【目的】探討α-微管蛋白（TUBA1A）基因在不同惡性血液病患者骨髓細(xì)胞中的表達(dá)情況及其差異，分析其在惡性血液病中的表達(dá)特點及其意義�！痉椒ā�1.收集我院門診及住院5種初治惡性血液病79例患者為實驗組，其中急性淋巴細(xì)胞白血�。ˋLL）16例，急性髓細(xì)胞白血病（AML）18例，慢性淋巴細(xì)胞白血病（CLL）10例，慢性粒細(xì)胞白血病-慢性期（CML-CP）15例，多發(fā)性骨髓瘤（MM）20例，取患者骨髓2ml分別置于加有EDTA抗凝劑的試管中混勻，同時收集輕-中度缺鐵性貧血（IDA）患者20例骨髓液各2ml作為對照組，對照組已經(jīng)排除合并其它惡性腫瘤；2.用淋巴細(xì)胞分離液分離提取骨髓單個核細(xì)胞；3.免疫印跡法（Western Blot）檢測5種惡性血液病患者及對照組骨髓細(xì)胞中TUBA1A基因蛋白的表達(dá)水平，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。4.逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法（RT-PCR）檢測5種惡性血液病患者及對照組骨髓細(xì)胞中TUBA1A基因mRNA的表達(dá)水平，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。5.熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）對5種惡性血液病患者及對照組骨髓細(xì)胞的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增，分析TUBA1A基因的表達(dá)水平。【結(jié)果】1.... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

種惡性血液病與對照組相比TUBA1A基因蛋白表達(dá)的情況

18圖2: 5種惡性血液病與對照組相比 TUBA1A 基因蛋白表達(dá)的情況。注:*: MM、AML、ALL 組與對照組比較 (P<0.05) ；#:CLL、CML-CP 組與對照組比較 (P＞ 0.05) ；二、RT-PCR 法檢測 5 種惡性血液病中 TUBA1A 基因 mRNA 的表達(dá)骨髓細(xì)胞表達(dá)的 TUBA1A 基因 mRNA 的目的條帶是 180bp ，內(nèi)參GAPDH 目的條帶是 427bp。TUBA1A 基因 mRNA 表達(dá)的判斷標(biāo)準(zhǔn)：以 TUBA1A基因 mRNA 與 GAPDH 的灰度比值評價,比值越高, PCR 產(chǎn)物越多。RT-PCR 法顯示：ALL 組、AML 組、MM 組與對照組相比，TUBA1A 基因 mRNA 與內(nèi)參 GAPDH 條帶灰度比值分別為：0.69±0.02 、0.67±0.03 、0.74±0.02 與對照組 0.32±0.02 相比，方差齊性檢驗后其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義( P ＜ 0.05 )。其中 MM 組條帶最深，對照組最淺， ALL 組、AML 組居中，提示 TUBA1A 基因蛋白在 MM 組表達(dá)最高，對照組表達(dá)最低。 CLL 組、CML-CP 組與對照組相比， TUBA1A 基因 mRNA 與內(nèi)參 GAPDH 條帶灰度比值分別為：0.42±0.03、0.37±0.01 與對照組 0.32±0.02 相比

圖 3: 5 種惡性血液病組與對照組相比 TUBA1A 基因 mRNA 表達(dá)的情況注:M:Maker;1:ALL 組；2:AML 組；3:CML(CP)組；4:CLL 組；5:MM 組；6:對照組。


本文編號：3388608