目的本研究通過脂質體轉染法將重組質粒p CMV3-C-Apo J、空質粒p CMV3-C--CV,分別轉染大鼠血管平滑肌細胞,并檢測載脂蛋白J（Apolipoprotein J,Apo J）在其中的表達,觀察Apo J過表達對大鼠血管平滑肌細胞增殖及遷移的影響,研究Apo J與再狹窄的關系及其可能導致再狹窄的機制。方法體外培養(yǎng)大鼠血管平滑肌細胞（USMC）,利用脂質體轉染法將重組質粒p CMV3-C-Apo J、空質粒p CMV3-C--CV分別轉染USMC。設置Apo J組、Control組。質粒轉染USMC 48小時后,在熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白表達情況,利用RIPA細胞裂解液裂解細胞,收集細胞蛋白,利用蛋白免疫印跡法（Western Blot,WB）檢測載脂蛋白J（Apo J）、載脂蛋白E受體2（apolipoprotein E receptor2,Apo ER2）、極低密度脂蛋白受體（very low density lipoprotein receptor,VLDLR）表達情況。利用Cell Counting Kit-8（CCK-8試劑盒）分別檢測質粒p CMV3-C-A... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

空質粒pCMV3-C-GFPSpark-CV限制酶切圖譜

天津醫(yī)科大學碩士學位論文 二、結果二、結果1. 利用脂質體法將質粒轉入體外培養(yǎng)的大鼠血管平滑肌細胞利用脂質體法將質粒 pCMV3-C-ApoJ 和空質粒 pCMV3-C-CV 轉染大鼠血管平滑肌細胞(USMC)48 小時后，于倒置熒光顯微鏡下觀察，綠色熒光在兩組較多的大鼠血管平滑肌細胞中均能看到。發(fā)現(xiàn)綠色熒光主要在生長情況較好、處于分裂狀態(tài)、折光性強的細胞中可觀察到，并且明暗不均的綠色熒光提示外源性基因轉入細胞后的拷貝數(shù)存在一定的差異。

載脂蛋白J的表達情況

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3413986