p16甲基化在阿托伐他汀抑制VSMCs增殖遷移中的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時間:2021-10-07 10:21
第一部分p16對阿托伐他汀抑制VSMCs增殖遷移作用的影響目的:研究阿托伐他汀對血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖遷移及凋亡的作用,以及p16在其中發(fā)揮的作用。方法:原代培養(yǎng)大鼠主動脈VSMCs并進(jìn)行免疫熒光鑒定;以不同濃度阿托伐他。0、0.5、1.0、2.0μM)干預(yù)VSMCs,CCK-8檢測阿托伐他汀對VSMCs增殖的作用;Transwell小室檢測阿托伐他汀對VSMCs遷移的作用;Annexin-V/PI雙染色法檢測阿托伐他汀對VSMCs凋亡的作用;q-PCR及Western blot檢測阿托伐他汀對p16、p53表達(dá)的影響;用短發(fā)夾RNA(sh RNA)沉默p16基因,觀察p16介導(dǎo)阿托伐他汀對VSMCs增殖遷移的影響。結(jié)果:(1)與對照組相比,阿托伐他汀以濃度依賴性方式抑制VSMCs增殖遷移(P<0.05);(2)與對照組相比,阿托伐他汀以濃度依賴性方式促進(jìn)VSMCs凋亡,并上調(diào)p53蛋白表達(dá);(3)與對照組相比,阿托伐他汀以濃度和時間依賴性方式上調(diào)p16 m RNA及蛋白表達(dá)(P<0.05);(4)沉默p...
【文章來源】:東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:102 頁
【學(xué)位級別】:博士
【圖文】:
大鼠主動脈VSMCs原代培養(yǎng):7天后細(xì)胞爬出(×200)
圖 1-2:顯微鏡下大鼠主動脈 VSMCs 形態(tài),呈“谷峰”狀生長(×200)。三、免疫熒光鑒定α-SM actin 是 VSMC 的標(biāo)志性分子,第 3 代 VSMC 經(jīng)免疫熒光染色后,使用熒光顯微鏡觀察,使用熒光顯微鏡觀察發(fā)出綠色熒光的 SM α-actin 沿縱軸呈肌絲狀排列于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),細(xì)胞核藍(lán)染,陽性細(xì)胞達(dá) 95%以上,表明細(xì)胞純度較高(圖1-3)。
免疫熒光檢測SMα-actin在VSMC中的表達(dá),標(biāo)尺20μm
本文編號:3421863
【文章來源】:東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:102 頁
【學(xué)位級別】:博士
【圖文】:
大鼠主動脈VSMCs原代培養(yǎng):7天后細(xì)胞爬出(×200)
圖 1-2:顯微鏡下大鼠主動脈 VSMCs 形態(tài),呈“谷峰”狀生長(×200)。三、免疫熒光鑒定α-SM actin 是 VSMC 的標(biāo)志性分子,第 3 代 VSMC 經(jīng)免疫熒光染色后,使用熒光顯微鏡觀察,使用熒光顯微鏡觀察發(fā)出綠色熒光的 SM α-actin 沿縱軸呈肌絲狀排列于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),細(xì)胞核藍(lán)染,陽性細(xì)胞達(dá) 95%以上,表明細(xì)胞純度較高(圖1-3)。
免疫熒光檢測SMα-actin在VSMC中的表達(dá),標(biāo)尺20μm
本文編號:3421863
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