背景:急性心肌梗死（acute myocardium infarction,AMI）是導(dǎo)致心血管疾病死亡的主要原因之一,及時(shí)干預(yù)及診斷至關(guān)重要。外泌體是由細(xì)胞分泌的小囊泡,可以參與正常生理以及心血管疾病發(fā)展的病理生理過(guò)程,其包含的內(nèi)容物如蛋白質(zhì)、脂類、mRNA和miRNA,可以代表外泌體的細(xì)胞來(lái)源并反映來(lái)源細(xì)胞的狀態(tài),不同病理?xiàng)l件下這些內(nèi)容物含量會(huì)發(fā)生變化,可作為非侵入性生物診斷標(biāo)志物。外泌體也可以作為細(xì)胞間的通訊信使,遞送大量的蛋白質(zhì)、RNA和脂質(zhì)至受體細(xì)胞,調(diào)節(jié)靶細(xì)胞功能,參與心血管疾病損傷后的組織修復(fù)和再生功能。急性心肌梗死的發(fā)生與脂質(zhì)浸潤(rùn)、內(nèi)皮損傷、炎癥反應(yīng)、斑塊破裂和血栓形成等密切相關(guān),已有研究表明NEAT1可以通過(guò)抑制下游miRNA促進(jìn)炎癥因子表達(dá)加重缺血再灌注損傷,炎癥可以促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）生成,引發(fā)急性冠脈綜合征。在腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)NEAT1促進(jìn)MMP-9分泌刺激細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲;在鼻咽癌細(xì)胞中NEAT1通過(guò)抑制miR-204間接上調(diào)ZEB1促進(jìn)上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化;miR-204還通過(guò)影響MMP-9抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲。目前關(guān)于血清外泌體lncRNA NEAT1是否會(huì)... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

外泌體的鑒定結(jié)果

第3章實(shí)驗(yàn)結(jié)果23表達(dá)倍數(shù)顯著高于對(duì)照組（2.95±2.47vs.1.00±0.75；p<0.01），也明顯高于UA組（2.95±2.47vs.1.05±0.85；p<0.01），然而對(duì)照組與UA組中的NEAT1改變倍數(shù)無(wú)明顯差異（1.00±0.75vs.1.05±0.85；p>0.05）。miR-204可以抑制細(xì)胞凋亡和炎癥，qRT-PCR檢測(cè)血清外泌體miR-204表達(dá)，檢測(cè)miR-204時(shí)外源性給予cel-miR-39作為參照，結(jié)果顯示（圖3.3此處的結(jié)果是將對(duì)照組設(shè)為1，UA組和STEMI組相比對(duì)照組改變倍數(shù)）miR-204表達(dá)倍數(shù)在STEMI組明顯低于對(duì)照組（0.64±0.40vs.1.00±0.56；p<0.01），也低于UA組（0.64±0.40vs.1.11±0.50；p<0.01），但對(duì)照組與UA組中的miR-204改變倍數(shù)無(wú)明顯差異（1.00±0.56vs.1.11±0.50；p>0.05）。MMP-9用于急性冠脈綜合征的診斷，而且可以區(qū)分不穩(wěn)定型心絞痛和急性心肌梗死，MMP-9有兩種形式：酶原形式（pro-MMP-9）和活性形式（活性MMP-9），最初MMPs常分泌為pro-MMPs形式，可被低PH、物理化學(xué)等試劑或者是其他MMPs在內(nèi)的各種蛋白酶裂解為活性形式[9]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)westernblot檢測(cè)活化的MMP-9（圖3.4A）。結(jié)果顯示（圖3.4B此處的結(jié)果是將對(duì)照組設(shè)為1，UA組和STEMI組相比對(duì)照組改變倍數(shù)）STEMI組中MMP-9表達(dá)倍數(shù)顯著高于對(duì)照組（3.58±3.17vs.1.00±0.38；p<0.01），也高于UA組（3.58±3.17vs.1.71±0.87；p<0.05），除此之外對(duì)照組與UA組中的MMP-9改變倍數(shù)也有差異性（1.00±0.38vs.1.71±0.87；p<0.05）。圖3.2對(duì)照組、UA組和STEMI組血清外泌體NEAT1表達(dá)倍數(shù)變化#代表p<0.01；

第3章實(shí)驗(yàn)結(jié)果24圖3.3對(duì)照組、UA組和STEMI組血清外泌體miR-204表達(dá)倍數(shù)變化#代表p<0.01；圖3.4對(duì)照組、UA組和STEMI組血清外泌體MMP-9表達(dá)變化（A）westernblot檢測(cè)MMP-9表達(dá)；（B）MMP-9表達(dá)倍數(shù)變化，*代表p<0.05，#代表p<0.013.4心梗組NEAT1、miR-204和MMP-9的相關(guān)性分析lncRNA作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA（ceRNA），與miRNA結(jié)合，起到miRNA海綿的作用，從而降低miRNA活性，間接上調(diào)miRNA相關(guān)靶基因表達(dá)。已有研究表明NEAT1靶向抑制miR-204，而MMP-9又是miR-204下游靶基因。因此我們采用Spearman檢測(cè)三者之間的相關(guān)性，結(jié)果顯示NEAT1與MMP-9呈正相關(guān)（r=0.320，p<0.05；圖3.5），但是NEAT1與miR-204不具有相關(guān)性（r=-0.067，p>0.05；圖3.6），miR-204與MMP-9也不具有相關(guān)性（r=-0.197，p>0.05；圖3.7）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Stem cell-derived exosomes-an emerging tool for myocardial regeneration[J]. Erzsebet Lazar,Theodora Benedek,Szilamer Korodi,Nora Rat,Jocelyn Lo,Imre Benedek.  World Journal of Stem Cells. 2018(08)
[2]細(xì)胞內(nèi)吞的研究進(jìn)展[J]. 范真真,陳虹,黃秉仁.  生命的化學(xué). 2014(04)



本文編號(hào)：3582741