發(fā)布時(shí)間：2022-01-08 00:24

　　目的研究蛋白酶體抑制劑硼替佐米（BTZ）對(duì)血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）誘導(dǎo)的ApoE基因敲除(ApoE^-/-)小鼠腹主動(dòng)脈瘤（AAA）形成的炎性機(jī)制的影響。方法 8¹0周齡雄性ApoE^-/-小鼠40只,喂養(yǎng)1周適應(yīng)后隨機(jī)分為Sham組、BTZ組、AngⅡ組和AngⅡ+BTZ組4組,每組10只。AngⅡ組采用皮下埋植AngⅡ緩釋泵[1000 ng/（min·kg）]復(fù)制動(dòng)物AAA模型,BTZ組和AngⅡ+BTZ組同時(shí)給予蛋白酶體抑制劑BTZ腹腔注射50μg/kg每周2次。28 d后取材測(cè)量統(tǒng)計(jì)腹主動(dòng)脈最大直徑及AAA發(fā)生率。采用HE染色觀察組織中炎癥反應(yīng)情況,免疫組織化學(xué)染色及流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)組織中T淋巴細(xì)胞數(shù)目,q PCR檢測(cè)組織中黏附因子（ICAM-1）的mRNA表達(dá),Western blot檢測(cè)組織中核轉(zhuǎn)錄活化因子信號(hào)通路（NF-κB）表達(dá)變化。結(jié)果 Sham組、BTZ組、AngⅡ組和AngⅡ+BTZ組小鼠的腹主動(dòng)脈最大直徑平均值分別為（1.00±0.01）、（0.99±0.01）、（1.50±... 

【文章來源】：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2017,39(01)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

各組典型的主動(dòng)脈大體照片

圖5)。討論已知特異性炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)為AAA發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在AAA發(fā)病過程中，高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化等高危因素均可誘導(dǎo)腹主動(dòng)脈壁NF-κB信號(hào)通路的激活，并通過促進(jìn)黏附因子等炎性介質(zhì)的表達(dá)介導(dǎo)AAA形成［13-14］。蛋白酶體降解泛素化標(biāo)記的p-IκB激活NF-κB信號(hào)通路表達(dá)，進(jìn)一步可促進(jìn)炎性因子、黏附因子等靶蛋白合成，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)［15］，提示蛋白酶體可能參與AAA形成。本研究采用AngⅡ誘導(dǎo)ApoE－/－小鼠AAA模型進(jìn)行研究，通過廣譜蛋白酶體抑制劑BTZ抑制組織中蛋白酶體活性，結(jié)果顯示BTZ可有效降低圖2造模28d后，ApoE－/－小鼠腹主動(dòng)脈HE染色Fig2HEstainingofabdominalaortafromApoE－/－mice28daysaftermodeling圖3造模28d后典型的小鼠腹主動(dòng)脈CD3+T淋巴細(xì)胞免疫組織化學(xué)染色Fig3ImmunohistochemicalstainingofCD3+TcellsinabdominalaortafromApoE－/－mice28daysaftermodeling

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào)124February，2017巴細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)為107.9±15.9，明顯高于Sham組的0(P=0.000)和AngⅡ+BTZ組的0.8±0.5(P=0.000)(圖3)。流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示，造模1周后，AngⅡ組組織中CD3+T淋巴細(xì)胞比例為(13.50±0.69)%，明顯高于AngⅡ+BTZ組的(10.40±0.78)%(t=3.009，P=0.040);造模4周后，AngⅡ組的CD3+T淋巴細(xì)胞比例為(22.70±0.93)%，明顯高于AngⅡ+BTZ組的(15.10±0.97)%(t=5.654，P=0.005)(圖4)。ApoE－/－小鼠腹主動(dòng)脈組織中ICAM-1的表達(dá)情況qPCＲ檢測(cè)結(jié)果顯示，Sham組、BTZ組、AngⅡ組和AngⅡ+BTZ組ICAM-1的mＲNA表達(dá)水平相比于Sham組升高比例分別為1.00±0.15、0.34±0.03、1.93±0.54和0.83±0.08(F=6.797，P=0.001)，其中，AngⅡ組明顯高于Sham組(P=0.011)和AngⅡ+BTZ組(P=0.009)。ApoE－/－小鼠腹主動(dòng)脈組織中NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)Westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示，AngⅡ組IκB磷酸化水平較Sham組和AngⅡ+BTZ組明顯減少，并伴隨p65磷酸化水平增加(圖5)。討論已知特異性炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)為AAA發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在AAA發(fā)病過程中，高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化等高危因素均可誘導(dǎo)腹主動(dòng)脈壁NF-κB信號(hào)通路的激活，并通過促進(jìn)黏附因子等炎性介質(zhì)的表達(dá)介導(dǎo)AAA形成［13-14］。蛋白酶體降解泛素化標(biāo)記的p-IκB激活NF-κB信號(hào)通路表達(dá)，進(jìn)一步可促進(jìn)炎性因子、黏附因子等靶蛋白合成，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)［15］，提示蛋白酶體可能參與AAA形成。本研究采用AngⅡ誘導(dǎo)ApoE－/－小鼠AAA模型進(jìn)行研究，通過廣譜蛋白酶體抑制劑BTZ抑制組織中蛋白酶體活性，結(jié)果顯示BTZ可有效降低圖2造模28d后，ApoE－/－小鼠腹主動(dòng)脈HE染色Fig2HEstainingofabdominalaortafromApoE－/－mice28day

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠主動(dòng)脈組織中炎性反應(yīng)細(xì)胞浸潤(rùn)的方法研究[J]. 田翠,任華亮,聶皓,王霞,江雪,李方達(dá),王紅霞.  首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(04)



本文編號(hào)：3575547