小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞SCA-1+CD45+CD31+亞群向心肌樣細(xì)胞分化機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-10 03:22
第一部分促心肌分化基因篩選目的:對(duì)SCA-1+CD45+CD31+、SCA-1+CD45+CD31-、 SCA-1+CD45-CD31+、SCA-1+CD45-CD31-四個(gè)亞群基因芯片結(jié)果通過(guò)Real-timePCR篩選出在SCA-1+CD45+CD31+亞群表達(dá)最高的基因方法:根據(jù)基因芯片結(jié)果篩選出在SCA-1+CD45+CD31+亞群表達(dá)量最高的基因,包括myl3、Itga4、Epor、Rock2、Cxadr、設(shè)計(jì)引物。提取SCA-1+CD45+CD31+、SCA-1+CD45+CD31-、SCA-1+CD45-CD31+、SCA-1+CD45-CD31-四組亞群細(xì)胞及未分選群細(xì)胞的RNA,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,進(jìn)行Real-timePCR檢測(cè)各基因在四組亞群及未分選群細(xì)胞中的表達(dá)量。結(jié)果:經(jīng)Real-timePCR檢測(cè), Itga4在未分選組中表達(dá)最高、 Epor在SCA-1+CD45-CD31+亞群中表達(dá)最高、Rock2在SCA-1+CD45-CD31-亞群中表達(dá)最高、Cxadr在SCA-1+CD45-CD31-亞群中表達(dá)最高,myl3在SCA-1+CD45+CD31+亞群中表達(dá)...
【文章來(lái)源】:蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:155 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
背景
參考文獻(xiàn)
第一部分 促心肌分化基因篩選
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
參考文獻(xiàn)
第二部分 小鼠心肌梗死模型建立
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
參考文獻(xiàn)
第三部分 myl3 促進(jìn)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的體外研究
第一節(jié) 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、小結(jié)
第二節(jié) 轉(zhuǎn)染 myl3-siRNA 檢測(cè)心肌特異性因子表達(dá)
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
第三節(jié) 構(gòu)建過(guò)表達(dá) myl3 質(zhì)粒
目的
一、材料
二、實(shí)驗(yàn)步驟
三、方法
四、結(jié)果
第四節(jié) 轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá) myl3 質(zhì)粒檢測(cè)心肌特異性因子表達(dá)
一、材料
二、實(shí)驗(yàn)步驟
三、實(shí)驗(yàn)分組
四、方法
五、結(jié)果
小結(jié)
第五節(jié) 心肌特異性因子的免疫熒光檢測(cè)
目的
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
參考文獻(xiàn)
第四部分 myl3 促進(jìn)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的體內(nèi)研究
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
參考文獻(xiàn)
綜述(一)
參考文獻(xiàn)
綜述(二)
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文
縮略語(yǔ)表
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鱖魚(yú)與鰱魚(yú)肌球蛋白輕鏈2啟動(dòng)子的克隆及其序列比較分析[J]. 趙發(fā)蘭,周瑞雪,成嘉,陳敦學(xué),農(nóng)小獻(xiàn),蒙濤,張建社,褚武英. 湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[2]Effect of 5-azacytidine on the Protein Expression of Porcine Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in vitro[J]. Neng-Sheng Ye, Rong-Li Zhang, Yan-Feng Zhao, Xue Feng, Yi-Ming Wang, and Guo-An Luo* Institute of Biomedicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China.. Genomics Proteomics & Bioinformatics. 2006(01)
[3]大鼠慢性心肌梗死模型的制作[J]. 張春蕾,王躍民,李源,孟華,朱肖星,黃晨. 心臟雜志. 2005(06)
[4]心肌細(xì)胞裂解液對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化誘導(dǎo)作用的研究[J]. 袁巖,陳連鳳,張抒揚(yáng),吳煒,陳浩,嚴(yán)曉偉. 中華心血管病雜志. 2005(02)
[5]心肌梗死動(dòng)物模型研究的最新進(jìn)展[J]. 孫慧君,范江霖. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2005(01)
本文編號(hào):3333349
【文章來(lái)源】:蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:155 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
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Abstract
背景
參考文獻(xiàn)
第一部分 促心肌分化基因篩選
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
參考文獻(xiàn)
第二部分 小鼠心肌梗死模型建立
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
參考文獻(xiàn)
第三部分 myl3 促進(jìn)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的體外研究
第一節(jié) 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、小結(jié)
第二節(jié) 轉(zhuǎn)染 myl3-siRNA 檢測(cè)心肌特異性因子表達(dá)
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
第三節(jié) 構(gòu)建過(guò)表達(dá) myl3 質(zhì)粒
目的
一、材料
二、實(shí)驗(yàn)步驟
三、方法
四、結(jié)果
第四節(jié) 轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá) myl3 質(zhì)粒檢測(cè)心肌特異性因子表達(dá)
一、材料
二、實(shí)驗(yàn)步驟
三、實(shí)驗(yàn)分組
四、方法
五、結(jié)果
小結(jié)
第五節(jié) 心肌特異性因子的免疫熒光檢測(cè)
目的
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
參考文獻(xiàn)
第四部分 myl3 促進(jìn)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的體內(nèi)研究
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
參考文獻(xiàn)
綜述(一)
參考文獻(xiàn)
綜述(二)
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文
縮略語(yǔ)表
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鱖魚(yú)與鰱魚(yú)肌球蛋白輕鏈2啟動(dòng)子的克隆及其序列比較分析[J]. 趙發(fā)蘭,周瑞雪,成嘉,陳敦學(xué),農(nóng)小獻(xiàn),蒙濤,張建社,褚武英. 湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[2]Effect of 5-azacytidine on the Protein Expression of Porcine Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in vitro[J]. Neng-Sheng Ye, Rong-Li Zhang, Yan-Feng Zhao, Xue Feng, Yi-Ming Wang, and Guo-An Luo* Institute of Biomedicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China.. Genomics Proteomics & Bioinformatics. 2006(01)
[3]大鼠慢性心肌梗死模型的制作[J]. 張春蕾,王躍民,李源,孟華,朱肖星,黃晨. 心臟雜志. 2005(06)
[4]心肌細(xì)胞裂解液對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化誘導(dǎo)作用的研究[J]. 袁巖,陳連鳳,張抒揚(yáng),吳煒,陳浩,嚴(yán)曉偉. 中華心血管病雜志. 2005(02)
[5]心肌梗死動(dòng)物模型研究的最新進(jìn)展[J]. 孫慧君,范江霖. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2005(01)
本文編號(hào):3333349
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