.1.5 統(tǒng)計學方法
    5.2 結果
        5.2.1 RNA-sequence方法測定砷劑聯(lián)合地西他濱作用于MUTZ-1 細胞內基因變化
        5.2.2 砷劑聯(lián)合地西他濱作用于MUTZ-1 細胞內DDIT3、ATF6、GRP78、GADD34及caspase3 基因相對表達量
        5.2.3 砷劑聯(lián)合地西他濱作用于SKM-1 細胞內DDIT3、ATF6、GRP78、GADD34及caspase3 基因相對表達量
        5.2.4 砷劑聯(lián)合地西他濱作用于MUTZ-1 細胞內ROS表達水平
        5.2.5 砷劑聯(lián)合地西他濱作用于SKM-1 細胞內ROS表達水平
        5.2.6 砷劑聯(lián)合地西他濱作用于MUTZ-1 細胞內蛋白表達水平
        5.2.7 砷劑聯(lián)合地西他濱作用于SKM-1 細胞內蛋白表達水平
    5.3 討論
    5.4 結論
六、抗氧化處理對砷劑聯(lián)合地西他濱抗MDS細胞的影響
    6.1 對象和方法
        6.1.1 實驗對象
        6.1.2 主要實驗試劑
        6.1.3 主要實驗材料、儀器
        6.1.4 實驗方法
        6.1.5 統(tǒng)計學方法
    6.2 結果
        6.2.1 抗氧化處理降低砷劑聯(lián)合地西他濱誘導MUTZ-1 細胞內ROS水平
        6.2.2 抗氧化處理降低砷劑聯(lián)合地西他濱誘導SKM-1 細胞內ROS水平
        6.2.3 抗氧化處理降低砷劑聯(lián)合地西他濱誘導MUTZ-1 細胞凋亡
        6.2.4 抗氧化處理降低砷劑聯(lián)合地西他濱誘導SKM-1 細胞凋亡
        6.2.5 抗氧化處理降低砷劑聯(lián)合地西他濱作用于MUTZ-1 細胞內質網(wǎng)應激相關基因表達水平
        6.2.6 抗氧化處理降低砷劑聯(lián)合地西他濱作用于SKM-1 細胞內質網(wǎng)應激相關基因表達水平
    6.3 討論
    6.4 結論
全文結論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 鐵過載影響骨髓造血的特點及機制研究進展
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3642860