腹主動脈瘤（Abdominal Aorta Aneurysm,AAA）是老齡化社會的一種常見病,一般情況下并無明顯的臨床表現(xiàn),而多以腹主動脈瘤破裂（Rupture Abdominal Aorta Aneurysm,RAAA）被發(fā)現(xiàn),且與RAAA相關(guān)的總體死亡率約為80%。高脂血癥和高血壓是AAA的兩個主要可改變的危險因素。通過皮下微泵釋放法將血管緊張素II（Angiotensin,AngII）釋放到ApoE KO小鼠已經(jīng)廣泛的運用于建立實驗性小鼠腹主動脈瘤模型。本研究旨在構(gòu)建一個新的小鼠腹主動脈瘤模型,探究其發(fā)病機制。第一部分:可控AngII表達誘導(dǎo)新型高脂血癥小鼠發(fā)生主動脈瘤利用CRISPR-Case9基因編輯技術(shù)構(gòu)建了一個包括高密度脂蛋白受體SR-BI敲除、強力霉素（Doxycycline,DOX）誘導(dǎo)AngII表達原件和脂蛋白ApoE基因缺陷的小鼠(ApoE^SA/SA)。檢測其血漿中的血脂濃度,鼠尾監(jiān)測血壓;通過對ApoE^SA/SA小鼠高脂飲食聯(lián)合DOX飲水,建立實驗性小鼠腹主動脈瘤模型;采用H&E染色,Elastin染色和免疫... 

【文章來源】：浙江師范大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

新動物模型的構(gòu)建Figure2-1:ConstructionofanewanimalmodelA：構(gòu)建動物模型的遺傳操作過程，B：培育動物模型獲得不同基因型小鼠的基因型鑒定，

圖 2-2：正常飲食或高脂飲食飼養(yǎng)小鼠血漿中的 LDL-C 和 HDL-C 的檢測Figure2-2: LDL-C/HDL-C detection in plasma of mice on Laboratory Diet or HighFad diet選取同窩 8 周齡的小鼠，10 對 WT，10 對 ApoESA/+，10 對 ApoESA/SA，與及 10 對 8 周齡ApoE KO 小鼠，分別正常飲食和高脂飲食飼養(yǎng) 4 周，分離小鼠血漿進行低密度脂蛋白（LDL-C，圖 A）和高密度脂蛋白（HDL-C，圖 B）濃度檢測，**為 P<0.01，***為P<0.001，ApoESA/SAVS. ApoE KO。由于 ApoESA/SA全身敲除 ApoE 基因，導(dǎo)致 ApoESA/SA小鼠血漿中的 LDL-C 與 ApoE KO 小鼠相近，而 ApoESA/SA的 SR-BI 下調(diào)表達，導(dǎo)致血漿中HDL-C 高于 ApoE KO 小鼠。2.1.3 血壓表型鑒定在 ApoESA/SA小鼠中，高斯熒光素酶被設(shè)置為 AngⅡ的報告基因。在小鼠正常

26圖 2-3：Dox 誘導(dǎo) ApoESA/SA小鼠的表型鑒定igure 2-3: Performance identification of ApoESA/SAmice treated with D齡雄鼠，5 只 WT，5 只 ApoESA/-，5 只 ApoESA/SA，與及 5 只同給予 Dox 水 10 天后停藥 6 天。檢測小鼠起始誘導(dǎo)前與停止誘導(dǎo)酶和血壓的變化情況。A 為鼠尾血中高斯熒光素酶含量的檢測，,*為 P<0.05，ApoESA/SAvs. WT，#為 P<0.05，ApoESA/+vs. WT。型純合子和雜合子均能被誘導(dǎo)表達 AngII,進一步誘導(dǎo)出高血壓。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]氯沙坦和卡托普利對實驗性大鼠腹主動脈瘤形成的影響[J]. 孟令勤,張志深,張強.  中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2012(14)
[2]氯沙坦預(yù)防及治療氯化鈣誘導(dǎo)的小鼠腹主動脈瘤的機制探討[J]. 閆慧敏,崔冰,陳忠,唐曉斌,楊紅振,胡卓偉.  軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊. 2010(05)



本文編號：3502982