發(fā)布時(shí)間：2021-10-06 15:57

　　目的:研究自噬在同型半胱氨酸（Homocysteine,HCY）誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）衰老中的作用。方法:分離原代HUVECs,體外培養(yǎng)傳代,分組如下,第一部分:對(duì)照組（control）,HCY組（濃度為25uM,100uM,500uM）,5g/L D-半乳糖組,干預(yù)24h;第二部分:對(duì)照組,25uM HCY分別干預(yù)24h,36h,48h;第三部分:對(duì)照組,500uM HCY組,500uM HCY+100uM3-MA組,500uM HCY+5.5nM雷帕霉素組,DMSO對(duì)照組,干預(yù)24h。CCK-8試劑盒、細(xì)胞周期試劑盒、活性氧ROS試劑盒、細(xì)胞SA-β-Gal染色試劑盒、Stub-RFPSens-GFP-LC3自噬慢病毒轉(zhuǎn)染分別檢測細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞周期、細(xì)胞內(nèi)ROS、細(xì)胞SA-β-Gal染色、細(xì)胞自噬變化情況。結(jié)果:體外培養(yǎng)HUVECs,HCY以濃度及時(shí)間依賴方式抑制細(xì)胞增殖活性及細(xì)胞周期,增加細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生,增加細(xì)胞SA-β-Gal染色,增加細(xì)胞自噬點(diǎn)數(shù)（P<0.05）,D-半乳糖... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

原代內(nèi)皮細(xì)胞

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10注：與正常對(duì)照組比較，*P<0.05圖2細(xì)胞增殖率隨HCY濃度及D-半乳糖變化圖（n=3,sx）Fig.2cellproliferateratechangewithconcentrationofHCYandD-galactose（n=3,sx）注：與正常對(duì)照組比較，*P<0.05圖3細(xì)胞增殖活性隨HCY作用時(shí)間變化圖（n=3,sx）Fig.3cellproliferateratechangewithinterventiontimeofHCY（n=3,sx）注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05，500uMHCY組與500uMHCY+雷帕霉素組比較+P<0.05，500uMHCY組與500uMHCY+3-MA組比較#P<0.05圖4.500uMHCY及3-MA、雷帕霉素作用下細(xì)胞增值活性變化圖（n=3,sx）Fig.4cellproliferateratechangewithinterventionof500uMHCY,3-MAandrapamycin（n=3,sx）

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10注：與正常對(duì)照組比較，*P<0.05圖2細(xì)胞增殖率隨HCY濃度及D-半乳糖變化圖（n=3,sx）Fig.2cellproliferateratechangewithconcentrationofHCYandD-galactose（n=3,sx）注：與正常對(duì)照組比較，*P<0.05圖3細(xì)胞增殖活性隨HCY作用時(shí)間變化圖（n=3,sx）Fig.3cellproliferateratechangewithinterventiontimeofHCY（n=3,sx）注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05，500uMHCY組與500uMHCY+雷帕霉素組比較+P<0.05，500uMHCY組與500uMHCY+3-MA組比較#P<0.05圖4.500uMHCY及3-MA、雷帕霉素作用下細(xì)胞增值活性變化圖（n=3,sx）Fig.4cellproliferateratechangewithinterventionof500uMHCY,3-MAandrapamycin（n=3,sx）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]硝化應(yīng)激參與同型半胱氨酸誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬降低[J]. 周藝,嚴(yán)文靜,甄攀攀,張賞月,王雯.  中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志. 2018(06)
[2]自噬促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)制性衰老過程中衰老相關(guān)基因表達(dá)[J]. 吳尚蓉,鄭勇,卓儒紅,何柳,胡成俊.  中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2018(01)
[3]高同型半胱氨酸血癥相關(guān)疾病診治[J]. 孟曉冬,劉燕.  中國老年學(xué)雜志. 2017(23)
[4]幾種常見細(xì)胞衰老檢測指標(biāo)的比較[J]. 張譯元,肖芳.  中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2017(04)
[5]自噬流的檢測方法[J]. 呂曉希,胡卓偉.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2016(01)
[6]Vascular endothelial dysfunction and pharmacological treatment[J]. Jin Bo Su.  World Journal of Cardiology. 2015(11)
[7]血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用[J]. 周彬,黃巧冰.  廣東醫(yī)學(xué). 2013(19)
[8]同型半胱氨酸對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞自噬的影響及其意義[J]. 劉建蘭,張東紅,朱毅.  中國病理生理雜志. 2012(11)
[9]同型半胱氨酸加速內(nèi)皮衰老的機(jī)制研究[J]. 張東紅,劉建蘭,朱毅.  中國病理生理雜志. 2012(11)

博士論文
[1]西格列汀通過抑制自噬過程改善高糖造成的血管內(nèi)皮損傷[D]. 常鑫淼.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2019
[2]STAT3/mTOR調(diào)控的自噬在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)人腎小球系膜細(xì)胞衰老中的作用及機(jī)制[D]. 楊爽.中國醫(yī)科大學(xué) 2018

碩士論文
[1]硫化氫上調(diào)SIRT1改善自噬流拮抗高糖誘導(dǎo)的HT22細(xì)胞衰老[D]. 陳穎.南華大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3420324