發(fā)布時間：2021-07-26 12:06

　　目的:研究血管緊張素（1-7）[Ang-（1-7）]能否通過抑制JAK/STAT信號通路對抗高糖誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）損傷。方法:CCK-8檢測細胞存活率;Western blot法檢測內(nèi)皮細胞JAK2、STAT3、pJAK2、p-STAT3、cleaved caspase-3和內(nèi)皮型一氧化氮合酶（e NOS）的蛋白水平;Hoechst 33258染色熒光顯微鏡照相法檢測內(nèi)皮細胞凋亡數(shù)量;DCFH-DA染色熒光顯微鏡照相法檢測內(nèi)皮細胞內(nèi)活性氧簇（ROS）的水平。結(jié)果:應用高糖（40 mmol/L）處理HUVECs 12⁴8 h能明顯上調(diào)JAK2的磷酸化水平,于24 h達最高峰;在24⁴8 h能明顯上調(diào)STAT3的磷酸化水平,于36 h最高;在12²4 h能明顯上調(diào)cleaved caspase-3的表達,在3⁴8 h隨著時間延長,e NOS的表達逐漸降低。2μmol/L的Ang-（1-7）或20μmol/L的JAK/STAT通路抑制劑AG490預處理0.5 h可顯著抑制由高糖引起的內(nèi)... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2017,33(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

高糖促進HUVECs的p-JAK2和p-STAT3蛋白水平增加

比較，差異顯著(P＜0.01)。2μmol/LAng-(1-7)或20μmol/LAG490本身對細胞凋亡數(shù)量無明顯影響，見圖3。Figure2．Ang-(1-7)andAG490antagonizedhighglucose(HG，40mmol/Lglucose)-inducedcytotoxicityintheHUVECs．CTL:control．Mean±SD．n=5．＊＊P＜0.01vscontrolgroup;##P＜0.01vsHGgroup．圖2Ang-(1-7)與AG490減輕高糖引起的HUVECs的細胞毒性Figure3．TheinhibitoryeffectofAng-(1-7)andAG490onHG-inducedapoptosisoftheHUVECs．Mean±SD．n=5．＊＊P＜0.01vscontrolgroup;##P＜0.01vsHGgroup．圖3Ang-(1-7)與AG490對高糖致人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡的抑制作用·484·

可使胞內(nèi)DCFH的平均熒光強度(meanfluorescenceintensity，MFI)明顯增強，與正常對照組相比，2組差異有統(tǒng)計學顯著性(P＜0.01)。但經(jīng)2μmol/LAng-(1-7)或20μmol/LAG490預處理30min可使胞內(nèi)ROS堆積明顯減少，與高糖組相比，差異有統(tǒng)計學顯著性(P＜0.01)。而單獨用2μmol/LAng-(1-7)或20μmol/LAG490預處理則對胞內(nèi)ROS生成無明顯作用，見圖4。Figure4．Ang-(1-7)andAG490reducedHG-inducedaccumulationofreactiveoxygenspecies(ROS)intheHUVECs．Mean±SD．n=5．＊＊P＜0.01vscontrolgroup;##P＜0.01vsHGgroup．圖4Ang-(1-7)與AG490減少高糖引起的人臍靜脈內(nèi)皮細胞內(nèi)活性氧簇的堆積5Ang-(1-7)與AG490明顯減弱高糖介導的HUVECs中cleavedcaspase-3表達的升高和eNOS表達的下調(diào)高糖使人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡蛋白cleavedcaspase-3的表達升高，eNOS表達水平下降，且具有時間和劑量依籟性，與對照組相比，差異有統(tǒng)計學顯著性(P＜0.01)，見圖5。應用高糖處理血管內(nèi)皮細胞24h使eNOS蛋白的表達水平下降，與對照組相比，差異有統(tǒng)計學顯著性(P＜0.01)。但是，在高糖處理血管內(nèi)皮細胞前，應用2μmol/LAng-(1-7)或20μmol/LAG490預處理30min使高糖對eNOS蛋白的表達下調(diào)作用顯著減弱，與HG處理組比較，差異有統(tǒng)計學顯著性(P＜0.01)。2μmol/LAng-(1-7)或20μmol/LAG490本身對內(nèi)皮細胞eNOS蛋白表達水平無明顯的影響。另一方面，應用高糖處理血管內(nèi)皮細胞24h使cleavedcaspase-3蛋白的表達水平升高，與對照組相比，差異有統(tǒng)計學顯著性(P＜0.01)。但是，在高糖處理血管內(nèi)皮細胞前，應用2μmol/LAng-(1-7)或20μmol/LAG490預處理30min使高糖對cleavedcaspase-3蛋白表達的升高作用顯著減弱，與HG處理組比較，差異有統(tǒng)計學顯著性(P＜0.01)。2μ

【參考文獻】：
期刊論文
[1]JAK/STAT信號通路在高糖誘導人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷中的作用[J]. 廖靜秋,林佳瓊,張偉杰,許翎,智喜梅,林凱,吳文.  中國病理生理雜志. 2016(03)



本文編號：3303535