目的觀察低氧條件下肺泡上皮細(xì)胞對(duì)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（PASMCs）的作用。方法首先,低氧條件下培養(yǎng)肺泡上皮細(xì)胞48 h,采用WB法檢測(cè)細(xì)胞中CX3CL1蛋白的表達(dá),ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液中CX3CL1的濃度;其次,采用Transwell小室共培養(yǎng)肺泡上皮細(xì)胞和PASMCs 48 h,采用MTT法檢測(cè)PASMCs增殖;最后利用siRNA沉默PASMCs的CX3CR1,采用MTT法檢測(cè)PASMCs增殖。結(jié)果與對(duì)照組比較,肺泡上皮細(xì)胞在低氧處理48 h后,CX3CL1蛋白表達(dá)、細(xì)胞上清液中CX3CL1濃度明顯增加（P<0.05）;與對(duì)照組相比,PASMCs與肺泡上皮細(xì)胞共培養(yǎng)48 h后,PASMCs增殖明顯增加（P<0.05）; siRNA沉默后的PASMCs與大鼠肺泡上皮細(xì)胞共培養(yǎng)48 h后,PASMCs增殖無(wú)明顯增加（P>0.05）。結(jié)論低氧條件下肺泡上皮細(xì)胞通過(guò)CX3CL1促進(jìn)PASMCs增殖。 

【文章來(lái)源】：心血管病學(xué)進(jìn)展. 2020,41(10)

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【部分圖文】：

免疫熒光大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(×400)

無(wú)菌條件下，用10%水合氯醛1 m L麻醉SD大鼠，切開(kāi)主支氣管，用注射器吸50 m L磷酸鹽平衡生理鹽水灌注肺，直至肺變白，分離肺組織，并將肺組織切成1 mm3片段后放入含血清培養(yǎng)基中。震蕩離心過(guò)濾后，將肺組織接種于Ig G包被一次性無(wú)菌培養(yǎng)基中，孵育2 h。離心后取上清液，收集細(xì)胞接種于6孔培養(yǎng)板上，放入培養(yǎng)箱。采用AECs特異性抗體抗(表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C) SFTPC進(jìn)行免疫熒光染色，胞漿呈現(xiàn)綠色熒光(圖2)。1.2.3 Western印跡法檢測(cè)細(xì)胞CX3CR1含量

本實(shí)驗(yàn)選取2～3代AECs，分別于常氧與低氧環(huán)境下培養(yǎng)48 h，采用WB檢測(cè)AECs CX3CL1表達(dá)量，采用ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清液CX3CL1含量。與常氧組比較，大鼠AECs經(jīng)低氧處理48 h后，CX3CL1蛋白表達(dá)、細(xì)胞上清液中CX3CL1濃度明顯增加(圖3)。2.4 大鼠AECs對(duì)PASMCs增殖有影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]活性氧對(duì)高原性肺動(dòng)脈高壓的影響[J]. 張國(guó)振,何慶.  心血管病學(xué)進(jìn)展. 2018(04)
[2]FKN濃度對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中CX3CR1表達(dá)的影響[J]. 王領(lǐng),趙一蔚,任培樂(lè),劉蕾娜,楊盼,李靜,雷冬玉,聶永梅.  新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(04)
[3]低氧對(duì)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞和肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)及分泌fractalkine的影響[J]. 陳小菊,程德云,樊莉莉.  四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(05)

博士論文
[1]肺泡上皮細(xì)胞在低氧性肺動(dòng)脈高壓中的作用及機(jī)制研究[D]. 王艷霞.中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué) 2018



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