背景心肌梗死（myocardial infarction,MI）可導致大量的心肌細胞死亡和心室重塑。由于心肌再生能力十分有限,細胞移植療法為心臟疾病治療帶來新的曙光。目前間充質干細胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是細胞治療研究熱點。CD73、CD105和CD90是MSCs顯性標記分子,但CD73分子在心肌損傷細胞治療中的作用鮮有報道。細胞移植治療心肌損傷時不僅關注于細胞替代和內分泌機制,同時應當高度重視移植細胞對心肌微環(huán)境的免疫調控作用。CD73+脂肪間充質干細胞（adiposetissue derived mesenchymal stem cells,ADMSCs）治療心肌梗死是否參與了免疫調控?亟待我們探討,全面分析CD73+ADMSCs治療心肌損傷的機制,為臨床開發(fā)利用CD73+細胞提供理論和實驗依據(jù),給MSCs治療心肌損傷等疾病提供篩選細胞的分子參考標準。目的1.探討人ADMSCs治療心肌損傷時是否存在CD73/腺苷軸。2.評價CD73+ADMSCs移植治療心肌梗死的療效,探討人ADMSCs是否通過CD73/腺苷軸發(fā)揮免疫調控作用促進梗死心肌修復。方... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院河南省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

6和P9ADMSCs，倒置熒光顯微鏡注：A第6代ADMSCs，B第9代ADMSCs，CGFP標記空載病毒轉染ADMSCs，DGFP標記CD73干擾病毒轉染ADMSCs，標尺：100μm

新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩士學位論文242.人ADMSCs流式細胞術檢測免疫表型流式細胞術檢測顯示，第9代人ADMSCs高表達CD29、CD44、CD73、CD90和CD105，表達率均在95%以上，低表達CD45，表達率為0.62%(圖2)。AFITCPEAPCPerCP-Cy5.5FITCPEBCD29CD44CD73CD90CD105CD45圖2P9代ADMSCs表面標記CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD45表達，流式細胞術。注：A對照組，B實驗組Fig2TheexpressionofCD29,CD44,CD73,CD90,CD105andCD45markedonthesurfaceofADMSCsinP9generation,Flowcytometry.Note:AControlgroup，BExperimentalgroup3.抑制人ADMSCs中CD73的表達CD73siRNA轉染人ADMSCs，感染復數(shù)(MOI)值為10，轉染結束后，48h時可觀察到較弱熒光，72h時看到的熒光最強。Westernblotting和Real-timePCR檢測結果顯示：CD73蛋白與基因表達均下降，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.001）（圖3、4）。

新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩士學位論文25圖3CD73蛋白在各組中的表達,Westernblotting注：ADMSCs+LV是空載病毒組，ADMSCs+CD73siRNA是CD73表達干擾組，與空載病毒組相比，***P＜0.001。Figure3ExpressionofCD73proteinineachgroup,WesternblottingNote:ADMSCs+LVgroupwasno-loadvirusgroup,ADMSCs+CD73siRNAgroupwasCD73expressioninterferencegroup,comparedwiththeno-loadvirusgroup,***P<0.001.

【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同來源間充質干細胞表面標記的比較[J]. 杜志朋,殷國田,李苗苗,郭志坤,李瓊.  解剖學報. 2019(05)
[2]CD73對骨髓間充質干細胞增殖與衰老的影響[J]. 王琰,李瓊,張三林,郭志坤.  解剖學報. 2017(06)
[3]Assessment of left ventricular segmental function after autologous bone marrow stem cells transplantation in patients with acute myocardial infarction by tissue tracking and strain imaging[J]. RUAN Wen, PAN Cui-zhen, HUANG Guo-qian, LI Yan-lin, GE Jun-bo and SHU Xian-hong Department of Cardiology, Zhongshan Hospital of Fudan University, Shanghai 200032, China.  Chinese Medical Journal. 2005(14)



本文編號：3350159