研究背景和目的急性心肌梗死（AMI）后隨之出現(xiàn)的左心功能不全和心臟衰竭,具有較高的發(fā)病率和死亡率[1]。心梗后臨床干預(yù)措施是有效地打開閉塞的血管和重建冠狀動脈血流,如血管成形術(shù)或溶栓藥物。然而,其對減輕缺血期或再灌注時的心肌損傷療效不確切。大量的研究已經(jīng)證實,線粒體酶乙醛脫氫酶-2（ALDH2）是一種參與保護(hù)心臟的關(guān)鍵酶,它通過介導(dǎo)激活醛,如乙醛和4-羥基-2-壬烯醛（4-HNE）的解毒以及硝酸甘油的生物活化（GTN）[2,3]而發(fā)揮作用。過度表達(dá)的ALDH2野生型酶可對心臟組織和心臟功能產(chǎn)生多種有益的影響。高表達(dá)的ALDH2可保護(hù)心臟免受乙醛的毒性和急性乙醇中毒所致心肌損害[4,5]。在ALDH2基因敲除小鼠中不能檢測出ALDH2的酶活性,乙醇灌胃后乙醛的水平明顯升高,因此,這種小鼠對酒精和乙醛引起的毒性和損害比野生型小鼠更敏感[6,7]。既往的實驗和臨床研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn),ALDH2惰性的人比ALDH2功能正常的人食用酒精或/和吸入乙醛有更高的風(fēng)險。ALDH2缺陷之人習(xí)慣性飲酒有較高的患癌癥的風(fēng)險[8-10]。然而,ALDH2野生型基因的具體調(diào)節(jié)機(jī)制尚不清楚。微小RNA（miRNAs）長... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３部分總ＲＮＡ?１％瓊脂糖凝膠電泳??

?第一章?ＡＬＤＨ２是ｎｉｉＲ－２８的靶基因???－ＨＴｆｆｌ??圖１－３部分總ＲＮＡ?１％瓊脂糖凝膠電泳??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?１％?ａｇｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??根據(jù)目的基因和內(nèi)參照Ｕ６的擴(kuò)張曲線，得到各自的Ｃｔ值，計算基因表達(dá)水平。??在常氧條件下，小鼠心肌細(xì)胞中內(nèi)源性ｍｉＲ－２８表達(dá)較低；乏氧培養(yǎng)后，細(xì)胞株??ｍｉＲ－２８的Ｃｔ值隨時間的延長而減小，乏氧１２ｈ時，細(xì)胞Ｃｔ值最小，此后Ｃｔ值增大。??這表明乏氧后細(xì)胞ｍＲ－２８表達(dá)增加，乏氧１２ｈ后細(xì)胞株ｍｉＲ－２８表達(dá)水ｆ最高，隨??著乏氧時間的延長ｍｉＲ－２８表達(dá)再次降低（圖卜４）。經(jīng)單因素方差分析可知，５個時??間點的ｍｉＲ－２８表達(dá)量總體有顯著差異（Ｆ＝２］?１．４１，?Ｐ＜０．０１）（表］－１?），進(jìn)－步做ＳＮＫ??多重比較發(fā)現(xiàn)，除第６小時和第２４小時的表達(dá)量無差異外，其余各個時間點之間??的表達(dá)量差異都有顯著意義（Ｐ＜〇．〇５）。而ＡＬＤＨ２的表達(dá)卻以乏氧時間依賴的方??式而降低（圖１－５）。經(jīng)單因素方差分析可知，５個時間點的ＡＬＤＨ２的表達(dá)量總體有??顯著差異（Ｆ＝１Ｉ４．４２，?Ｐ＜０．０１）（表卜２），進(jìn)一？步做ＳＮＫ多重比較發(fā)現(xiàn)，除第０小??時與其他時間的表達(dá)量差異有顯著（Ｐ＜〇．〇５）差異外，其余各個時間點之間的表??達(dá)量都無顯著性差異。??基８?ｒ??３?６?－?由??１?－?ｎ?內(nèi)??！?２?－?ｐｈ??■Ｉ?０１?門」１?．．?Ｕ．．?Ｕ?．?Ｕ?，??２?Ｏｈ?３ｈ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??圖１－４．實時定量ＲＴ－ＰＣＲ法檢測小鼠心肌細(xì)胞中ｎｕＲ－２８的表

圖１－５．實時定ｍ?ＲＴ－ＰＣＲ法檢測ＡＬＤＨ２?ｍＲＮＡ的表達(dá)??


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