目的本研究通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將重組質(zhì)粒p CMV3-C-Apo J、空質(zhì)粒p CMV3-C--CV,分別轉(zhuǎn)染大鼠血管平滑肌細(xì)胞,并檢測(cè)載脂蛋白J（Apolipoprotein J,Apo J）在其中的表達(dá),觀察Apo J過表達(dá)對(duì)大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖及遷移的影響,研究Apo J與再狹窄的關(guān)系及其可能導(dǎo)致再狹窄的機(jī)制。方法體外培養(yǎng)大鼠血管平滑肌細(xì)胞（USMC）,利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將重組質(zhì)粒p CMV3-C-Apo J、空質(zhì)粒p CMV3-C--CV分別轉(zhuǎn)染USMC。設(shè)置Apo J組、Control組。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染USMC 48小時(shí)后,在熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白表達(dá)情況,利用RIPA細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞,收集細(xì)胞蛋白,利用蛋白免疫印跡法（Western Blot,WB）檢測(cè)載脂蛋白J（Apo J）、載脂蛋白E受體2（apolipoprotein E receptor2,Apo ER2）、極低密度脂蛋白受體（very low density lipoprotein receptor,VLDLR）表達(dá)情況。利用Cell Counting Kit-8（CCK-8試劑盒）分別檢測(cè)質(zhì)粒p CMV3-C-A... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

空質(zhì)粒pCMV3-C-GFPSpark-CV限制酶切圖譜

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 二、結(jié)果二、結(jié)果1. 利用脂質(zhì)體法將質(zhì)粒轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的大鼠血管平滑肌細(xì)胞利用脂質(zhì)體法將質(zhì)粒 pCMV3-C-ApoJ 和空質(zhì)粒 pCMV3-C-CV 轉(zhuǎn)染大鼠血管平滑肌細(xì)胞(USMC)48 小時(shí)后，于倒置熒光顯微鏡下觀察，綠色熒光在兩組較多的大鼠血管平滑肌細(xì)胞中均能看到。發(fā)現(xiàn)綠色熒光主要在生長(zhǎng)情況較好、處于分裂狀態(tài)、折光性強(qiáng)的細(xì)胞中可觀察到，并且明暗不均的綠色熒光提示外源性基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞后的拷貝數(shù)存在一定的差異。

載脂蛋白J的表達(dá)情況

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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