本文關鍵詞：NgBR對RAW264.7源性泡沫細胞膽固醇逆轉運的影響及機制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過轉染小干擾RNA(siRNA)沉默RAW264.7細胞源性泡沫細胞神經(jīng)軸突生長抑制因子-B受體(NgBR)表達,研究NgBR對泡沫細胞膽固醇逆轉運(RCT)的影響及機制,探索從RCT方面阻止動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的新方法,為冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的臨床預防和治療提供新的途徑和思路。方法:利用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導RAW264.7細胞使其成為荷脂細胞,再用油紅O染色從形態(tài)方面鑒定其是否為泡沫細胞。鑒定后將泡沫細胞分為4組,分別為:空白對照組(CON)、siRNA陰性對照組(NC)、NgBR-siRNA1轉染組(siNgBR-1)、NgBR-siRNA2轉染組(siNgBR-2)。利用siRNA沉默泡沫細胞NgBR基因的表達,并利用實時熒光定量PCR法(Real-time PCR)和蛋白質印記法(Western blot)分別檢測上述4組細胞表達NgBR的相對mRNA和蛋白質含量,對其進行干擾效率的鑒定。隨后采用Real-time PCR檢測以上4組細胞肝臟X受體α(LXRα)、三磷酸腺苷結合盒轉運體A1(ABCA1)、三磷酸腺苷結合轉運體G1(ABCG1)mRNA含量;Western blot檢測上述4組相應蛋白質含量;利用液體閃爍計數(shù)儀從表觀現(xiàn)象方面檢測各組細胞相應的膽固醇流出率。結果:ox-LDL成功誘導泡沫細胞形成;與CON組、NC組相比,siNgBR-1組和siNgBR-2組NgBR的mRNA和蛋白表達均明顯下調(diào)(P0.05);與CON組、NC組相比,siNgBR-1組和siNgBR-2組RCT相關基因——LXRα、ABCA1、ABCG1的mRNA及其蛋白表達顯著降低(P0.05),膽固醇流出率顯著減少(P0.05)。結論:NgBR可以增加RAW264.7細胞源性泡沫細胞膽固醇逆轉運的調(diào)控基因LXRα及其下游基因ABCA1、ABCG1的表達,促進膽固醇流出,從而減弱或者避免AS的發(fā)生和發(fā)展,為冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的臨床預防和治療提供理論依據(jù)。
【關鍵詞】：神經(jīng)軸突生長抑制因子-B受體 膽固醇逆轉運 動脈粥樣硬化 泡沫細胞
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R541.4
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 常用縮寫詞中英文對照表10-11
• 前言11-13
• 1 材料和方法13-25
• 1.1 實驗細胞13
• 1.2 實驗試劑13-14
• 1.3 實驗儀器14-15
• 1.4 主要溶液配制15-17
• 1.5 細胞培養(yǎng)17
• 1.6 泡沫細胞模型的鑒定17
• 1.7 實驗分組處理17-18
• 1.8 siRNA轉染及轉染效率的檢測18
• 1.9 RNA提取和Real-time PCR檢測各指標mRNA水平18-21
• 1.10 細胞總蛋白提取和Western-blot檢測各指標蛋白水平21-24
• 1.11 液體閃爍計數(shù)儀檢測細胞內(nèi)膽固醇流出率24
• 1.12 統(tǒng)計學分析24-25
• 2 結果25-33
• 2.1 巨噬細胞和泡沫細胞的形態(tài)25
• 2.2 泡沫細胞轉染效率的檢測25-26
• 2.3 檢測siRNA干擾目的基因表達的效果26-28
• 2.4 NgBR對RAW264.7 源性泡沫細胞膽固醇逆轉運相關基因表達的影響28-31
• 2.5 NgBR對RAW264.7 源性泡沫細胞膽固醇流出的影響31-33
• 3 討論33-37
• 4 結論37-38
• 參考文獻38-41
• 綜述41-53
• 參考文獻（綜述）49-53
• 致謝53-54
• 在學期間承擔/參與的科研課題與研究成果54-55
• 個人簡歷55

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐元根;;“泡沫”細胞[J];國外醫(yī)學情報;1982年14期

2 袁中華,楊永宗,楊小毅;平滑肌源性泡沫細胞模型的制備[J];臨床與實驗病理學雜志;1998年01期

3 戎夢瑤;朵瑞雪;朱平;王聰華;汪莉;樊春梅;王彥宏;;細胞親環(huán)素A對單核來源泡沫細胞功能的影響[J];細胞與分子免疫學雜志;2011年05期

4 黃肖耆;泡沫細胞的形態(tài)學鑒別[J];臨床檢驗雜志;1994年01期

5 崔永春;劉曉鵬;張宏;李凱;孟憲敏;唐躍;;不同階段泡沫細胞模型的建立與鑒定[J];中國分子心臟病學雜志;2014年03期

6 楊永宗，楊小毅，袁中華;消斑肽能逆轉平滑肌細胞源性泡沫細胞[J];中國動脈硬化雜志;1995年04期

7 吳鵬;劉映峰;梁東輝;陳允欽;繆緋;劉永源;;人單核源性泡沫細胞疾病模型的建立[J];中國老年學雜志;2008年12期

8 劉琳琪;王偉;劉雷;傅玉才;李玉光;;哺乳類沉默信息調(diào)節(jié)因子1激活劑可上調(diào)肝X受體α-趨化因子受體7泡沫細胞移出信號和抑制炎癥信號通路[J];汕頭大學醫(yī)學院學報;2014年01期

9 范虞琪;何奔;王彬堯;;鐵離子螯合劑去鐵胺對巨噬細胞、泡沫細胞細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子表達的影響[J];心臟雜志;2009年05期

10 袁媛;張利軍;王超;鄭鵬飛;張秀敏;葉菁;馮旭陽;;脂多糖通過自噬作用促進氧化低密度脂蛋白誘導的泡沫細胞的形成[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2014年12期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 魯艷軍;田俊;狄勇;孫自鏞;;富含甘油三酯的泡沫細胞的雙向熒光差異凝膠電泳[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術會議論文匯編[C];2011年

2 魯艷軍;田俊;狄勇;宗義強;王淳本;屈伸;;VLDL誘導THP-1形成泡沫細胞的蛋白質組學研究[A];湖北省暨武漢市生物化學與分子生物學學會第八屆第十七次學術年會論文匯編[C];2007年

3 陳燕;劉志虹;曾彩虹;黎磊石;;腎小球疾病患者腎間質泡沫細胞及其臨床意義[A];中華醫(yī)學會腎臟病學分會2006年學術年會論文集[C];2006年

4 施鴻毓;張紅旗;孫愛軍;姚康;黃榕

本文編號：361290