背景:肺動(dòng)脈高壓（Pulmonary artery hypertension,PAH）是一類(lèi)嚴(yán)重的心肺血管疾病,臨床麻醉風(fēng)險(xiǎn)很高。肺血管重塑和肺動(dòng)脈平滑肌的過(guò)度增殖構(gòu)成肺動(dòng)脈高壓的重要病理特征。研究提示肺動(dòng)脈平滑肌過(guò)度增殖和腫瘤存在相似性,目前細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶9（CDK9）是重要的抗腫瘤靶點(diǎn),但是CDK9在肺動(dòng)脈高壓中的作用目前尚不清楚。目的:探究肺動(dòng)脈高壓中CDK9在肺動(dòng)脈平滑肌中的表達(dá)改變及CDK9抑制劑對(duì)肺動(dòng)脈高壓中肺血管重塑和肺動(dòng)脈平滑肌過(guò)度增殖的影響及潛在分子機(jī)制。方法:采用在體肺動(dòng)脈高壓模型和體外培養(yǎng)人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（HPASMC）缺氧模型研究肺動(dòng)脈高壓肺動(dòng)脈平滑肌中CDK9的表達(dá)變化。在體實(shí)驗(yàn)采用成年雄性SD大鼠腹腔單次注射野百合堿（MCT,60mg/kg,ip）成功制作肺動(dòng)脈高壓模型。剝離正常對(duì)照組及MCT組大鼠的肺動(dòng)脈,采用RT-PCR和Western-Blot法分別檢測(cè)肺動(dòng)脈中CDK9 mRNA和蛋白表達(dá)水平。體外模型以培養(yǎng)HPASMC為研究對(duì)象,分別3%O₂,5%CO₂體外缺氧（Hypoxia）處理0、1、3、6... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MCT組大鼠肺動(dòng)脈組織中CDK9mRNA和蛋白表達(dá)水平升高

圖 2. HPASMC 在體外缺氧 24h 后 CDK9 表達(dá)上調(diào)。A：HPASMC 缺氧 24h 后 CDK9mRNA 表達(dá)統(tǒng)計(jì)結(jié)果；B：HPASMC 不同時(shí)間（0，1，3，6，12，24h）缺氧后 CDK9蛋白表達(dá)改變；C：HPASMC（0，1，3，6，12，24h）缺氧后 CDK9 蛋白表達(dá)統(tǒng)計(jì)結(jié)果 * P<0.05，n=3。2.CDK9 抑制劑 Flavopiridol 緩解野百合堿誘導(dǎo)大鼠肺動(dòng)脈高壓2.1 Flavopiridol 降低大鼠肺動(dòng)脈高壓中右心室收縮壓（RVSP）21 天肺動(dòng)脈高壓建模結(jié)束后，檢測(cè)三組大鼠 RVSP 水平，結(jié)果顯示，與 Control組相比，MCT 組大鼠 RVSP 顯著增加（35.11 ±2.32mmHg vs 17.70 ±0.46mmHg，P<0.001），使用 CDK9 抑制劑 Flavoripidol 處理后，雖未恢復(fù)至正常水平，但相較于MCT 組大鼠，右心室收縮壓有一定程度的下降（ 24.40 ± 1.28mmHg vs 35.11 ±2.32mmHg，P<0.01），肺動(dòng)脈高壓得到一定緩解。

圖3.CDK9抑制劑Flavopiridol降低大鼠肺動(dòng)脈高壓中右心室收縮壓（RVSP）。A：Control組大鼠右心室收縮壓波形；B：MCT組大鼠右心室收縮壓波形；C：MCT+Fla組大鼠右心室收縮壓波形；D：右心室收縮壓統(tǒng)計(jì)分析 ***P<0.001，**P<0.01，n=6。2.2 Flavopiridol 抑制大鼠肺動(dòng)脈高壓中右心室肥厚取三組大鼠心臟，稱(chēng)量并計(jì)算右心室肥厚指數(shù)（RV／LV+S）。如圖 4.1 所示，MCT 組大鼠與 Control 組比較，其 RV／LV+S 顯著增加（0.57 ±0.05 vs 0.27 ±0.01，P<0.01）。使用 Flavopiridol 干預(yù)后，相比于 MCT 組大鼠有一定程度的降低（0.45 ±0.03 vs 0.57 ±0.05，P<0.01）。圖 4.2 所示，大鼠心臟固定后 HE 染色，在顯微鏡下進(jìn)行觀察。三組大鼠心臟橫截面進(jìn)行比較，MCT 組大鼠心臟右心室比對(duì)照組明顯增厚，使用 Flavopiridol 后，心臟右心室厚度降低。


本文編號(hào)：3512279