一、研究背景傳統(tǒng)觀念認(rèn)為高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心臟病（冠心�。┑谋Ｗo(hù)因素,因此HDL-C成為降低心血管事件風(fēng)險(xiǎn)的研究熱點(diǎn)。目前臨床及相關(guān)研究,尤其是藥物臨床試驗(yàn),大多以血漿HDL-C水平作為研究對(duì)象和評(píng)價(jià)指標(biāo),然而單純血漿HDL-C水平難以反應(yīng)其膽固醇的逆轉(zhuǎn)運(yùn)、抗炎、抗氧化、保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞、抑制血栓形成等多效性功能。HDL-C組成具有明顯的異質(zhì)性,其中蛋白質(zhì)成分是其多效性功能的主要承擔(dān)者,如載脂蛋白A （apoA-I）是膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)功能的主體,抗氧化功能主要與對(duì)氧磷酶（PON-1）活性有關(guān)等。因此,有必要對(duì)HDL中發(fā)揮重要生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)組分進(jìn)行研究。研究報(bào)道,炎性狀態(tài)下HDL蛋白組成顯著改變,促炎蛋白如血清淀粉酶A （SAA）、補(bǔ)體C3等含量明顯升高,使HDL喪失保護(hù)功能向促動(dòng)脈粥樣硬化方向發(fā)展。既往研究證實(shí),冠心病患者HDL的逆轉(zhuǎn)運(yùn)功能受損、抗炎能力降低。而冠心病狀態(tài)下HDL蛋白質(zhì)組分變化研究尚少,而且蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法不同、結(jié)果差異較大,較大樣本量研究更少。本實(shí)驗(yàn)室前期應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)iTRAQ技術(shù)篩選出冠心病組與非冠心病組HDL中13種差異表達(dá)蛋白。... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

超速離心后血菜內(nèi)脂蛋白的分布

說明本研究超速離心法分離HDL無LDL、VLDL的污染；2.2用SDS-PAGE電泳鑒定HDL的純度（圖2)。與血衆(zhòng)樣品比較，HDL樣品泳道內(nèi)沒有白蛋白等高豐度蛋白（72 KD附近），HDL主要成分apoA-I的區(qū)域（約30KD)蛋白明顯富集，說明超速離心法提取血架中的HDL能有效去除白蛋白等血架高豐度蛋白的污染。Marker HDL serum I I t80KD —^30KD 圖2 超速離心HDL及血裝的SDS-PAGE電泳3. ELISA法測(cè)定HDL及血獎(jiǎng)中apoC-1、SAA和補(bǔ)體C53.1圖3-5為檢測(cè)HDL樣品中的apoC-I、SAA和補(bǔ)體C5時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)均為1.00，提示ELISA檢測(cè)過程中所測(cè)樣品的濃度可信度非常高。34

ACS組和SCAD組顯著高于對(duì)照組(P〈0.05),且ACS組顯著高于SCAD組（P〈0.05),三組間log(HDL-SAA)均數(shù)分布趨勢(shì)見圖7，提示HDL-SAA可能與急性反應(yīng)及疾病的進(jìn)展有關(guān)。血裝HDL中補(bǔ)體C5水平（HDL-C5)：三組間log(HDL-C5)水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 CP =0.872)。表2.三組之間HDL樣品屮apoOI和SAA的濃度比較(x土 SD) 對(duì)照組 SCAD組 ACS組變量P值(n =120) (n =65) (n =115)HDL-apoC-I (ng/mL) 45.18±7.42'^-^' 37.4± 10.33^'' 36.08±9.96^' <0.001log[HDL-SAA (ng/mL)] 1.16±0.38'''''' 1.32±0.43^'''''' LSSiO-eO*"'?' <0.001log[HDL-C5 (ng/mL)] 2.46±0.69 2.38±0.59 2.44±0.65 0.872備注：進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)示，SAA和補(bǔ)體C5呈偏態(tài)分布，對(duì)二者進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后呈正態(tài)分布，采用ANOVA檢驗(yàn)。abp<0.05，SCAD組與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；a=p<0.05，ACS組與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；bep<0.05, SCAD組與ACS組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]血清淀粉樣蛋白A與慢性疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 宋春華,穆云,馬駿,鄭芳.  中華老年醫(yī)學(xué)雜志. 2011 (09)
[2]實(shí)驗(yàn)性早期心肌缺血補(bǔ)體C5的免疫組織化學(xué)研究[J]. 胡丙杰,陳玉川,祝家鎮(zhèn),畢啟明,李杰,曾家樂.  中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2000(04)



本文編號(hào)：3442112