目的觀察低氧條件下肺泡上皮細胞對肺動脈平滑肌細胞（PASMCs）的作用。方法首先,低氧條件下培養(yǎng)肺泡上皮細胞48 h,采用WB法檢測細胞中CX3CL1蛋白的表達,ELISA法檢測細胞上清液中CX3CL1的濃度;其次,采用Transwell小室共培養(yǎng)肺泡上皮細胞和PASMCs 48 h,采用MTT法檢測PASMCs增殖;最后利用siRNA沉默PASMCs的CX3CR1,采用MTT法檢測PASMCs增殖。結果與對照組比較,肺泡上皮細胞在低氧處理48 h后,CX3CL1蛋白表達、細胞上清液中CX3CL1濃度明顯增加（P<0.05）;與對照組相比,PASMCs與肺泡上皮細胞共培養(yǎng)48 h后,PASMCs增殖明顯增加（P<0.05）; siRNA沉默后的PASMCs與大鼠肺泡上皮細胞共培養(yǎng)48 h后,PASMCs增殖無明顯增加（P>0.05）。結論低氧條件下肺泡上皮細胞通過CX3CL1促進PASMCs增殖。 

【文章來源】：心血管病學進展. 2020,41(10)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

免疫熒光大鼠肺動脈平滑肌細胞(×400)

無菌條件下，用10%水合氯醛1 m L麻醉SD大鼠，切開主支氣管，用注射器吸50 m L磷酸鹽平衡生理鹽水灌注肺，直至肺變白，分離肺組織，并將肺組織切成1 mm3片段后放入含血清培養(yǎng)基中。震蕩離心過濾后，將肺組織接種于Ig G包被一次性無菌培養(yǎng)基中，孵育2 h。離心后取上清液，收集細胞接種于6孔培養(yǎng)板上，放入培養(yǎng)箱。采用AECs特異性抗體抗(表面活性物質相關蛋白C) SFTPC進行免疫熒光染色，胞漿呈現(xiàn)綠色熒光(圖2)。1.2.3 Western印跡法檢測細胞CX3CR1含量

本實驗選取2～3代AECs，分別于常氧與低氧環(huán)境下培養(yǎng)48 h，采用WB檢測AECs CX3CL1表達量，采用ELISA法檢測培養(yǎng)上清液CX3CL1含量。與常氧組比較，大鼠AECs經(jīng)低氧處理48 h后，CX3CL1蛋白表達、細胞上清液中CX3CL1濃度明顯增加(圖3)。2.4 大鼠AECs對PASMCs增殖有影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]活性氧對高原性肺動脈高壓的影響[J]. 張國振,何慶.  心血管病學進展. 2018(04)
[2]FKN濃度對人臍靜脈內(nèi)皮細胞中CX3CR1表達的影響[J]. 王領,趙一蔚,任培樂,劉蕾娜,楊盼,李靜,雷冬玉,聶永梅.  新疆醫(yī)科大學學報. 2018(04)
[3]低氧對大鼠肺動脈平滑肌細胞和肺微血管內(nèi)皮細胞表達及分泌fractalkine的影響[J]. 陳小菊,程德云,樊莉莉.  四川大學學報(醫(yī)學版). 2012(05)

博士論文
[1]肺泡上皮細胞在低氧性肺動脈高壓中的作用及機制研究[D]. 王艷霞.中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學 2018



本文編號：3464714