發(fā)布時間：2021-11-18 21:18

　　研究背景心肌肥大被認為是心臟對于各種生理性以及病理性刺激的一種適應性改變,其特征主要包括胚胎發(fā)育標志基因的重新激活、心肌細胞體積增大、蛋白質(zhì)合成顯著升高以及收縮蛋白的種類發(fā)生相應改變等。雖然最初心肌肥大是為了滿足心臟在超負荷壓力下的需求而發(fā)生的一種代償性的生理變化,但它并不是無限度的。由于肥大的心肌需氧量逐漸增加,而冠狀動脈的供血量不足從而造成肥大部分心肌的缺血,進而造成心肌收縮功能減弱,最終導致一系列心血管疾病,因此心肌肥大被認為是誘發(fā)眾多重大心血管疾病的危險因素之一。然而目前臨床上仍缺乏有效預防方法和治療手段。因此,深入探究心肌肥大發(fā)生的分子機制,以期為臨床預防與治療提供新的理論依據(jù)。環(huán)狀RNA作為近年來一種新發(fā)現(xiàn)的非編碼RNA（ncRNA）,是真核生物中共價閉合的內(nèi)源性生物分子,具有組織特異性和細胞特異性表達模式。環(huán)狀RNA由于其獨特的環(huán)狀結構不易被核酸外切酶降解而更加穩(wěn)定,因而具有更長的半衰期。由于目前已知的某些環(huán)狀RNA在表達上比較豐富,且在進化上相對保守,而逐漸成為ncRNA領域的研究熱點。研究表明,環(huán)狀RNA主要通過吸附miRNA來調(diào)節(jié)下游靶基因的表達,也可通過調(diào)控基因轉... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖４．２?ＩＳＯ誘導對小鼠心室中ＡＮＦ和ｍｉＲ－２３ａ表達情況的影響??

?實驗結果???４１８?Ｉ?１４Ｓ４?！?１４４１?（?｜；?ｆ?＾??：?＾ｉｎ？ｒ??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｉｓｏ?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｉｓｏ??Ｃ????＾一??餐蘿．．＇?．．．．．．…＃．??圖４．?３環(huán)狀ＲＮＡ表達譜??（Ａ）兩組測序結果中環(huán)狀ＲＮＡ的維恩圖；（Ｂ?）通過將環(huán)狀ＲＮＡ序列比對到小鼠基因組??上得到其分類占比：（Ｃ）?Ｃｉｒｃｏｓ圖上顯示環(huán)狀ＲＮＡ在小鼠染色體上的分布。最外層代表??小鼠所有的染色體，每３個內(nèi)層代表同？組中每個樣品的環(huán)狀ＲＮＡ分布。Ｃｏｎｔｒｏｌ：生理鹽??水處理組，ＩＳＯ：異丙腎上腺素處理組，ｎ＝３。??４．３?ＩＳＯ誘導使心室環(huán)狀ＲＮＡ表達譜發(fā)生改變??從圖４．３的結果我們己經(jīng)知道對照組和］ＳＯ處理組小鼠心室環(huán)狀ＲＮＡ表達??譜并不是完全相同的，所以我們推測ＩＳＯ能夠影響環(huán)狀ＲＮＡ的表達。通過對兩??組共表達的１４６４個環(huán)狀ＲＮＡ進一步分析，我們發(fā)現(xiàn)在其中有１１９個環(huán)狀ＲＮＡ??表達發(fā)生了明顯的改變。結果如圖４．４Ａ所示，相比于對照組，其中的８９個環(huán)狀??ＲＮＡ發(fā)生上調(diào)，３０個環(huán)狀ＲＮＡ發(fā)生下調(diào)。隨后我們從其中挑選了一部分表達??差異比較顯著的環(huán)狀ＲＮＡ以熱圖進行展示，其結果如圖４．４Ｂ所示。綜上所述，??ＩＳＯ能夠影響心室環(huán)狀ＲＮＡ的表達。??２１??

ｌｃ３８ａ１??０）?Ｉ?Ｉ?丨護，痛！??ｃｉｒ－ｊｍｊｃＪ１ｃ??ｃｉｒ－ｋａｌｍ??ｃｉｒ－ｍｂｏａｔ２??．：＞ｉ?ｉ總．??，Ｃ＃＊Ｉ?Ｉ?４ＥｊＴ?Ｃｉｒ－ａｒｈ９ａｐ２６??？????Ｖｉ?＞ｙｖ＿?ＵＨＶ＊??［ＳＳ?ｖ??ｍ?Ｖ?Ｗ?＇?ＬｒＴＭ?—＾??？ｆ?＾?￥：＝ＰｐＰｉｃ？??〇－｜?１?＿？嚴丨?１?１?ｃｉｒ－ｎｌｎ??Ｉ＾＾ＨＩＨＨｉ?％＼ｒｒ：＾〇２??ｌｏｇ２ＦＣ?ｌｏｗ?—１＾—?ｈｉｇｈ??圖４．４異丙腎上腺素處理后差異表達的環(huán)狀ＲＮＡ??（Ａ）相比于ｃｏｎｔｒｏｌ組，ＩＳＯ處理后差異表達環(huán)狀ＲＮＡ的火山圖。ＦＣ?（Ｆｏｌｄ?ｃｈａｎｇｅｓ）為２??倍及以上并且Ｐ＜０．０５被認為是有顯著差異，顯著上調(diào)和下調(diào)的分別用紅點和綠點表示。（Ｂ）??一部分在ｃｏｎｔｒｏｌ和ＩＳＯ組中表達發(fā)生顯著變化的環(huán)狀ＲＮＡ熱圖。紅色代表上調(diào)，綠色代??表下調(diào)，表達量越高顏色越深，ｎ＝３。??４．４對環(huán)狀ＲＮＡ測序結果的驗證??接下來對ＲＮＡ－ｓｅｑ中差異表達的環(huán)狀ＲＮＡ的真實性和可靠性進行驗證，我??們挑選６個表達發(fā)生顯著變化的環(huán)狀ＲＮＡ進行驗證，它們分別是ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ??ｗｗｐｌ、ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?ｉｆｔ８１、ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?ｔｒａｐｐｃ９、ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?ｋｌｃｌ、??ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?ｓｈ３ｒｆ３?和?ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?２０７０２。為了保證環(huán)狀?ＲＮＡ?的特異性擴增，??我們對每個環(huán)狀ＲＮＡ都設計了一對ｄｉｖｅｒｇｅｎｔ?ｐｒｉｍｅｒ和一對ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ?ｐｒｉｍｅｒ，??以小鼠ｃＤＮＡ和基因組Ｄ


本文編號：3503626