發(fā)布時(shí)間：2021-07-23 14:43

　　目的心肌成纖維細(xì)胞是心臟發(fā)生纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,影響心肌成纖維細(xì)胞的生長可以有效地抑制心肌纖維化的發(fā)生發(fā)展。通過本課題組前期研究,我們確定了長鏈非編碼RNA中的LncRNA GAS5對心肌成纖維細(xì)胞的焦亡以及心臟纖維化起到重要的作用。進(jìn)一步的研究表明,DNMT1的下調(diào)通過逆轉(zhuǎn)心臟成纖維細(xì)胞中的啟動子高甲基化而導(dǎo)致GAS5表達(dá)增加。本實(shí)驗(yàn)我們旨在通過研究LncRNA GAS5對心肌成纖維細(xì)胞焦亡調(diào)控的機(jī)制,為心臟纖維化提供了新的治療目標(biāo)。方法取SD大鼠40只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對照組,各20只。實(shí)驗(yàn)組大鼠皮下注射ISO,對照組大鼠皮下注射生理鹽水,連續(xù)兩周。HE和Masson,Sirius染色觀察大鼠心臟組織的病理學(xué)改變。Western blot以及qRT-PCR分析組織中caspase1,NLRP3,DNMT1和Col11的表達(dá)。提取SD乳鼠的心肌成纖維細(xì)胞,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染LncRNA GAS5的過表達(dá)質(zhì)粒（pc DNA3.1-GAS5）及其陰性對照,LncRNA GAS5的si RNA（si GAS5）及其陰性對照,24小時(shí)后收集細(xì)胞,用qRT-PCR檢測GAS5,DNMT1,一型膠原（C... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HE染色后，ISO處理后的實(shí)驗(yàn)組心臟樣本與對照組心臟樣本的病理學(xué)變化

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文252（n=3，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。N對照組200×ISO模型組200×圖2:Masson染色后，ISO處理后的實(shí)驗(yàn)組心臟樣本與正常組心臟樣本的病理學(xué)變化Fig.2MassonstainingofSDRat"smyocardialtissueSiriusred染色結(jié)果:膠原纖維經(jīng)天狼星紅染液染色后會呈現(xiàn)為黃色或紅色。與正常組N組進(jìn)行比較，ISO組中膠原排列無序且增多，甚至充滿部分區(qū)域，相比之下，正常組排列明顯整齊，形態(tài)較為一致，如Fig.3（n=3，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。N對照組200×ISO模型組200×

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文26圖3:Siriusred染色后，IS0處理后的實(shí)驗(yàn)組心臟樣本與正常組心臟標(biāo)本的病理學(xué)變化Fig.3MassonstainingofSDRat"smyocardialtissue免疫組化，Westernblot和QRT-PCR結(jié)果均表明，經(jīng)ISO處理后的大鼠心臟組織中，Caspase1，NLRP3的表達(dá)明顯升高，結(jié)果如Fig.4，F(xiàn)ig.5和Fig.6。（n=3，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。N對照組200×ISO模型組200×


本文編號：3299486