目的:研究缺氧復氧（HR）條件下H9C2細胞中FOXO4與Chop依賴的凋亡通路的關系方法:首先建立H9C2細胞缺氧復氧模型。在缺氧復氧的情況下分步進行實驗。第一部分:FOXO4 siRNA干擾,分組為a.正常組（control）b.缺氧復氧組（HR）c.HR+陰性病毒d.HR+FOXO4-siRNA;第二部分:Chop siRNA干擾,分組為:a.HR+陰性干擾片段b.HR+Chop-siRNA;第三部分:FOXO4-siRNA+Chop-過表達質(zhì)粒,分組為a.正常組（control）b.缺氧復氧組（HR）c.HR+陰性d.HR+FOXO4-siRNA+Chop-過表達質(zhì)粒。采用TUNEL檢測凋亡情況;Western Blot檢測各組FOXO4、Chop、Cleaved-caspase3蛋白表達情況;CHIP檢測FOXO4與Chop的結合位點。結果:（1）在缺氧復氧條件下,H9C2細胞中FOXO4、Chop、Cleaved-caspase3蛋白表達較正常組明顯升高（p<0.05）,TUNEL檢測凋亡水平也明顯升高（p<0.05）。（2）沉默F(xiàn)OXO4后進行缺氧復氧處理,F... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

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【學位級別】：碩士

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慢病毒沉默F(xiàn)OXO4對缺氧復氧條件下Chop、Cleaved-caspase3蛋白表達的影響

第 3 章 結果升高，F(xiàn)OXO4-siRNA 組與 FOXO4-Negative 組相比 FOXO4、Chop、Cleaved-caspase 3 表達量明顯降低。C-D：顯示 A 的 WB 結果相對應的柱狀圖。E：顯示 B 的 WB 結果相對應的柱狀圖。*表示 HR 組與正常組相比，p＜0.05；** 表示 HR 組與正常組相比，p＜0.01；# 表示慢病毒沉默 FOXO4 缺氧復氧組與陰性病毒缺氧復氧組相比，p＜0.05；##表示表示慢病毒沉默 FOXO4 缺氧復氧組與陰性病毒缺氧復氧組相比，p＜0.01。

圖 3：轉染不同 Chop-siRNA 干擾片段對 Chop 蛋白表達的影響A：WB 結果顯示 Chop-siRNA 246 干擾使 Chop 蛋白表達最低。B：顯示 A 圖相對應的柱狀圖。**表示 Chop-siRNA 246 與正常組相比，p＜0.01;##表示 Chop-siRNA 463 與正常組相比，p＜0.01;$$ 表示 Chop-siRNA583 與正常組相比，p＜0.01。3.3 轉染 Chop-siRNA 246 干擾片段對缺氧復氧條件下 Chop 蛋白表達的影響分別轉染 Chop 陰性干擾片段、Chop-siRNA 至 H9C2 細胞內(nèi)，48 小時后進行缺氧復氧處理。圖四結果顯示轉染 siRNA 后，Chop、Cleaved-caspase3 蛋白表達量在缺氧復氧條件下較轉染 Chop 陰性干擾片段組相比明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（p＜0.01）。


本文編號：3490446