本文關(guān)鍵詞：NgBR對(duì)RAW264.7源性泡沫細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的影響及機(jī)制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過(guò)轉(zhuǎn)染小干擾RNA(siRNA)沉默RAW264.7細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞神經(jīng)軸突生長(zhǎng)抑制因子-B受體(NgBR)表達(dá),研究NgBR對(duì)泡沫細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)的影響及機(jī)制,探索從RCT方面阻止動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的新方法,為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的臨床預(yù)防和治療提供新的途徑和思路。方法:利用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞使其成為荷脂細(xì)胞,再用油紅O染色從形態(tài)方面鑒定其是否為泡沫細(xì)胞。鑒定后將泡沫細(xì)胞分為4組,分別為:空白對(duì)照組(CON)、siRNA陰性對(duì)照組(NC)、NgBR-siRNA1轉(zhuǎn)染組(siNgBR-1)、NgBR-siRNA2轉(zhuǎn)染組(siNgBR-2)。利用siRNA沉默泡沫細(xì)胞NgBR基因的表達(dá),并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(Real-time PCR)和蛋白質(zhì)印記法(Western blot)分別檢測(cè)上述4組細(xì)胞表達(dá)NgBR的相對(duì)mRNA和蛋白質(zhì)含量,對(duì)其進(jìn)行干擾效率的鑒定。隨后采用Real-time PCR檢測(cè)以上4組細(xì)胞肝臟X受體α(LXRα)、三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)、三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)體G1(ABCG1)mRNA含量;Western blot檢測(cè)上述4組相應(yīng)蛋白質(zhì)含量;利用液體閃爍計(jì)數(shù)儀從表觀現(xiàn)象方面檢測(cè)各組細(xì)胞相應(yīng)的膽固醇流出率。結(jié)果:ox-LDL成功誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞形成;與CON組、NC組相比,siNgBR-1組和siNgBR-2組NgBR的mRNA和蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)(P0.05);與CON組、NC組相比,siNgBR-1組和siNgBR-2組RCT相關(guān)基因——LXRα、ABCA1、ABCG1的mRNA及其蛋白表達(dá)顯著降低(P0.05),膽固醇流出率顯著減少(P0.05)。結(jié)論:NgBR可以增加RAW264.7細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)控基因LXRα及其下游基因ABCA1、ABCG1的表達(dá),促進(jìn)膽固醇流出,從而減弱或者避免AS的發(fā)生和發(fā)展,為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的臨床預(yù)防和治療提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)軸突生長(zhǎng)抑制因子-B受體 膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn) 動(dòng)脈粥樣硬化 泡沫細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R541.4
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表10-11
• 前言11-13
• 1 材料和方法13-25
• 1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑13-14
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器14-15
• 1.4 主要溶液配制15-17
• 1.5 細(xì)胞培養(yǎng)17
• 1.6 泡沫細(xì)胞模型的鑒定17
• 1.7 實(shí)驗(yàn)分組處理17-18
• 1.8 siRNA轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染效率的檢測(cè)18
• 1.9 RNA提取和Real-time PCR檢測(cè)各指標(biāo)mRNA水平18-21
• 1.10 細(xì)胞總蛋白提取和Western-blot檢測(cè)各指標(biāo)蛋白水平21-24
• 1.11 液體閃爍計(jì)數(shù)儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出率24
• 1.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析24-25
• 2 結(jié)果25-33
• 2.1 巨噬細(xì)胞和泡沫細(xì)胞的形態(tài)25
• 2.2 泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的檢測(cè)25-26
• 2.3 檢測(cè)siRNA干擾目的基因表達(dá)的效果26-28
• 2.4 NgBR對(duì)RAW264.7 源性泡沫細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因表達(dá)的影響28-31
• 2.5 NgBR對(duì)RAW264.7 源性泡沫細(xì)胞膽固醇流出的影響31-33
• 3 討論33-37
• 4 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 綜述41-53
• 參考文獻(xiàn)（綜述）49-53
• 致謝53-54
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果54-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷55

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 徐元根;;“泡沫”細(xì)胞[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);1982年14期

2 袁中華,楊永宗,楊小毅;平滑肌源性泡沫細(xì)胞模型的制備[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;1998年01期

3 戎夢(mèng)瑤;朵瑞雪;朱平;王聰華;汪莉;樊春梅;王彥宏;;細(xì)胞親環(huán)素A對(duì)單核來(lái)源泡沫細(xì)胞功能的影響[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年05期

4 黃肖耆;泡沫細(xì)胞的形態(tài)學(xué)鑒別[J];臨床檢驗(yàn)雜志;1994年01期

5 崔永春;劉曉鵬;張宏;李凱;孟憲敏;唐躍;;不同階段泡沫細(xì)胞模型的建立與鑒定[J];中國(guó)分子心臟病學(xué)雜志;2014年03期

6 楊永宗，楊小毅，袁中華;消斑肽能逆轉(zhuǎn)平滑肌細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞[J];中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志;1995年04期

7 吳鵬;劉映峰;梁東輝;陳允欽;繆緋;劉永源;;人單核源性泡沫細(xì)胞疾病模型的建立[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2008年12期

8 劉琳琪;王偉;劉雷;傅玉才;李玉光;;哺乳類(lèi)沉默信息調(diào)節(jié)因子1激活劑可上調(diào)肝X受體α-趨化因子受體7泡沫細(xì)胞移出信號(hào)和抑制炎癥信號(hào)通路[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年01期

9 范虞琪;何奔;王彬堯;;鐵離子螯合劑去鐵胺對(duì)巨噬細(xì)胞、泡沫細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子表達(dá)的影響[J];心臟雜志;2009年05期

10 袁媛;張利軍;王超;鄭鵬飛;張秀敏;葉菁;馮旭陽(yáng);;脂多糖通過(guò)自噬作用促進(jìn)氧化低密度脂蛋白誘導(dǎo)的泡沫細(xì)胞的形成[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年12期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 魯艷軍;田俊;狄勇;孫自鏞;;富含甘油三酯的泡沫細(xì)胞的雙向熒光差異凝膠電泳[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)管理專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第六屆全國(guó)臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

2 魯艷軍;田俊;狄勇;宗義強(qiáng);王淳本;屈伸;;VLDL誘導(dǎo)THP-1形成泡沫細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];湖北省暨武漢市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆第十七次學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

3 陳燕;劉志虹;曾彩虹;黎磊石;;腎小球疾病患者腎間質(zhì)泡沫細(xì)胞及其臨床意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

4 施鴻毓;張紅旗;孫愛(ài)軍;姚康;黃榕

本文編號(hào)：361290