生長(zhǎng)分化因子15對(duì)人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的作用及機(jī)制研究在動(dòng)脈粥樣硬化中,血管內(nèi)皮受損是其發(fā)生的始動(dòng)因素。生長(zhǎng)分化因子15（Growth differentiation factor15,GDF-15）的表達(dá)可在組織器官缺氧、炎癥、氧化損傷等情況下迅速上調(diào),具有保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞,拮抗內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用,是防治心血管病尤其是抗動(dòng)脈粥樣硬化的重要因素。[目的]1、研究GDF-15對(duì)人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響及與ERKl/2信號(hào)通路的關(guān)系。2、研究GDF-15對(duì)H202誘導(dǎo)人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響及與PI3K/Akt信號(hào)通路的關(guān)系。[方法]體外培養(yǎng)人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞后隨機(jī)分組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：1、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)分組：（1）空白對(duì)照組；（2）低濃度GDF-15組；（3）高濃度GDF-15組；（4）低濃度GDF-15+PD98059組；（5）高濃度GDF-15+PD98059組。各組培養(yǎng)24h后用CCK8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,Western blot檢測(cè)磷酸化ERK （p-ERK）蛋白相對(duì)表達(dá)量。2、細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)分組：（1）空白對(duì)照組；（2）H2O2組；（3）低濃度GDF-15+H202組；（4）... 

【文章來(lái)源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度GDF-15刺激主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞24h后CCK8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖情況

高濃度GDF-15處理后細(xì)胞增殖無(wú)明顯變化(0.492±0.012vs0.503±0.023,P>0.05);經(jīng)抑制劑預(yù)處理（0.488±0.034)后與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。圖4為各組細(xì)胞倒置顯微鏡下細(xì)胞增殖情況。2.5-1本2.0 -紀(jì) r*營(yíng) 1.5 ?5 ▲11.0- ~ \ pL JL5 ：卞 ，0.5- ?‘ :：- ■0 0 1 I I i . 難. ，靈JA B C D E圖3不同濃度GDF-15刺激主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞24h后CCK8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。A:空白對(duì)照組；B：低濃度GDF-15組；C:髙濃度GDF-15組T D：低濃度GDF-15+PD98059 組;E；高濃度 GDF-15+PD98059 組■/P<0.05，與空白對(duì)照組比較;▲PcO.OS，與低濃度GDF-15組比較。25

髙濃度 GDF-15+PD98059 組。1.2 Western Blot檢測(cè)各增殖實(shí)驗(yàn)組p-ERK蛋白相對(duì)表達(dá)量圖5顯示根據(jù)Western blot條帶灰度值計(jì)算得出的增殖實(shí)驗(yàn)各組p-ERK蛋白的相對(duì)表達(dá)量（灰度值比值=p-ERK灰度值/ERK灰度值）。與對(duì)照組相比，經(jīng)低濃度GDF-15處理細(xì)胞后 P-ERK 蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著提高(0.912±0.038vs0.593±0.045,P<0.05),而抑制劑預(yù)處理后上述作用消失，p-ERK蛋白的相對(duì)表達(dá)量降低到（0.126±0.011)，與低濃度GDF-15組比較P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；經(jīng)高濃度GDF-15處理細(xì)胞后P-ERK蛋白的相對(duì)表達(dá)量無(wú)明顯變化（0.526±0.011vs0.593±0.045，P>0.05)，但抑制劑預(yù)處理（0.068±0.002)后P-ERK蛋白的相對(duì)表達(dá)量降低，與高濃度GDF-15組比較P<0.05

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]慢性心力衰竭患者血清生長(zhǎng)分化因子-15、腦利鈉肽水平與心功能狀態(tài)的關(guān)系[J]. 武德梅,張龍,陳超,張明,劉袁穎.  中國(guó)老年學(xué)雜志. 2012(06)
[2]人血清生長(zhǎng)分化因子15與器質(zhì)性心臟病左心室重構(gòu)程度的相關(guān)性研究[J]. 張芃,鄭哲,魏英杰,胡盛壽,段福建.  中國(guó)分子心臟病學(xué)雜志. 2010(02)

碩士論文
[1]探討冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張發(fā)生的相關(guān)機(jī)制及生長(zhǎng)分化因子-15的內(nèi)皮保護(hù)作用[D]. 顏毅.中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3313035