目的通過研究氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）對血管平滑肌細(xì)胞（VSMCs）脂質(zhì)沉積與細(xì)胞轉(zhuǎn)型的影響,探究轉(zhuǎn)錄因子FoxO1在ox-LDL對平滑肌細(xì)胞的調(diào)控過程的作用,觀察ox-LDL對FoxO1 DNA甲基化水平的影響,分析FoxO1啟動子區(qū)DNA甲基化對平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)沉積的機(jī)制,闡明ox-LDL經(jīng)FoxO1促進(jìn)VSMCs脂質(zhì)沉積與表型轉(zhuǎn)換的機(jī)制。方法采用平滑肌細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料,復(fù)制平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)沉積模型,先將細(xì)胞分為三組:空白對照組（0μg/ml）、ox-LDL干預(yù)組（50μg/ml、100μg/ml）,ox-LDL干預(yù)48h,油紅O染色確定模型制備成功,觀察平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)沉積情況,酶法檢測各組細(xì)胞中總膽固醇（total cholesterol,TC）和甘油三酯（triglyceride,TG）的含量;qRT-PCR和western blot檢測各組平滑肌細(xì)胞中FoxO1、smoothelin和CON1表達(dá)水平;轉(zhuǎn)染FoxO1的過表達(dá)（Ad-FoxO1）腺病毒載體,熒光顯微鏡下觀察并驗(yàn)證其轉(zhuǎn)染效率,qRT-PCR和western blot驗(yàn)證過表達(dá)FoxO1后自身的m RNA及蛋白的... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
前言
材料與方法
    1.實(shí)驗(yàn)儀器和材料
    2.試驗(yàn)方法
結(jié)果
    1.ox-LDL促進(jìn)平滑肌細(xì)胞內(nèi)膽固醇聚積
    2.ox-LDL誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化
    3.ox-LDL上調(diào)平滑肌細(xì)胞內(nèi)FoxO1的表達(dá)
    4.Ad-FoxO1腺病毒轉(zhuǎn)染平滑肌細(xì)胞后觀察轉(zhuǎn)染效率
    5.ox-LDL干預(yù)重組體Ad-FoxO1在平滑肌細(xì)胞中對自身表達(dá)影響
    6.探討 ox-LDL 經(jīng) Fox O1 對平滑肌細(xì)胞內(nèi)膽固醇聚積的影響
    7.生物信息學(xué)分析FoxO1啟動子區(qū)CPG島
    8.ox-LDL對FoxO1啟動子區(qū)甲基化的影響
    9.FoxO1甲基化對平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)沉積的影響
    10.FoxO1啟動子區(qū)DNA甲基化對平滑肌細(xì)胞表型改變的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
個(gè)人簡歷
開題、中期及學(xué)位論文答辯委員組成


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3553082